| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 缩略语表(Abbreviation) | 第12-13页 |
| 第1章 文献综述 | 第13-58页 |
| ·冠状病毒 | 第13-38页 |
| ·冠状病毒的发现及命名 | 第13页 |
| ·冠状病毒的分类 | 第13-14页 |
| ·冠状病毒的分子生物学 | 第14-38页 |
| ·鸡传染性支气管炎病毒(IBV) | 第38-49页 |
| ·IBV的流行病学 | 第39-40页 |
| ·IB的临床症状和病理变化 | 第40-41页 |
| ·IB的诊断和防治 | 第41-42页 |
| ·IBV的理化性质 | 第42-43页 |
| ·IBV引起的天然免疫反应 | 第43页 |
| ·IBV的分子生物研究概括 | 第43-49页 |
| ·病毒与细胞的相互作用 | 第49-58页 |
| ·病毒进入细胞的形式 | 第49-54页 |
| ·病毒受体的研究进展 | 第54-58页 |
| 第2章 研究目的和意义 | 第58-59页 |
| 第3章 材料与方法 | 第59-78页 |
| ·试验材料 | 第59-64页 |
| ·毒株、细胞与菌株 | 第59页 |
| ·载体与质粒 | 第59页 |
| ·工具酶及主要试剂 | 第59-61页 |
| ·培养基与抗生素及其配制 | 第61-62页 |
| ·主要缓冲液与相关试剂及其配制 | 第62-64页 |
| ·实验动物 | 第64页 |
| ·试验方法 | 第64-78页 |
| ·IBV病毒的增殖和纯化 | 第64-65页 |
| ·IBV EID_(50)的滴定 | 第65页 |
| ·IBV在HeLa细胞上的增殖、传代 | 第65页 |
| ·高免兔血清的制备 | 第65页 |
| ·样品总RNA的提取 | 第65-66页 |
| ·IBV的RT-PCR检测 | 第66页 |
| ·RT-PCR/PCR产物或酶切产物的电泳检测 | 第66-67页 |
| ·PCR产物或酶切产物回收与纯化 | 第67页 |
| ·外源DNA片段与质粒载体的连接反应 | 第67-68页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备(氯化钙法) | 第68页 |
| ·连接产物的转化 | 第68页 |
| ·质粒的制备与鉴定 | 第68-70页 |
| ·限制性内切酶酶切反应 | 第70-71页 |
| ·线性质粒DNA末端去磷酸化 | 第71页 |
| ·血凝及血凝抑制实验 | 第71页 |
| ·神经氨酸酶处理IBV及HeLa细胞 | 第71页 |
| ·胰酶、EDAT处理HeLa细胞 | 第71页 |
| ·人氨基肽酶N(hAPN)阻断实验 | 第71-72页 |
| ·鸡APN全长基因的克隆 | 第72页 |
| ·重组细菌的诱导表达 | 第72页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第72页 |
| ·质粒转染(脂质体介导转染法) | 第72-73页 |
| ·间接免疫荧光试验(IFA)检测目的蛋白的表达 | 第73页 |
| ·Western blot检测目的蛋白的活性 | 第73-75页 |
| ·ELISA试验检测体外表达的gAPN的受体功能 | 第75页 |
| ·半数细胞培养物感染量(TCID_(50))的测定 | 第75-76页 |
| ·微量中和试验(固定病毒-稀释血清法) | 第76页 |
| ·流式细胞术 | 第76页 |
| ·半定量RT-PCR | 第76-77页 |
| ·试验中所使用的寡核苷酸引物 | 第77-78页 |
| 第4章 结果与分析 | 第78-105页 |
| ·IBV毒株适应人源HeLa细胞的研究 | 第78-89页 |
| ·不同IBV毒株在鸡胚上的增殖及其滴度的计算 | 第78页 |
| ·兔抗IBV血清的制备 | 第78-79页 |
| ·抗血清的特异性的检测 | 第79页 |
| ·不同IBV毒株在HeLa细胞上的增殖 | 第79-86页 |
| ·影响IBV感染HeLa细胞的因素的研究 | 第86-89页 |
| ·IBV受体的鉴定 | 第89-105页 |
| ·克隆全长的gAPN序列 | 第89-93页 |
| ·gAPN系统进化及其蛋白特性的信息生物学分析 | 第93-99页 |
| ·gAPN的原核表达及纯化 | 第99-100页 |
| ·兔抗gAPNp血清的制备 | 第100-101页 |
| ·gAPN原核表达产物(gAPNp)活性的检测 | 第101-102页 |
| ·真核表达载体的构建 | 第102-103页 |
| ·间接免疫荧光检测gAPN蛋白的受体功能 | 第103页 |
| ·细胞流式分选术检测gAPN蛋白的受体功能 | 第103页 |
| ·半定量RT-PCR检测gAPN蛋白的受体功能 | 第103-105页 |
| 第5章 讨论与结论 | 第105-118页 |
| ·讨论 | 第105-116页 |
| ·冠状病毒的分类 | 第105页 |
| ·冠状病毒的跨种感染 | 第105-107页 |
| ·S蛋白是决定冠状病毒的种属特异性的主要因素 | 第107-108页 |
| ·细胞表面的受体是影响冠状病毒感染的因素之一 | 第108-110页 |
| ·IBV血凝性与IBV跨种感染的关系 | 第110-111页 |
| ·其他因素对于IBV跨种感染的影响 | 第111-112页 |
| ·IBV天然受体的鉴定 | 第112-116页 |
| ·结论 | 第116-118页 |
| 参考文献 | 第118-138页 |
| 致谢 | 第138-139页 |
| Curriculum Vitae | 第139页 |