基于磁性微粒和荧光微球的DNA检测方法研究
| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 缩略语表 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-28页 |
| 1 固相核酸杂交方法 | 第12-22页 |
| ·菌落原位杂交 | 第14页 |
| ·组织原位杂交 | 第14-15页 |
| ·斑点杂交/狭线杂交 | 第15页 |
| ·印迹杂交 | 第15-16页 |
| ·差异杂交 | 第16页 |
| ·bDNA技术 | 第16-17页 |
| ·DNA芯片技术 | 第17-19页 |
| ·固相夹心杂交 | 第19-20页 |
| ·其它杂交类型 | 第20-22页 |
| 2 基于固相杂交原理的核酸检测方式 | 第22-24页 |
| ·直接杂交的检测原理 | 第22页 |
| ·基于单碱基链延伸和特异位点引物延伸的检测原理 | 第22-24页 |
| 3 磁性微粒技术 | 第24-25页 |
| 4 液态悬浮芯片技术 | 第25-28页 |
| 第二章 基于磁性微粒的DNA杂交检测 | 第28-44页 |
| 1 材料 | 第28-30页 |
| ·磁性微粒 | 第28页 |
| ·菌种及菌体序列 | 第28-29页 |
| ·培养基 | 第29页 |
| ·主要试剂的配制 | 第29页 |
| ·引物与探针 | 第29页 |
| ·主要试剂 | 第29-30页 |
| ·仪器设备 | 第30页 |
| 2 方法 | 第30-37页 |
| ·检测原理 | 第30-31页 |
| ·探针与微粒的偶联 | 第31-33页 |
| ·靶片段的扩增 | 第33-35页 |
| ·PCR产物与固定有寡核苷酸磁性微粒的杂交反应 | 第35页 |
| ·磁性微粒表面的单碱基链延伸反应 | 第35-36页 |
| ·荧光信号的引入以及结果读取 | 第36-37页 |
| 3 结果与讨论 | 第37-42页 |
| ·磁性微粒的优选 | 第37-38页 |
| ·磁性微粒与氨基标记探针偶联效率的测定 | 第38-39页 |
| ·不对称PCR上下游引物的优化结果 | 第39-40页 |
| ·不对称PCR扩增结果 | 第40-41页 |
| ·荧光信号引入时洗涤条件的优化结果 | 第41页 |
| ·检测结果 | 第41-42页 |
| 4 小结 | 第42-44页 |
| 第三章 荧光微球用于人乳头瘤病毒的基因分型研究 | 第44-52页 |
| 1 材料 | 第45-46页 |
| ·标准株质粒 | 第45页 |
| ·菌种 | 第45页 |
| ·培养基 | 第45页 |
| ·引物及探针 | 第45-46页 |
| ·主要试剂 | 第46页 |
| ·仪器设备 | 第46页 |
| 2 方法 | 第46-50页 |
| ·技术路线 | 第46-47页 |
| ·探针与微粒的偶联 | 第47-48页 |
| ·靶片段的扩增 | 第48-49页 |
| ·被检测物与探针的杂交反应 | 第49页 |
| ·HPV标准质粒的检测 | 第49-50页 |
| 3 结果与讨论 | 第50-51页 |
| ·靶片段扩增结果 | 第50-51页 |
| ·HPV标准质粒的检测结果 | 第51页 |
| 4 小结 | 第51-52页 |
| 全文小结 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
