摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-13页 |
第一部分 文献综述 | 第13-40页 |
1. 植物表皮蜡质的生物合成 | 第15-19页 |
·质体内饱和脂肪酸从头合成途径 | 第15-17页 |
·质体外脂肪酸延长及其衍生物的合成途径 | 第17-19页 |
2. 植物表皮蜡质的分泌途径 | 第19-23页 |
·蜡质成份从质体到内质网的运输途径 | 第21页 |
·蜡质成份从内质网到质膜的运输途径 | 第21-22页 |
·蜡质成份从质膜到质外体的运输途径 | 第22页 |
·蜡质成份的跨细胞壁运输途径 | 第22-23页 |
·蜡质成份穿过角质膜形成各种蜡质晶体 | 第23页 |
3. 关于拟南芥酰基辅酶A 延伸酶(ACYL-COA ELONGASES )及KCS 基 因 | 第23-26页 |
·3-酮酰辅酶A 合成酶(3-KETOACYL-COA SYNTHASE (KCS)) | 第23-25页 |
·3-酮酰辅酶A 还原酶(KCR) | 第25页 |
·3-羟酰辅酶A 脱水酶(HCD) | 第25-26页 |
·2,3-烯脂酰辅酶A 还原酶(ECR) | 第26页 |
4. 表皮蜡质的生态学意义 | 第26-27页 |
·表皮蜡质的防水作用 | 第26-27页 |
·表皮蜡质和昆虫的相互作用 | 第27页 |
·表皮蜡质的其它生态作用 | 第27页 |
5. 盐芥(THELLUNGIELLA .HALOPHILA)作为蜡质研究的模式植物 | 第27-30页 |
6. 实时荧光定量PCR 技术 | 第30-35页 |
·实时荧光定量PCR 技术的原理及应用 | 第30-33页 |
·实时荧光定量PCR 数据的分析 | 第33-35页 |
7. 基因沉默 | 第35-40页 |
·基因沉默现象的发现 | 第36页 |
·基因沉默的分子机制 | 第36-37页 |
·DSRNA、SIRNA 和MICRORNA | 第37-38页 |
·转录后基因沉默技术的应用及展望 | 第38-40页 |
第二部分 实验论文 | 第40-70页 |
一、实验材料及实验方法 | 第40-50页 |
1. 实验材料 | 第40-42页 |
·植物材料 | 第40页 |
·菌种 | 第40-41页 |
·酶、化学试剂及试剂盒 | 第41页 |
·培养基 | 第41页 |
·质粒提取液 | 第41-42页 |
·主要仪器设备 | 第42页 |
·软件 | 第42页 |
2. 实验方法 | 第42-50页 |
·表面形态观察 | 第42页 |
·扫描电镜观察叶表皮蜡质晶体 | 第42页 |
·GC-MS 分析叶表皮蜡质组成及含量 | 第42-43页 |
·实时荧光定量PCR 分析KCS 基因家族各基因表达水平 | 第43-46页 |
·基因沉默 | 第46-49页 |
·小盐芥中TH-FDH(AT1G07720) 基因沉默载体的构建 | 第49-50页 |
二、实验结果及分析 | 第50-68页 |
1. 表面形态观察 | 第50-52页 |
2. 扫描电镜观察表皮蜡质晶体 | 第52-53页 |
3. GC-MS 分析表皮蜡质成分及含量 | 第53-60页 |
4. 实时定量PCR 分析盐芥中KCS 家族21 个基因的表达 | 第60-67页 |
·盐芥RNA 提取和定量 | 第60页 |
·盐芥实时定量PCR 的CDNA 模板制备 | 第60页 |
·盐芥蜡质合成中KCS 家族各基因的实时定量PCR 分析 | 第60-67页 |
5. TH-FDH(AT1G07720) 基因沉默载体的构建 | 第67-68页 |
·盐芥TH-FDH(AT1G07720)基因用于构建RNAI 的基因序列 | 第67页 |
·盐芥TH-FDH(AT1G07720)的RNAI构建示意图 | 第67页 |
·盐芥TH-FDH(AT1G07720) 基因沉默载体构建的结果 | 第67-68页 |
·盐芥TH-FDH(AT1G07720) 基因沉默的后续工作 | 第68页 |
三、讨论 | 第68-70页 |
附录 | 第70-100页 |
附 1. 三种生态型盐芥光滑莲座叶表皮蜡质成分及含量 | 第70-71页 |
附 2. 三种生态型盐芥具白芒茎生叶表皮蜡质成分及含量 | 第71-72页 |
附 3. REAL-TIME PCR 显示 KCS 家族各基因在山东型盐芥不同发育阶段各样品中表达 | 第72-86页 |
附 4. REAL-TIME PCR 显示 KCS 家族各基因在三种生态型盐芥茎生叶中表达 | 第86-99页 |
附 5. PGSA1252 图谱 | 第99-100页 |
参考文献 | 第100-111页 |
致 谢 | 第111-112页 |
硕士期间发表的论文 | 第112页 |