中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-8页 |
第一章 绪论 | 第8-24页 |
第一节 植物基因工程研究概况 | 第8-15页 |
一. 植物基因工程研究概况及其缺陷 | 第8-11页 |
二. 发展转基因大豆的意义 | 第11-15页 |
第二节 去除选择标记基因的策略 | 第15-21页 |
一. 共转化系统 | 第15-17页 |
二. 同源重组 | 第17页 |
三. MAT(Multi-auto-transformation)载体系统 | 第17-18页 |
四. 位点特异性重组系统 | 第18-20页 |
五. 转座子系统 | 第20-21页 |
第三节 pX6-GFP载体的研究概况 | 第21-24页 |
第二章 材料与方法 | 第24-36页 |
一. 实验材料 | 第24-25页 |
(一) 实验菌株 | 第24页 |
(二) 质粒 | 第24页 |
(三) 主要试剂 | 第24页 |
(四) 主要仪器 | 第24-25页 |
(五) 主要仪器 | 第25页 |
二. 实验方法 | 第25-36页 |
(一) 培养基的配制 | 第25-26页 |
(二) 抗生素的配制 | 第26-27页 |
(三) 质粒DNA 提取方法 | 第27页 |
(四) 植物基因组提取方法 | 第27-28页 |
(五) 聚合酶链式反应 | 第28-30页 |
(六) 质粒. PCR 产物的酶切体系 | 第30页 |
(七) 酶切片段去磷酸化 | 第30-31页 |
(八) 连接与转化 | 第31-34页 |
(九) 外源基因在大豆中的表达 | 第34-36页 |
第三章 结果与分析 | 第36-51页 |
一. 目的质粒的构建 | 第36-43页 |
(一) 中间质粒pN-GFP 的构建 | 第36-39页 |
(二) 含大豆种子特异性启动子表达载体p952-GFP 的构建 | 第39-43页 |
二. 转基因大豆的获得 | 第43-48页 |
(一) 转基因大豆的组织培养 | 第43-45页 |
(二) 质粒在大豆中的表达 | 第45-48页 |
三. 去除选择性标记植株的获得 | 第48-51页 |
第四章 讨论 | 第51-54页 |
一. 目的质粒的构建 | 第51-52页 |
二. 转基因大豆的获得 | 第52-53页 |
三. 去除选择性标记植株的获得 | 第53-54页 |
结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-59页 |
附录 缩写词一览表 | 第59-60页 |
致谢 | 第60页 |