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水稻矮缩病毒(RDV)微核心蛋白P9转录激活活性的研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-13页
第一章 文献综述第13-26页
 1 水稻矮缩病毒研究进展第13-17页
   ·水稻矮缩病毒简介第13页
   ·水稻矮缩病毒病毒粒子结构第13-14页
   ·水稻矮缩病毒基因组结构及编码蛋白的功能第14-16页
   ·水稻矮缩病毒的侵染、复制和组装第16-17页
 2 真核转录因子简介第17-20页
   ·DNA 结合结构域第18页
   ·寡聚化位点(Oligomerization site)第18页
   ·转录调节结构域(Transcription-regulation domain)第18-19页
     ·转录激活结构域第18-19页
     ·转录抑制结构域第19页
   ·核定位信号(Nuclear localization signal, NLS)第19-20页
 3 酵母双杂交系统(YEAST TWO-HYBRID SYSTEM, YTHS)第20-26页
   ·酵母双杂交系统的基本原理第21-22页
   ·酵母双杂交系统的优缺点及改进第22-24页
   ·酵母双杂交系统的衍生系统-酵母单杂交系统(One-hybrid system)第24页
   ·酵母双杂交系统在植物病毒研究中的应用第24-26页
第二章 RDV 56、57、59、512 的 CDNA 克隆和表达第26-31页
 1 材料和方法第26-28页
   ·材料第26页
     ·质粒及菌株第26页
     ·引物设计第26页
     ·感病材料第26页
     ·酶、试剂和抗体第26页
   ·方法第26-28页
     ·RT-PCR第26-27页
     ·植物表达载体的构建第27页
     ·农杆菌的转化第27页
     ·农杆菌的渗入法第27页
     ·Western 印迹分析 56、57、59 和 512 编码蛋白在植物中的表达第27-28页
 2 结果第28-30页
   ·RT-PCR 得到目的cDNA第28页
   ·RDV 56、57、59 和512 编码蛋白在植物中的表达第28-30页
 3 讨论第30-31页
第三章 RDV P9 酵母中转录激活活性的发现和鉴定第31-37页
 1 材料与方法第31-33页
   ·材料第31-32页
     ·质粒及菌株第31-32页
     ·试剂与培养基第32页
   ·方法第32-33页
     ·构建酵母单杂交质粒第32页
     ·酵母的高效转化(LiAc 法)第32-33页
     ·酵母生长测试第33页
     ·液体β-半乳糖苷酶活性测试第33页
     ·Western 印迹分析 P9 在酵母中的表达第33页
 2 结果第33-36页
   ·酵母生长测试第33-34页
   ·液体β-半乳糖苷酶活性测定第34-36页
   ·Western 印迹分析 P9 在酵母中的表达第36页
 3 讨论第36-37页
第四章 RDV P9 在植物体内具有转录激活活性第37-42页
 1 材料与方法第37-38页
   ·材料第37页
     ·质粒与菌株第37页
     ·植物材料第37页
   ·方法第37-38页
     ·构建植物表达载体第37-38页
     ·农杆菌转化第38页
     ·农杆菌渗入法第38页
     ·GUS 组织化学染色第38页
     ·GUS 活性定量分析第38页
     ·Western 印迹分析P9 在植物中的表达第38页
 2 结果第38-41页
   ·GUS 活性分析第38-39页
   ·GUS 活性的定量检测第39-40页
   ·P9 在植物中的表达第40-41页
 3 讨论第41-42页
第五章 RDV P9 亚细胞定位的研究第42-45页
 1 材料与方法第42-43页
   ·材料第42页
   ·方法第42-43页
     ·质粒构建第42页
     ·烟草BY2 原生质体的制备第42页
     ·电转化第42-43页
     ·荧光显微镜观察第43页
 2 结果第43页
 3 讨论第43-45页
总结第45-46页
参考文献第46-51页
附录第51-56页
致谢第56-57页
作者简介第57页

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