| 中文摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 第1章 文献综述 | 第11-43页 |
| ·多不饱和脂肪酸研究进展 | 第11-20页 |
| ·多不饱和脂肪酸的生物合成途径 | 第11-13页 |
| ·多不饱和脂肪酸的生物功能 | 第13-14页 |
| ·多不饱和脂肪酸的资源 | 第14-16页 |
| ·PUFA的生产策略 | 第16-20页 |
| ·植物鞘脂研究进展 | 第20-32页 |
| ·植物鞘脂的结构 | 第20-24页 |
| ·鞘脂的合成与代谢 | 第24-28页 |
| ·鞘脂在植物中的功能 | 第28-30页 |
| ·结语 | 第30-32页 |
| ·含细胞色素B_5结构域蛋白研究 | 第32-43页 |
| ·含Cytb_5结构域蛋白的种类 | 第33页 |
| ·含Cytb_5结构域蛋白研究进展 | 第33-40页 |
| ·含Cytb_5结构域蛋白的进化关系分析 | 第40-43页 |
| 第2章 引言 | 第43-45页 |
| 第3章 实验材料和方法 | 第45-66页 |
| ·实验材料 | 第45-48页 |
| ·实验方法 | 第48-66页 |
| ·黑茶藨子基因组DNA的提取 | 第48页 |
| ·同源基因片断的克隆 | 第48-49页 |
| ·参照Universal Genome Walker~(TM) Kit步骤方法进行基因组步移 | 第49-53页 |
| ·RnCyDB的定点突变构建 | 第53-54页 |
| ·嵌合基因RnCyDCA、RnCyDCB的构建 | 第54-56页 |
| ·DNA的琼脂糖凝胶电泳 | 第56页 |
| ·目的片段的回收 | 第56页 |
| ·回收产物的加A反应 | 第56-57页 |
| ·目的片段与pMD18-T载体的连接 | 第57页 |
| ·大肠杆菌转化 | 第57-58页 |
| ·目的片段检测及测序 | 第58-59页 |
| ·甘油管的制备 | 第59-60页 |
| ·目的片段的序列分析 | 第60页 |
| ·酵母表达载体的构建： | 第60-61页 |
| ·酿酒酵母表达体系与检测方法 | 第61-62页 |
| ·采用LiAC转化方法进行酵母转化 | 第62页 |
| ·RnCyDA在酿酒酵母中的诱导表达实验 | 第62-63页 |
| ·LCB提取、氧化和甲脂化 | 第63页 |
| ·植物鞘胺醇标准峰图的制备 | 第63页 |
| ·RnCyDCA、RnCyDCB在酿酒酵母中的诱导表达实验 | 第63-64页 |
| ·酵母菌脂肪酸的提取和甲脂化 | 第64页 |
| ·LA、GLA和ALA标准峰图的制备 | 第64页 |
| ·甲酯化的终产物GC-MS检测分析实验 | 第64-66页 |
| 第4章 结果与分析 | 第66-93页 |
| ·通过同源序列克隆获得RNCYDA／B／C基因 | 第66-67页 |
| ·基因组步移获得全长基因RNCYDA、RNCYDB和基因片断RNCYDC | 第67-68页 |
| ·RNCYDA、RNCYDB和RNCYDC推测编码氨基酸序列同源性分析 | 第68-72页 |
| ·RNCYDA和RNCYDB的DNA序列、推测编码氨基酸序列及其特征分析 | 第72-78页 |
| ·RnCyDA的DNA全长序列及其编码氨基酸序列 | 第72-73页 |
| ·RnCyDA推测编码氨基酸特征分析 | 第73-75页 |
| ·RnCyDB的DNA全长序列及其推测编码氨基酸序列 | 第75-76页 |
| ·RnCyDB的定点突变 | 第76-77页 |
| ·RnCyDB1推测编码氨基酸序列特征分析 | 第77-78页 |
| ·嵌合基因RNCYDCA、RNCYDCB的构建 | 第78-79页 |
| ·嵌合基因RNCYDCA、RNCYDCB推测编码氨基酸序列 | 第79-83页 |
| ·嵌合基因RnCyDCA和RnCyDCB全长DNA序列及其编码氨基酸序列 | 第79-80页 |
| ·RnCyDCA、RnCyDCB推测的编码氨基酸序列特征分析 | 第80-83页 |
| ·RNCYDA，RNCYDB1，RNCYDCA／CB的酿酒酵母表达载体构建 | 第83-85页 |
| ·RNCYDA基因具有Δ8-鞘脂脱氢酶功能 | 第85-88页 |
| ·酵母中LCB的检测方法的建立 | 第85-86页 |
| ·RnCyDA基因具有Δ8-鞘脂脱氢酶功能 | 第86-88页 |
| ·嵌合基因RNCYDCA、RNCYDCB具有Δ6-脂肪酸脱氢酶功能 | 第88-93页 |
| ·以LA(ω-6)为底物的催化功能 | 第88-91页 |
| ·以ALA(ω-3)为底物的催化功能 | 第91-93页 |
| 第5章 讨论 | 第93-102页 |
| ·含CYTB_5结构域脱氢酶的结构域特征与功能关系 | 第93-95页 |
| ·RNCYDA的Δ8-鞘脂脱氢酶功能 | 第95-96页 |
| ·构建嵌合基因RNCYDCA和RNCYDCB的理论依据 | 第96-97页 |
| ·嵌合基因编码蛋白RNCYDCA和RNCYDCB的功能差异分析 | 第97-98页 |
| ·RNCYDB1与RNCYDCB功能与结构分析 | 第98-100页 |
| ·含CYTB_5结构域蛋白的进化关系研究 | 第100-102页 |
| 第6章 结论 | 第102-104页 |
| 参考文献 | 第104-117页 |
| 缩略语 | 第117-118页 |
| 附录 | 第118-119页 |
| 致谢 | 第119页 |
