内容提要 | 第1-8页 |
第一章 前言 | 第8-15页 |
·核酸疫苗的免疫机理 | 第8-9页 |
·人巨细胞病毒的研究现状 | 第9-11页 |
·HCMV 的一般特征 | 第9-10页 |
·HCMV 感染的危害性 | 第10-11页 |
·HCMV 疫苗研究开发的可行性和必要性 | 第11-13页 |
·实验设计方案 | 第13-15页 |
第二章 材料与方法 | 第15-24页 |
·实验材料、试剂和仪器 | 第15-18页 |
·材料 | 第15-17页 |
·毒株、细胞、菌株及质粒 | 第15页 |
·实验动物 | 第15页 |
·限制性内切酶及其他酶类 | 第15页 |
·试剂盒 | 第15页 |
·试剂 | 第15-17页 |
·主要仪器 | 第17-18页 |
·方法 | 第18-24页 |
·HCMV pp65 基因的获得 | 第18页 |
·HCMV AD169 株基因组DNA 的提取 | 第18页 |
·HCMV pp65 基因的PCR 扩增 | 第18页 |
·PCR 反应产物的回收 | 第18页 |
·克隆载体的构建 | 第18-19页 |
·真核表达载体的构建 | 第19-20页 |
·质粒大量提取和纯化 | 第20页 |
·质粒的大量提取 | 第20页 |
·Sepharose 4FF 柱层析纯化质粒 | 第20页 |
·免疫小鼠 | 第20-21页 |
·HCMV 抗体的检测 | 第21-22页 |
·脾淋巴细胞转化实验 | 第22-24页 |
第三章 结果与讨论 | 第24-33页 |
·HCMV pp65 基因的扩增 | 第24页 |
·质粒pMD18-T/pp65 酶切鉴定 | 第24-25页 |
·重组真核表达载体pVAX1/pp65 的酶切鉴定 | 第25-26页 |
·重组真核表达载体pVAX1/pp65 的PCR 鉴定结果 | 第26页 |
·Sepharose 4 FF 柱层析法纯化质粒 | 第26-27页 |
·质粒DNA 疫苗诱导BALB/c 小鼠体液免疫结果 | 第27-28页 |
·脾淋巴细胞转化实验结果 | 第28页 |
·讨论 | 第28-33页 |
·HCMV DNA 疫苗候选基因的选择 | 第29页 |
·表达载体(pVAX1)的选择 | 第29-30页 |
·免疫途径和剂量 | 第30-31页 |
·疫苗的免疫效果 | 第31-32页 |
·优势和展望 | 第32-33页 |
结论 | 第33-34页 |
参考文献 | 第34-39页 |
中文摘要 | 第39-42页 |
Abstract | 第42-44页 |
致谢 | 第44页 |