| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 前言 | 第13-26页 |
| 1 欧洲鳗鲡概况 | 第13-15页 |
| ·欧洲鳗鲡病害流行情况及研究进展 | 第13-14页 |
| ·欧洲鳗鲡疾病的防治措施 | 第14-15页 |
| 2 鱼类免疫系统 | 第15-17页 |
| ·免疫组织器官 | 第15页 |
| ·免疫细胞 | 第15-16页 |
| ·体液免疫系统 | 第16-17页 |
| 3 鱼类免疫球蛋白(Ig)的研究 | 第17-22页 |
| ·粘膜Ig | 第17-19页 |
| ·局部粘膜免疫系统 | 第17-18页 |
| ·粘膜Ig与血清Ig的特性比较 | 第18-19页 |
| ·血清Ig | 第19-21页 |
| ·IgM | 第19-20页 |
| ·Ig D | 第20-21页 |
| ·淋巴细胞膜表面Ig | 第21页 |
| ·卵、胚胎、仔鱼中的Ig | 第21-22页 |
| 4 鱼类免疫球蛋白纯化方法 | 第22-26页 |
| ·盐析法 | 第22页 |
| ·凝胶过滤法 | 第22-23页 |
| ·离子交换法 | 第23页 |
| ·亲和层析法 | 第23-26页 |
| 材料与方法 | 第26-32页 |
| 1 材料 | 第26-27页 |
| ·实验动物、细胞 | 第26页 |
| ·主要试剂 | 第26页 |
| ·主要仪器 | 第26-27页 |
| 2 方法 | 第27-32页 |
| ·欧洲鳗鲡粘膜Ig和血清Ig的粗提 | 第27页 |
| ·鼠抗欧鳗血清Ig单克隆抗体腹水的制备 | 第27-28页 |
| ·杂交瘤细胞的复苏 | 第27页 |
| ·诱导腹水单克隆抗体 | 第27-28页 |
| ·小鼠腹水单克隆抗体的纯化 | 第28页 |
| ·选择亲和层析柱的特异性配体 | 第28页 |
| ·筛选与粘液有交叉反应的单抗 | 第28页 |
| ·筛选与血清有反应的单抗 | 第28页 |
| ·亲和层析纯化欧鳗粘膜Ig和血清Ig. | 第28-29页 |
| ·抗体交联物-单克隆抗体的准备 | 第28页 |
| ·亲和层析柱制备 | 第28-29页 |
| ·纯化欧鳗粘膜Ig和血清Ig. | 第29页 |
| ·兔抗欧洲鳗血清Ig多克隆抗体的制备 | 第29-30页 |
| ·动物免疫 | 第29页 |
| ·兔抗欧洲鳗血清Ig效价测定 | 第29页 |
| ·血液采集、血清制备及抗体纯化 | 第29页 |
| ·兔抗欧鳗血清Ig灵敏度测定 | 第29-30页 |
| ·变性还原条件下的凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹试验(Western Blotting) | 第30页 |
| ·非变性非还原条件下的凝胶电泳和免疫印迹试验(Western Blotting) | 第30-31页 |
| ·变性非还原条件下的凝胶电泳和免疫印迹试验(Western Blotting) | 第31页 |
| ·蛋白质分子量的计算 | 第31-32页 |
| 结果与分析 | 第32-40页 |
| 1 筛选与粘膜和血清有反应的单抗 | 第32页 |
| 2 单抗亲和层析纯化欧洲鳗粘膜Ig和血清Ig | 第32-33页 |
| ·纯化欧洲鳗粘膜Ig | 第32-33页 |
| ·纯化欧洲鳗血清Ig. | 第33页 |
| 3 兔抗欧鳗纯化血清Ig多克隆抗体检测 | 第33-34页 |
| ·兔多抗效价测定 | 第33-34页 |
| ·兔多抗灵敏度测定 | 第34页 |
| 4 变性还原条件下的凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹试验(Western Blotting) | 第34-37页 |
| ·SDS-PAGE纯度鉴定 | 第34-35页 |
| ·考马斯亮蓝染色与双胺银染的比较 | 第34页 |
| ·亲和层析纯化后粘膜Ig与血清Ig的比较 | 第34-35页 |
| ·Western Blotting | 第35-37页 |
| 5 非变性非还原条件下的凝胶电泳和免疫印迹试验(Western Blotting) | 第37页 |
| 6 变性非还原条件下的凝胶电泳和免疫印迹试验(Western Blotting) | 第37-40页 |
| 讨论 | 第40-44页 |
| 1 欧洲鳗鲡粘膜免疫球蛋白(Ig)的纯化 | 第40页 |
| 2 变性还原条件下粘膜Ig的结构 | 第40-42页 |
| 3 非变性非还原条件下粘膜Ig的结构 | 第42页 |
| 4 变性非还原条件下粘膜Ig的结构 | 第42-43页 |
| 5 单克隆抗体的应用 | 第43-44页 |
| 结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-52页 |
| 附录 | 第52-54页 |
| 致谢 | 第54页 |
