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羧胺三唑对乳腺癌细胞的生长抑制作用及其机制研究

目录第1-5页
摘要第5-8页
ABSTRACT第8-11页
英文缩略词表第11-13页
前言第13-15页
实验材料第15-23页
 1.细胞系第15页
 2.细胞培养材料第15页
 3.药品及主要生化试剂第15-16页
 4.抗体第16-17页
 5.试剂盒第17页
 6.主要仪器第17-18页
 7.常用溶液的配制第18-23页
实验方法第23-34页
 1.细胞复苏与培养第23页
 2.细胞冻存第23页
 3.相差显微镜观察CAI对MCF-7细胞形态的影响第23-24页
 4.生长抑制实验第24页
 5.MTT法检测CAI对细胞活力的影响第24-25页
 6.~3H-TDR掺入法检测CAI对细胞DNA合成的影响第25页
 7.碘化丙啶染色流式细胞术检测CAI对细胞凋亡及细胞周期分布的影响第25-26页
 8.流式细胞术测定CAI对细胞线粒体膜电势的影响第26页
 9.磷脂酰丝氨酸外翻分析检测CAI对MCF-7细胞的凋亡诱导作用第26-27页
 10.ATP生物发光分析法测定CAI对细胞线粒体能量合成的影响第27页
 11.BRADFORD法测定蛋白浓度第27-28页
 12.WESTERN BLOT第28-29页
 13.流式细胞术测定CAI对细胞内钙离子浓度的影响第29页
 14.蛋白竞争结合法测定CAI急性给药对细胞腺苷酸环化酶的影响第29-33页
 15.数据的处理第33-34页
实验结果第34-68页
 一、CAI对人乳腺癌细胞的周期阻滞和诱导凋亡作用第34-58页
  1.CAI抑制MCF-7人乳腺癌细胞增殖第34-35页
  2.CAI作用于MCF-7细胞后的形态学检测与观察第35-36页
  3.四唑盐(MTT)比色法测定细胞生长曲线第36-37页
  4.CAI对MCF-7细胞DNA合成的影响第37-38页
  5.CAI对MCF-7细胞周期分布的影响第38-43页
  6.CAI对MCF-7细胞的凋亡诱导作用第43-46页
  7.磷脂酰丝氨酸外翻分析检测细胞凋亡第46-47页
  8.CAI对MCF-7细胞线粒体膜电势的影响第47-49页
  9.CAI对MCF-7细胞线粒体能量合成的影响第49-50页
  10.Western Blot检测CAI对MCF-7细胞周期调控蛋白表达的影响第50-53页
  11.Western Blot检测CAI对凋亡相关蛋白表达的影响第53-56页
  12.CAI长期作用对细胞内钙离子浓度的影响第56-58页
 二、CAI对293T细胞的生长抑制作用第58-65页
  1.CAI抑制293T细胞增殖第58-59页
  2.MTT法测定CAI对293T细胞存活率的影响第59-60页
  3.CAI对293T细胞DNA合成的影响第60-61页
  4.CAI对293T细胞的凋亡诱导作用第61-62页
  5.CAI对293T细胞线粒体膜电势的影响第62-63页
  6.CAI长期作用对细胞内钙离子浓度的影响第63-65页
 三、CAI与CAMP信号传导通路之间的作用研究第65-68页
  1.CAI急性给药对κ-HEK293细胞腺苷酸环化酶活性的影响第65-66页
  2.Forskolin和CAI联合给药对MCF-7细胞周期分布的影响第66-68页
讨论第68-76页
结论第76-78页
参考文献第78-86页
综述第86-111页
 线粒体——抗肿瘤治疗的重要靶点第86-98页
 参考文献第98-111页
致谢第111页

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