| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-11页 |
| 1 绪论 | 第11-27页 |
| ·引言 | 第11-12页 |
| ·病害发生分布与危害 | 第12-14页 |
| ·小麦矮腥黑穗病地理分布与危害 | 第12-13页 |
| ·小麦矮腥黑穗菌寄主范围与危害症状 | 第13页 |
| ·小麦矮腥黑穗病发病条件 | 第13-14页 |
| ·小麦矮腥黑穗菌传播途径 | 第14页 |
| ·病原菌生物学特性 | 第14-17页 |
| ·小麦矮腥黑穗菌分类地位 | 第14-15页 |
| ·小麦矮腥黑穗菌生活史 | 第15-16页 |
| ·病原菌冬孢子生物学特性 | 第16-17页 |
| ·小麦矮腥黒穗病菌检验检疫技术研究现状 | 第17-25页 |
| ·病株症状识别 | 第17页 |
| ·冬孢子形态鉴定 | 第17-19页 |
| ·冬孢子自发荧光检测 | 第19页 |
| ·冬孢子萌发实验 | 第19-20页 |
| ·血清学鉴定 | 第20页 |
| ·生化鉴定 | 第20-21页 |
| ·分子生物学检测 | 第21-25页 |
| ·研究目标与内容 | 第25-26页 |
| ·技术路线 | 第26页 |
| ·创新点 | 第26-27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-41页 |
| ·供试菌株 | 第27页 |
| ·主要仪器设备 | 第27-28页 |
| ·主要试剂 | 第28-29页 |
| ·菌株培养试剂 | 第28页 |
| ·菌丝基因组DNA 提取试剂 | 第28页 |
| ·冬孢子DNA 提取试剂 | 第28页 |
| ·PCR 扩增、电泳试剂 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-41页 |
| ·样品的制备 | 第29-33页 |
| ·小麦矮腥黑穗菌常规PCR 检测体系建立 | 第33-35页 |
| ·小麦矮腥黑穗菌RTi-PCR 检测体系的建立检测体系建立 | 第35-38页 |
| ·实际样品检测 | 第38-39页 |
| ·小麦矮腥黑穗菌检测试剂盒的研制 | 第39-41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-71页 |
| ·TCK、TCT 冬孢子萌发结果 | 第41-42页 |
| ·TCK、TCT 基因组DNA 提取 | 第42-45页 |
| ·TCK、TCT 冬孢子DNA 提取 | 第42-43页 |
| ·TCK、TCT 菌丝DNA 提取 | 第43-45页 |
| ·常规PCR 检测体系 | 第45-53页 |
| ·常规PCR 检测体系的建立 | 第45-47页 |
| ·对照设置 | 第47-50页 |
| ·引物特异性验证 | 第50-53页 |
| ·检测灵敏度验证 | 第53页 |
| ·PCR 产物测序验证扩增条带的正确性 | 第53页 |
| ·RTi-PCR 标准曲线的建立 | 第53-61页 |
| ·SYBR Green I 荧光定量PCR 体系的建立 | 第53-57页 |
| ·TaqMan 荧光定量PCR 检测体系 | 第57-60页 |
| ·常规PCR 与荧光定量PCR 的检测性能比较 | 第60-61页 |
| ·样品的实际检测 | 第61-68页 |
| ·采用常规PCR 进行实际样品中TCK 检测 | 第61-67页 |
| ·荧光PCR 法实际检测样品中TCK | 第67-68页 |
| ·TCK 检测试剂盒的研制 | 第68-71页 |
| 4 讨论 | 第71-77页 |
| ·DNA 提取 | 第71-72页 |
| ·冬孢子破壁 | 第71页 |
| ·TCK/TCT 基因组DNA 提取方法的比较 | 第71-72页 |
| ·小麦矮腥黑穗病检测体系建立 | 第72-77页 |
| ·TCK 分子鉴定技术 | 第72页 |
| ·PCR 扩增正确性的验证和不同测序方法比较 | 第72-73页 |
| ·无害化参照体系的构建与意义 | 第73页 |
| ·常规PCR 的应用前景及与荧光定量PCR 的比较 | 第73-74页 |
| ·检测假阳性与假阴性的排除与降低 | 第74-75页 |
| ·RTi－PCR 检测体系的比较与评价 | 第75-77页 |
| 5 主要结论与后续工作展望 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-85页 |
| 附录 | 第85-93页 |
| 攻读硕士学位期间参与的科研项目 | 第93页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第93页 |
