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羊草乙醛脱氢酶基因的克隆及CBF2转录因子功能的研究

摘要第1-4页
Abstract第4-12页
1 绪论第12-33页
   ·植物在逆境胁迫下诱导表达的基因第12-18页
     ·编码与逆境胁迫相关的功能蛋白基因第13-15页
     ·渗透调节物质生物合成的基因第15-16页
     ·与抗氧化防御相关的酶基因第16-17页
     ·调控基因表达的转录因子第17-18页
     ·感应和传导胁迫信号的蛋白激酶第18页
   ·植物对逆境胁迫应答的信号传导途径第18-20页
     ·Ca~(2+)依赖的CDPK信号途径第19页
     ·蛋白激酶MAPK途径第19-20页
     ·Ca~(2+)依赖的SOS信号途径第20页
   ·植物逆境胁迫诱导基因的表达与调控第20-25页
     ·转录水平上的表达调控第21-24页
     ·转录后水平的表达调控第24-25页
   ·与逆境胁迫相关转录因子的研究第25-28页
     ·bZIP类转录因子第25页
     ·MYB/MYC类转录因子第25-26页
     ·AP2/EREBP类转录因子第26-27页
     ·WRKY类转录因子第27-28页
   ·植物抗逆基因工程研究进展第28-31页
     ·编码渗透调节物质合成酶的基因第28-29页
     ·LEA类蛋白基因第29-30页
     ·氧化胁迫相关基因第30页
     ·编码转录因子的调节基因第30-31页
     ·与信号传导有关的蛋白激酶基因第31页
   ·本研究的目的意义第31-33页
2 羊草乙醛脱氢酶基因的克隆及其表达模式的研究第33-67页
   ·引言第33-34页
   ·材料与方法第34-44页
     ·材料第34页
     ·羊草耐盐相关生理指标的测定及其耐盐性分析第34-36页
     ·羊草总RNA的提取第36-37页
     ·羊草乙醛脱氢酶基因的克隆第37-43页
     ·羊草乙醛脱氢酶基因的表达—Real Time RT-PCR第43-44页
   ·结果与分析第44-63页
     ·盐胁迫对羊草叶片中脯氨酸含量的影响第44页
     ·盐胁迫对羊草叶片中过氧化氢酶活性的影响第44-45页
     ·盐胁迫对羊草叶片中蛋白质含量的影响第45-46页
     ·盐胁迫对羊草叶片中丙二醛含量的影响第46页
     ·盐胁迫下灰绿型羊草与黄绿型羊草各生理指标的变化第46-47页
     ·高质量羊草RNA的获得第47-48页
     ·羊草乙醛脱氢酶ALDH基因片段的RT-PCR扩增第48页
     ·基因片段的序列分析第48-51页
     ·5’RACE和3’RACE第51-55页
     ·ALDH全长cDNA的获得第55页
     ·LC-ALDH生物信息学分析及其功能预测第55-62页
     ·羊草乙醛脱氢酶基因的表达—Real Time RT-PCR第62-63页
   ·讨论第63-65页
     ·实验材料的选择第63页
     ·羊草ALDH基因的定位第63-64页
     ·羊草ALDH基因的功能及表达分析第64-65页
     ·关于后续工作第65页
   ·本章小结第65-67页
3 CBF2基因在烟草中的转化、遗传及其耐盐性研究第67-89页
   ·引言第67-68页
   ·材料与方法第68-76页
     ·材料第68页
     ·拟南芥CBF2基因的克隆及序列分析第68-70页
     ·逆境诱导型启动子rd29A的克隆及序列分析第70-71页
     ·植物表达载体构建第71-73页
     ·农杆菌介导法转化烟草第73页
     ·转基因植株的鉴定第73-75页
     ·转基因烟草的遗传分析第75-76页
     ·转基因烟草植株的抗盐性测定第76页
     ·转基因烟草植株的相对电导率测定第76页
   ·结果与分析第76-85页
     ·CBF2基因的克隆第76-77页
     ·CBF2基因的序列分析第77页
     ·rd29A启动子的克隆第77-78页
     ·rd29A 启动子的序列分析第78-79页
     ·植物表达载体pBI-RD-CBF_2的构建第79-81页
     ·不定芽的kan抗性筛选及转化植株再生第81页
     ·T_0代转基因植株的PCR检测第81-82页
     ·T_0代转基因植株的Southern杂交检测第82页
     ·T_0代转基因植株的RT-PCR检测第82-83页
     ·T_1代烟草小苗的Kan抗性筛选第83页
     ·T_2代烟草小苗的Kan抗性筛选第83-84页
     ·转CBF2基因烟草抗盐性的鉴定第84-85页
     ·转基因烟草的电导率测定第85页
   ·讨论第85-88页
     ·抗盐碱目的基因的的选择第85-86页
     ·启动子的选择第86-87页
     ·转基因植株的盐胁迫耐性第87页
     ·CBF2基因的表达对烟草植株表型的影响第87-88页
   ·本章小结第88-89页
结论第89-90页
 1 羊草乙醛脱氢酶基因的克隆及其表达模式的研究第89页
 2 CBF2基因在烟草中的转化、遗传及其抗盐性研究第89-90页
本文的创新之处第90-91页
展望第91-92页
参考文献第92-110页
附录第110-112页
攻读学位期间发表的学术论文第112-113页
致谢第113-114页

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