摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-26页 |
1 水稻矮缩病毒研究进展 | 第13-17页 |
·水稻矮缩病毒简介 | 第13页 |
·水稻矮缩病毒病毒粒子结构 | 第13-14页 |
·水稻矮缩病毒基因组结构及编码蛋白的功能 | 第14-16页 |
·水稻矮缩病毒的侵染、复制和组装 | 第16-17页 |
2 真核转录因子简介 | 第17-20页 |
·DNA 结合结构域 | 第18页 |
·寡聚化位点(Oligomerization site) | 第18页 |
·转录调节结构域(Transcription-regulation domain) | 第18-19页 |
·转录激活结构域 | 第18-19页 |
·转录抑制结构域 | 第19页 |
·核定位信号(Nuclear localization signal, NLS) | 第19-20页 |
3 酵母双杂交系统(YEAST TWO-HYBRID SYSTEM, YTHS) | 第20-26页 |
·酵母双杂交系统的基本原理 | 第21-22页 |
·酵母双杂交系统的优缺点及改进 | 第22-24页 |
·酵母双杂交系统的衍生系统-酵母单杂交系统(One-hybrid system) | 第24页 |
·酵母双杂交系统在植物病毒研究中的应用 | 第24-26页 |
第二章 RDV 56、57、59、512 的 CDNA 克隆和表达 | 第26-31页 |
1 材料和方法 | 第26-28页 |
·材料 | 第26页 |
·质粒及菌株 | 第26页 |
·引物设计 | 第26页 |
·感病材料 | 第26页 |
·酶、试剂和抗体 | 第26页 |
·方法 | 第26-28页 |
·RT-PCR | 第26-27页 |
·植物表达载体的构建 | 第27页 |
·农杆菌的转化 | 第27页 |
·农杆菌的渗入法 | 第27页 |
·Western 印迹分析 56、57、59 和 512 编码蛋白在植物中的表达 | 第27-28页 |
2 结果 | 第28-30页 |
·RT-PCR 得到目的cDNA | 第28页 |
·RDV 56、57、59 和512 编码蛋白在植物中的表达 | 第28-30页 |
3 讨论 | 第30-31页 |
第三章 RDV P9 酵母中转录激活活性的发现和鉴定 | 第31-37页 |
1 材料与方法 | 第31-33页 |
·材料 | 第31-32页 |
·质粒及菌株 | 第31-32页 |
·试剂与培养基 | 第32页 |
·方法 | 第32-33页 |
·构建酵母单杂交质粒 | 第32页 |
·酵母的高效转化(LiAc 法) | 第32-33页 |
·酵母生长测试 | 第33页 |
·液体β-半乳糖苷酶活性测试 | 第33页 |
·Western 印迹分析 P9 在酵母中的表达 | 第33页 |
2 结果 | 第33-36页 |
·酵母生长测试 | 第33-34页 |
·液体β-半乳糖苷酶活性测定 | 第34-36页 |
·Western 印迹分析 P9 在酵母中的表达 | 第36页 |
3 讨论 | 第36-37页 |
第四章 RDV P9 在植物体内具有转录激活活性 | 第37-42页 |
1 材料与方法 | 第37-38页 |
·材料 | 第37页 |
·质粒与菌株 | 第37页 |
·植物材料 | 第37页 |
·方法 | 第37-38页 |
·构建植物表达载体 | 第37-38页 |
·农杆菌转化 | 第38页 |
·农杆菌渗入法 | 第38页 |
·GUS 组织化学染色 | 第38页 |
·GUS 活性定量分析 | 第38页 |
·Western 印迹分析P9 在植物中的表达 | 第38页 |
2 结果 | 第38-41页 |
·GUS 活性分析 | 第38-39页 |
·GUS 活性的定量检测 | 第39-40页 |
·P9 在植物中的表达 | 第40-41页 |
3 讨论 | 第41-42页 |
第五章 RDV P9 亚细胞定位的研究 | 第42-45页 |
1 材料与方法 | 第42-43页 |
·材料 | 第42页 |
·方法 | 第42-43页 |
·质粒构建 | 第42页 |
·烟草BY2 原生质体的制备 | 第42页 |
·电转化 | 第42-43页 |
·荧光显微镜观察 | 第43页 |
2 结果 | 第43页 |
3 讨论 | 第43-45页 |
总结 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-51页 |
附录 | 第51-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
作者简介 | 第57页 |