| 中文摘要 | 第1-4页 |
| 英文摘要 | 第4-8页 |
| 前言 | 第8-22页 |
| 1 植物的耐盐性研究 | 第8-15页 |
| ·盐胁迫对植物的伤害 | 第8-9页 |
| ·植物的盐胁迫适应机制 | 第9-10页 |
| ·植物对Na~+胁迫的响应机制 | 第10-15页 |
| ·控制Na~+的运输 | 第11-13页 |
| ·Na~+的外排 | 第13-14页 |
| ·Na~+在液泡中的区域化效应 | 第14-15页 |
| 2 植物液泡膜Na~+/H~+逆向转运蛋白基因的研究进展 | 第15-18页 |
| ·植物液泡膜Na~+/H~+逆向转运蛋白基因的分离 | 第16页 |
| ·拟南芥液泡膜Na~+/H~+逆向转运蛋白基因的结构、功能及作用机制 | 第16-18页 |
| ·液泡膜Na~+/H~+逆向转运蛋白基因在植物耐盐基因工程的应用 | 第18页 |
| 3 紫花苜蓿基因工程的研究进展 | 第18-19页 |
| 4 本研究的内容、目的及意义 | 第19-22页 |
| 第一章 拟南芥液泡膜Na~+/H~+逆转运蛋白基因植物表达载体的构建 | 第22-32页 |
| 1 材料和方法 | 第22-26页 |
| ·材料 | 第22-23页 |
| ·菌株 | 第22页 |
| ·载体 | 第22页 |
| ·目的基因 | 第22页 |
| ·所用引物 | 第22页 |
| ·试剂及试剂盒 | 第22页 |
| ·主要试剂的配制 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-26页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制作 | 第23页 |
| ·目的片段与载体片段的连接和大肠杆菌转化 | 第23页 |
| ·质粒DNA小量提取 | 第23-24页 |
| ·转化子的鉴定 | 第24-25页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第25页 |
| ·农杆菌感受态细胞冻融法转化 | 第25页 |
| ·农杆菌质粒DNA的提取优化方法 | 第25-26页 |
| ·植物表达载体的构建过程 | 第26页 |
| ·AtNHX1基因的中间表达载体的构建 | 第26页 |
| ·中间表达载体导入根癌农杆菌 | 第26页 |
| 2 结果与讨论 | 第26-32页 |
| ·AtNHX1基因的中间表达载体的构建 | 第26-30页 |
| ·中间表达载体冻融法导入根癌农杆菌的条件优化 | 第30页 |
| ·农杆菌转化子质粒DNA的提取及鉴定 | 第30-32页 |
| 第二章 转化受体紫花苜蓿离体器官发生体系的建立及RAPD分析 | 第32-40页 |
| 1 材料与方法 | 第32-33页 |
| ·植物材料 | 第32页 |
| ·方法 | 第32-33页 |
| ·外植体来源 | 第32页 |
| ·愈伤组织的诱导及芽的分化 | 第32页 |
| ·苗的伸长及根的诱导 | 第32页 |
| ·再生苗的扦插繁殖 | 第32-33页 |
| ·再生植株的基因组DNA提取及RAPD分析 | 第33页 |
| 2 结果与讨论 | 第33-40页 |
| ·不同苜蓿品种不同外植体的分化能力比较 | 第33-35页 |
| ·器官发生途径 | 第35-36页 |
| ·基因组DNA的检测 | 第36-37页 |
| ·基因组DNA的RAPD分析 | 第37-40页 |
| 第三章 农杆菌介导的AtNHX1基因对苜蓿的遗传转化 | 第40-59页 |
| 1 材料与方法 | 第40-47页 |
| ·材料 | 第40-43页 |
| ·植物材料 | 第40页 |
| ·菌种 | 第40页 |
| ·PCR扩增引物 | 第40页 |
| ·所用培养基及试剂的配制 | 第40-43页 |
| ·实验方法 | 第43-47页 |
| ·植物受体材料的准备 | 第43页 |
| ·根癌农杆菌介导的苜蓿两种再生途径转化体系的优化 | 第43-44页 |
| ·转基因愈伤组织的分子检测 | 第44-47页 |
| ·转基因愈伤组织对NaCL，甘露醇抗性分析 | 第47页 |
| 2 结果与分析 | 第47-55页 |
| ·农杆菌介导的苜蓿器官发生途径转化体系 | 第47-49页 |
| ·器官发生转化体系的优化 | 第47-48页 |
| ·器官发生途径的植株再生 | 第48-49页 |
| ·农杆菌介导的苜蓿体胚发生途径转化体系 | 第49-51页 |
| ·抗性愈伤组织的筛选 | 第49-50页 |
| ·胚状体的诱导 | 第50-51页 |
| ·转基因抗性愈伤组织的分子生物学检测 | 第51-55页 |
| ·转基因愈伤组织的PCR检测 | 第51-52页 |
| ·转基因愈伤组织的RT-PCR检测 | 第52-53页 |
| ·转基因愈伤组织可溶性蛋白SDS-PAGE电泳分析 | 第53页 |
| ·转基因愈伤组织对不同胁迫的耐性分析 | 第53-55页 |
| 3 讨论 | 第55-59页 |
| ·农杆菌介导的外源基因转化系统的建立 | 第55-57页 |
| ·转基因愈伤组织的鉴定及耐盐性分析 | 第57-59页 |
| 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
