| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 缩写词表 | 第8-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-36页 |
| ·棉花的概述 | 第9页 |
| ·植物基因组研究的概述 | 第9-14页 |
| ·棉花功能基因组研究概述 | 第9-10页 |
| ·利用突变体开展正向和反向遗传学研究 | 第10-11页 |
| ·代谢组学和蛋白质组学 | 第11-12页 |
| ·生物信息学的发展 | 第12-13页 |
| ·基因表达谱分析 | 第13-14页 |
| ·T-DNA标签技术及其在植物功能基因组研究中的应用 | 第14-26页 |
| ·T-DNA转移和整合的机理 | 第15-18页 |
| ·T-DNA插入标签研究基因功能的策略 | 第18-23页 |
| ·获得功能突变体 | 第23-24页 |
| ·T-DNA插入突变在棉花基因功能研究中的应用现状 | 第24-26页 |
| ·农杆菌介导的基因转化法 | 第26-31页 |
| ·农杆菌转化的机理 | 第27-28页 |
| ·影响农杆菌T-DNA转移的因素 | 第28-31页 |
| ·增强子捕获元件插入片段侧翼序列的扩增及分析 | 第31-33页 |
| ·质粒拯救(Plasmid rescue) | 第31页 |
| ·反向PCR(I-PCR) | 第31-32页 |
| ·热不对称交错PCR(Thermal asymmetric interlaced PCR) | 第32页 |
| ·T-linker PCR(T-linker-specific ligation PCR) | 第32-33页 |
| ·PCR-Walking | 第33页 |
| ·本研究的意义及技术路线 | 第33-36页 |
| ·本研究的意义 | 第33-35页 |
| ·技术路线 | 第35-36页 |
| 2 实验材料与方法 | 第36-47页 |
| ·实验材料 | 第36-38页 |
| ·品种 | 第36页 |
| ·农杆菌菌株和转化载体 | 第36页 |
| ·部分试剂来源 | 第36-37页 |
| ·培养条件及其不同培养基配方 | 第37-38页 |
| ·缓冲液和培养基配方 | 第38页 |
| ·实验方法 | 第38-47页 |
| ·以棉花下胚轴为受体的遗传转化 | 第38-40页 |
| ·转化愈伤及再生植株不同器官的GUS染色 | 第40页 |
| ·转化材料的分子鉴定 | 第40-42页 |
| ·转基因当代材料的农艺性状考察 | 第42页 |
| ·采用TAIL-PCR、PCR-Walking方法扩增棉花T-DNA侧翼序列。 | 第42-47页 |
| 3 结果与分析 | 第47-59页 |
| ·棉花下胚轴转化及转基因株系的获得 | 第47页 |
| ·Enhancer trap T0代群体GUS检测 | 第47-51页 |
| ·GUS基因在突变群体的表达频率 | 第47-48页 |
| ·GUS基因在不同体细胞胚胎发育阶段中的表达频率 | 第48页 |
| ·GUS基因在根中的表达模式 | 第48-49页 |
| ·GUS基因在花器官中的表达模式 | 第49-51页 |
| ·转基因再生植株的PCR检测 | 第51-52页 |
| ·转基因再生植株的农艺性状考察 | 第52-55页 |
| ·采用TAIL-PCR、PCR-Walking的方法扩增棉花T-DNA侧翼序列 | 第55-59页 |
| ·运用TAIL-PCR方法扩增T-DNA侧翼序列 | 第55页 |
| ·运用PCR-Walking方法扩增T-DNA侧翼序列 | 第55-59页 |
| 4 讨论 | 第59-63页 |
| ·Enhancer trap系统的有效性 | 第59页 |
| ·关于T-DNA插入饱和突变体库的构建 | 第59-60页 |
| ·GUS基因表达的时空特性 | 第60-61页 |
| ·T-DNA侧翼序列的分离 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
