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甘薯病毒G(SPVG)外壳蛋白基因的克隆、序列分析及在大肠杆菌中的表达

中文摘要第1-9页
1 文献综述:甘薯病毒病研究进展第9-22页
   ·甘薯病毒病的种类与危害第9页
   ·甘薯病毒病的症状第9-10页
   ·甘薯病毒病的传播第10页
   ·侵染甘薯的马铃薯Y属(Potyvirus)病毒研究进展第10-16页
     ·马铃薯Y病毒属(Potyvirus)病毒基因组结构、功能和分子生物学第10-12页
       ·基因组结构和特点第10-11页
       ·基因组翻译产物的功能第11-12页
     ·甘薯羽状斑驳病毒(SPFMV)第12-14页
       ·形态特性、株系划分以及血清学关系第12-13页
       ·SPFMV的基因组结构第13-14页
     ·甘薯病毒G(SPVG)第14页
     ·甘薯轻型斑点病毒(SPMSV)第14页
     ·甘薯病毒Y(SPVY)第14-15页
     ·甘薯潜隐病毒(SPLV)第15-16页
     ·甘薯脉花叶病毒(SPVMV)第16页
   ·侵染甘薯的其他病毒第16-19页
     ·甘薯轻斑驳病毒(SPMMV)第16页
     ·甘薯类花椰菜花叶病毒(SPCLV)第16-17页
     ·甘薯黄矮病毒(SPYDV)第17页
     ·烟草花叶病毒(TMV)第17页
     ·烟草蚀纹病毒(TEV)第17页
     ·甘薯褪绿斑病毒(SPCFV)第17页
     ·黄瓜花叶病毒(CMV)第17页
     ·甘薯凹脉病毒(SPSVV)第17页
     ·甘薯叶斑病毒(SPLSV)第17-18页
     ·甘薯褪绿矮缩病毒(SPCSV)第18页
     ·甘薯卷叶病毒(SPLCV)第18页
     ·甘薯无病症病毒(SPSV)第18-19页
   ·甘薯病毒病的诊断和检测方式第19-21页
     ·症状学诊断第19页
     ·指示植物嫁接检测第19页
     ·甘薯病毒的血清学检测第19-20页
       ·酶联免疫吸附法(ELISA)第19-20页
       ·免疫电镜法(ISEM)第20页
     ·分子生物学检测方法第20-21页
       ·核酸杂交技术(NASH)第20-21页
       ·RT-PCR技术第21页
   ·甘薯病毒病的防治第21-22页
2 引言第22-23页
3 材料和方法第23-29页
   ·材料第23页
     ·供试毒源第23页
     ·菌株和质粒第23页
     ·酶和试剂第23页
     ·寡核苷酸引物第23页
   ·方法第23-29页
     ·感病叶片总RNA的提取(按照UNIQ-10柱式总RNA抽提试剂盒说明书)第23-24页
     ·RT-PCR第24-25页
     ·PCR扩增片段的回收纯化第25页
       ·超低温冻融法第25页
       ·试剂盒回收:(按照UNIQ-10柱式胶回收试剂盒说明书)第25页
     ·PCR产物与pMD18-T Vector连接第25页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备第25-26页
     ·转化大肠杆菌第26页
     ·质粒提取第26-27页
       ·质粒的小量提取第26页
       ·质粒的大量提取第26-27页
     ·重组质粒的鉴定第27页
     ·序列测定第27页
     ·SPVG CP基因原核表达载体的构建第27-28页
     ·外源基因的诱导表达第28-29页
     ·SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳第29页
     ·抗血清制备第29页
4 结果与分析第29-34页
   ·SPVG-HN外壳蛋白(CP)基因的RT-PCR扩增第29-30页
   ·重组质粒pMDVGCP的酶切和PCR鉴定第30页
   ·SPVG-HN CP基因的序列分析第30-33页
   ·原核表达载体的构建第33页
   ·表达产物的SDS-PAGE分析第33-34页
   ·抗血清制备第34页
5 结论与讨论第34-36页
   ·结论第34-35页
     ·讨论第35-36页
参考文献第36-44页
Abstract第44-45页

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