内容摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-11页 |
前言 | 第11-12页 |
第一篇 文献综述 | 第12-30页 |
1 兔球虫的研究进展 | 第12-23页 |
2 cDNA文库构建技术及其在寄生虫研究中的应用 | 第23-30页 |
第二篇 研究内容 | 第30-99页 |
第一章 兰州地区兔球虫种类调查及E.stiedai致病性研究 | 第30-43页 |
1 材料和方法 | 第30-31页 |
2 结果 | 第31-40页 |
·兰州地区家兔球虫虫种调查结果 | 第31-36页 |
·单卵囊分离E.stiedai球虫纯株 | 第36页 |
·E.stiedai球虫兰州株孢子生殖过程 | 第36-38页 |
·人工感染后临床病状 | 第38页 |
·肝脏剖检变化及肝脏病变记分 | 第38页 |
·肝指数及血清中转氨酶的测定 | 第38页 |
·肝脏病理组织学观察 | 第38-40页 |
3 讨论 | 第40-41页 |
4 小结 | 第41-43页 |
第二章 E.stiedai子孢子cDNA文库的构建与鉴定 | 第43-56页 |
1 材料和方法 | 第43-51页 |
2 结果 | 第51-54页 |
·总RNA的提取和mRNA的分离结果 | 第51-52页 |
·双链cDNA合成结果 | 第52页 |
·cDNA文库滴度的测定结果 | 第52页 |
·cDNA文库插入片段大小分析 | 第52-54页 |
3 讨论 | 第54-55页 |
4 小结 | 第55-56页 |
第三章 E.stiedai子孢子MIC5蛋白基因的筛选、表达及重组蛋白的纯化 | 第56-69页 |
1 材料与方法 | 第56-60页 |
2 结果 | 第60-67页 |
·E.tenella微线蛋白5部分基因片段的扩增 | 第60页 |
·E.stiedai子孢子微线蛋白5(MIC-5)基因阳性克隆的筛选结果 | 第60-61页 |
·MIC5基因cDNA的测序结果与序列分析 | 第61-64页 |
·MIC5蛋白基因的PCR扩增结果 | 第64-65页 |
·原核表达载体pETMIC-5的鉴定 | 第65页 |
·pETMIC5诱导表达产物的检测及鉴定 | 第65-66页 |
·重组蛋白MIC-5的纯化结果 | 第66-67页 |
3 讨论 | 第67-68页 |
4 小结 | 第68-69页 |
第四章 E.stiedai MIC-5基因在毕赤酵母中的表达及重组蛋白免疫原性研究 | 第69-81页 |
1 材料与方法 | 第69-74页 |
2 结果 | 第74-78页 |
·MIC-5基因的扩增结果 | 第74页 |
·重组质粒pPICZαAMIC-5的鉴定结果 | 第74-75页 |
·Mut~+表型重组酵母菌的筛选 | 第75-76页 |
·重组酵母菌的PCR鉴定 | 第76-77页 |
·MIC-5基因在重组酵母菌中转录水平的检测 | 第77页 |
·表达产物的检测 | 第77-78页 |
·重组蛋白MIC-5免疫小鼠试验结果 | 第78页 |
3 讨论 | 第78-80页 |
4 小结 | 第80-81页 |
第五章 兔IFN-γ基因的克隆及其在真核细胞中的表达 | 第81-90页 |
1 材料和方法 | 第81-84页 |
2 结果 | 第84-88页 |
·兔IFN-γ基因RT-PCR扩增结果 | 第84页 |
·重组质粒pTIFN-γ的鉴定结果 | 第84页 |
·兔IFN-γ基因cDNA序列测定结果及其推导的氨基酸序列 | 第84-86页 |
·不同物种IFN-γ基因的遗传进化分析 | 第86页 |
·重组真核表达载体pVAXIFN-γ的鉴定结果 | 第86-87页 |
·重组真核表达载体pVAXIFN-γ在BHK细胞上的表达及检测 | 第87-88页 |
3 讨论 | 第88-89页 |
4 小结 | 第89-90页 |
第六章 IFN-γ介导的重组蛋白MIC-5动物免疫试验 | 第90-99页 |
1 材料与方法 | 第90-93页 |
2 结果 | 第93-96页 |
·免疫组血清中抗E.stiedai子孢子MIC-5蛋白ELISA抗体的检测 | 第93页 |
·免疫组细胞免疫水平的检测 | 第93页 |
·攻虫试验结果 | 第93-96页 |
3 讨论 | 第96-98页 |
4 小结 | 第98-99页 |
结论 | 第99-100页 |
致谢 | 第100-101页 |
参考文献 | 第101-109页 |
附录 | 第109-112页 |
博士后个人简历 | 第112-114页 |
博士生期间发表的学术论文、专著 | 第114-115页 |
博士后期间发表的学术论文、专著 | 第115-116页 |
永久通信地址 | 第116页 |