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绿色木霉LTR-2β-1,3-葡聚糖酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达

摘要第1-5页
Abstract第5-4页
中文摘要第4-5页
Abstract第5-9页
第一章 引言第9-19页
 1. β-1,3-葡聚糖的分布、结构与功能第9-11页
   ·β-1,3-葡聚糖的分布第9页
   ·β-1,3-葡聚糖的结构第9-10页
   ·β-1,3-葡聚糖的生理活性及与结构之间的关系第10-11页
 2. β-1,3-葡聚糖酶及其抗病机制第11-12页
   ·β-1,3-葡聚糖酶的分类及性质第11-12页
   ·β-1,3-葡聚糖酶的抗病机制第12页
 3. β-1,3-葡聚糖酶及其基因第12-15页
   ·微生物β-1,3-葡聚糖酶及其基因第12-13页
   ·植物β-1,3-葡聚糖酶及其基因第13-15页
     ·基因的研究第13-14页
     ·基因表达的调控和转基因获得抗病植物的研究第14-15页
 4. 木霉β-1,3-葡聚糖酶及其基因第15-17页
   ·生化性质第15-16页
   ·木霉β-1,3-葡聚糖酶基因的克隆第16-17页
 5. 存在的问题和展望第17-18页
 6. 本文主要研究工作及意义第18页
 7. 实验方案第18-19页
第二章 绿色木霉LTR-2β-1,3-葡聚糖酶基因的克隆第19-35页
   ·材料与方法第19-25页
     ·菌株与质粒第19-20页
     ·主要试剂第20页
     ·培养基及培养条件第20页
     ·菌种保藏技术第20页
     ·基因克隆技术第20-25页
   ·结果与讨论第25-35页
     ·绿色木霉LTR-2β-1,3-葡聚糖酶基因的克隆第25页
     ·重组质粒pMD18-T-glu的鉴定第25-28页
     ·重组质粒pMD18-T-glu 所携带的外源片段的核苷酸全序列测定第28-31页
     ·绿色木霉LTR-2 glu 基因及其所编码蛋白的性质分析第31-35页
第三章 绿色木霉LTR-291u 基因在毕赤酵母中的表达第35-47页
   ·材料与方法第35-39页
     ·菌株与质粒第35页
     ·主要试剂第35-37页
     ·培养基第37页
     ·酶切、去磷酸化(CIAP)、连接反应第37页
     ·CaCl_2法转化大肠杆菌第37-38页
     ·重组质粒的筛选第38页
     ·重组质粒转化毕赤酵母第38页
     ·目的菌株的筛选第38页
     ·重组酵母的PCR 鉴定第38-39页
     ·重组酵母的诱导表达第39页
     ·重组酵母β-1,3-葡聚糖酶酶活的茯苓粉平板检测第39页
     ·重组酵母β-1,3-葡聚糖酶活性测定第39页
     ·重组毕赤酵母表达产物的SDS-PAGE 电泳第39页
   ·实验结果与讨论第39-47页
     ·重组质粒pPIC9K-glu 的筛选、验证第39-40页
     ·质粒pPIC9K 及重组质粒pPIC9K-glu 的物理图谱第40-41页
     ·重组酵母pPIC9K-glu 的筛选第41-42页
     ·重组酵母 pPIC9K-glu 的 PCR 验证第42页
     ·重组酵母的酶活检测第42-43页
     ·重组酵母 KGLU14 的电泳验证第43-44页
     ·重组酵母 KGLU14 产酶条件的初步摸索及粗酶液性质的测定第44-47页
总结第47-48页
参考文献第48-53页
致 谢第53页

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