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人巨细胞病毒DNA疫苗的构建及诱导小鼠的免疫应答

内容提要第1-8页
第一章 前言第8-15页
   ·核酸疫苗的免疫机理第8-9页
   ·人巨细胞病毒的研究现状第9-11页
     ·HCMV 的一般特征第9-10页
     ·HCMV 感染的危害性第10-11页
   ·HCMV 疫苗研究开发的可行性和必要性第11-13页
   ·实验设计方案第13-15页
第二章 材料与方法第15-24页
   ·实验材料、试剂和仪器第15-18页
     ·材料第15-17页
       ·毒株、细胞、菌株及质粒第15页
       ·实验动物第15页
       ·限制性内切酶及其他酶类第15页
       ·试剂盒第15页
       ·试剂第15-17页
     ·主要仪器第17-18页
   ·方法第18-24页
     ·HCMV pp65 基因的获得第18页
       ·HCMV AD169 株基因组DNA 的提取第18页
       ·HCMV pp65 基因的PCR 扩增第18页
       ·PCR 反应产物的回收第18页
     ·克隆载体的构建第18-19页
     ·真核表达载体的构建第19-20页
     ·质粒大量提取和纯化第20页
       ·质粒的大量提取第20页
       ·Sepharose 4FF 柱层析纯化质粒第20页
     ·免疫小鼠第20-21页
     ·HCMV 抗体的检测第21-22页
     ·脾淋巴细胞转化实验第22-24页
第三章 结果与讨论第24-33页
   ·HCMV pp65 基因的扩增第24页
   ·质粒pMD18-T/pp65 酶切鉴定第24-25页
   ·重组真核表达载体pVAX1/pp65 的酶切鉴定第25-26页
   ·重组真核表达载体pVAX1/pp65 的PCR 鉴定结果第26页
   ·Sepharose 4 FF 柱层析法纯化质粒第26-27页
   ·质粒DNA 疫苗诱导BALB/c 小鼠体液免疫结果第27-28页
   ·脾淋巴细胞转化实验结果第28页
   ·讨论第28-33页
     ·HCMV DNA 疫苗候选基因的选择第29页
     ·表达载体(pVAX1)的选择第29-30页
     ·免疫途径和剂量第30-31页
     ·疫苗的免疫效果第31-32页
     ·优势和展望第32-33页
结论第33-34页
参考文献第34-39页
中文摘要第39-42页
Abstract第42-44页
致谢第44页

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