目录 | 第1-5页 |
摘要 | 第5-8页 |
ABSTRACT | 第8-11页 |
英文缩略词表 | 第11-13页 |
前言 | 第13-15页 |
实验材料 | 第15-23页 |
1.细胞系 | 第15页 |
2.细胞培养材料 | 第15页 |
3.药品及主要生化试剂 | 第15-16页 |
4.抗体 | 第16-17页 |
5.试剂盒 | 第17页 |
6.主要仪器 | 第17-18页 |
7.常用溶液的配制 | 第18-23页 |
实验方法 | 第23-34页 |
1.细胞复苏与培养 | 第23页 |
2.细胞冻存 | 第23页 |
3.相差显微镜观察CAI对MCF-7细胞形态的影响 | 第23-24页 |
4.生长抑制实验 | 第24页 |
5.MTT法检测CAI对细胞活力的影响 | 第24-25页 |
6.~3H-TDR掺入法检测CAI对细胞DNA合成的影响 | 第25页 |
7.碘化丙啶染色流式细胞术检测CAI对细胞凋亡及细胞周期分布的影响 | 第25-26页 |
8.流式细胞术测定CAI对细胞线粒体膜电势的影响 | 第26页 |
9.磷脂酰丝氨酸外翻分析检测CAI对MCF-7细胞的凋亡诱导作用 | 第26-27页 |
10.ATP生物发光分析法测定CAI对细胞线粒体能量合成的影响 | 第27页 |
11.BRADFORD法测定蛋白浓度 | 第27-28页 |
12.WESTERN BLOT | 第28-29页 |
13.流式细胞术测定CAI对细胞内钙离子浓度的影响 | 第29页 |
14.蛋白竞争结合法测定CAI急性给药对细胞腺苷酸环化酶的影响 | 第29-33页 |
15.数据的处理 | 第33-34页 |
实验结果 | 第34-68页 |
一、CAI对人乳腺癌细胞的周期阻滞和诱导凋亡作用 | 第34-58页 |
1.CAI抑制MCF-7人乳腺癌细胞增殖 | 第34-35页 |
2.CAI作用于MCF-7细胞后的形态学检测与观察 | 第35-36页 |
3.四唑盐(MTT)比色法测定细胞生长曲线 | 第36-37页 |
4.CAI对MCF-7细胞DNA合成的影响 | 第37-38页 |
5.CAI对MCF-7细胞周期分布的影响 | 第38-43页 |
6.CAI对MCF-7细胞的凋亡诱导作用 | 第43-46页 |
7.磷脂酰丝氨酸外翻分析检测细胞凋亡 | 第46-47页 |
8.CAI对MCF-7细胞线粒体膜电势的影响 | 第47-49页 |
9.CAI对MCF-7细胞线粒体能量合成的影响 | 第49-50页 |
10.Western Blot检测CAI对MCF-7细胞周期调控蛋白表达的影响 | 第50-53页 |
11.Western Blot检测CAI对凋亡相关蛋白表达的影响 | 第53-56页 |
12.CAI长期作用对细胞内钙离子浓度的影响 | 第56-58页 |
二、CAI对293T细胞的生长抑制作用 | 第58-65页 |
1.CAI抑制293T细胞增殖 | 第58-59页 |
2.MTT法测定CAI对293T细胞存活率的影响 | 第59-60页 |
3.CAI对293T细胞DNA合成的影响 | 第60-61页 |
4.CAI对293T细胞的凋亡诱导作用 | 第61-62页 |
5.CAI对293T细胞线粒体膜电势的影响 | 第62-63页 |
6.CAI长期作用对细胞内钙离子浓度的影响 | 第63-65页 |
三、CAI与CAMP信号传导通路之间的作用研究 | 第65-68页 |
1.CAI急性给药对κ-HEK293细胞腺苷酸环化酶活性的影响 | 第65-66页 |
2.Forskolin和CAI联合给药对MCF-7细胞周期分布的影响 | 第66-68页 |
讨论 | 第68-76页 |
结论 | 第76-78页 |
参考文献 | 第78-86页 |
综述 | 第86-111页 |
线粒体——抗肿瘤治疗的重要靶点 | 第86-98页 |
参考文献 | 第98-111页 |
致谢 | 第111页 |