目录 | 第1-6页 |
摘要 | 第6-9页 |
Abstract | 第9-14页 |
第1章 文献综述 | 第14-43页 |
·猪细小病毒病研究概述 | 第14-31页 |
·猪细小病毒病的历史、分布和流行病学 | 第14-16页 |
·猪细小病毒病的临床症状和病理变化 | 第16-17页 |
·猪细小病毒病的诊断 | 第17-21页 |
·猪细小病毒病的免疫预防和控制 | 第21-23页 |
·猪细小病毒病的病原学 | 第23-31页 |
·蛋白质的体外表达 | 第31-36页 |
·大肠杆菌表达系统 | 第31-33页 |
·巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)表达系统简述 | 第33-34页 |
·杆状病毒表达系统简述 | 第34-36页 |
·细小病毒病毒样粒子的研究简述 | 第36-37页 |
·杆状病毒表达系统在细小病毒VLPs生产中的应用 | 第36页 |
·VLPs作为疫苗载体的研究 | 第36-37页 |
·PPV-VLPs | 第37页 |
·RNA干扰简述 | 第37-43页 |
·RNAi的发现与发展 | 第38页 |
·机理研究 | 第38-40页 |
·功能和应用研究 | 第40-41页 |
·问题与展望 | 第41-43页 |
第2章 猪细小病毒灭活疫苗免疫猪与野毒感染猪鉴别诊断方法的建立和应用研究 | 第43-93页 |
·研究的目的和意义 | 第43-44页 |
·材料与方法 | 第44-64页 |
·材料 | 第44-51页 |
·方法 | 第51-64页 |
·结果与分析 | 第64-84页 |
·PPV细胞毒血凝效价(HA)和感染滴度(TCID_(50)) | 第64页 |
·PPV-全病毒-ELISA的建立与评价结果 | 第64-69页 |
·临床样品中PPV ns1基因PCR检测方法的建立结果 | 第69-70页 |
·PPV ns1基因的PCR扩增、克隆及其在大肠杆菌中的表达 | 第70-74页 |
·PPV-NS1-ELISA的建立与评价结果 | 第74-82页 |
·PPV ns1基因在巴斯德毕赤酵母菌中的诱导表达研究 | 第82-84页 |
·讨论 | 第84-91页 |
·PPV中国株 | 第84-85页 |
·PPV-全病毒-EUSA | 第85-86页 |
·PCR检测临床样品中PPV ns1基因 | 第86-87页 |
·PPV ns1基因的PCR扩增、克隆及其在大肠杆菌中的表达 | 第87-88页 |
·PPV-NS1-EUSA | 第88-89页 |
·酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第89-91页 |
·巴斯德毕赤酵母(P. pasoris)及其外源蛋白表达 | 第91页 |
·小结 | 第91-93页 |
第3章 siRNA抑制PPVns1基因表达及PPV病毒复制的初步研究 | 第93-105页 |
·研究的目的和意义 | 第93-94页 |
·材料与方法 | 第94-97页 |
·材料 | 第94-95页 |
·方法 | 第95-97页 |
·结果与分析 | 第97-103页 |
·pSilencer-ns244和pSilencer-ns254的构建 | 第97-98页 |
·pcM4—ns1表达质粒的构建 | 第98-100页 |
·siRNA抑制PPV-NS1-GFP的融合蛋白表达 | 第100-102页 |
·siRNA对PPV复制的影响结果 | 第102-103页 |
·讨论 | 第103-104页 |
·小结 | 第104-105页 |
第4章 携带口蹄疫病毒抗原决定簇的猪细小病毒类病毒样粒子的初步研究 | 第105-119页 |
·研究的目的和意义 | 第105页 |
·材料与方法 | 第105-109页 |
·材料 | 第105-108页 |
·方法 | 第108-109页 |
·结果与分析 | 第109-116页 |
·pFast-TVP2的构建结果 | 第109-113页 |
·重组穿梭载体(Bacmid-Tvp2)的构建 | 第113页 |
·重组杆状病毒AcNPV-TVP_2的收集与保存 | 第113-114页 |
·AcNPV-TVP_2表达外源蛋白TVP2的分析鉴定 | 第114-116页 |
·讨论 | 第116-118页 |
·小结 | 第118-119页 |
参考文献 | 第119-137页 |
致谢 | 第137-138页 |
附录1:缩略词表 | 第138-140页 |
附录2:CURRICULUM VITAE | 第140-143页 |
附录3:PPV-全病毒-ELISA试剂盒 | 第143页 |
附录4:PPV-NS1-ELISA试剂盒 | 第143页 |