| 中文摘要 | 第1-11页 |
| 英文摘要 | 第11-14页 |
| 引言 | 第14-16页 |
| 第一篇 文献综述 | 第16-34页 |
| 1．淀粉分支酶的生物化学与分子生物学研究进展 | 第16-18页 |
| 1．1 淀粉分支酶的基础生物化学研究 | 第16-17页 |
| 1．2 淀粉分支酶基因的分子生物学研究 | 第17页 |
| 1．3 淀粉分支酶基因的应用前景 | 第17-18页 |
| 2．启动子的研究及应用 | 第18-22页 |
| 2．1 组成型启动子 | 第18-20页 |
| 2．2 组织特异型启动子 | 第20-21页 |
| 2．3 诱导型启动子 | 第21-22页 |
| 3．反义技术及其在植物基因工程中的应用 | 第22-26页 |
| 3．1 反义技术的作用机制 | 第22-24页 |
| 3．2 反义技术在植物改良上的应用 | 第24-26页 |
| 3．3 反义技术的研究展望 | 第26页 |
| 4．RNA干扰作用的研究进展 | 第26-31页 |
| 4．1 RNAi可能的分子机制 | 第27-28页 |
| 4．2 RNAi的分子生物学特性 | 第28-29页 |
| 4．3 RNAi的生物学意义 | 第29页 |
| 4．4 RNAi的应用及前景展望 | 第29-31页 |
| 5．玉米遗传转化的技术 | 第31-33页 |
| 5．1 农杆菌介导法 | 第31-32页 |
| 5．2 基因枪法 | 第32页 |
| 5．3 花粉管通道法 | 第32-33页 |
| 6．本项目研究的目的和意义 | 第33页 |
| 7．创新点 | 第33-34页 |
| 第二篇 研究内容 | 第34-81页 |
| 第一章 玉米淀粉分支酶基因启动子的克隆与功能分析 | 第34-51页 |
| 1．材料与方法 | 第34-41页 |
| 1．1 材料 | 第34页 |
| 1．1．1 植物材料 | 第34页 |
| 1．1．2 菌株和质粒 | 第34页 |
| 1．1．3 试剂与酶 | 第34页 |
| 1．1．4 培养基 | 第34页 |
| 1．1．5 人工寡核苷酸引物 | 第34页 |
| 1．2 方法 | 第34-41页 |
| 1．2．1 玉米总DNA的提取 | 第34-35页 |
| 1．2．2 玉米淀粉分支酶基因启动子的PCR扩增 | 第35页 |
| 1．2．3 PCR扩增产物电泳及DNA片段的回收 | 第35-36页 |
| 1．2．4 淀粉分支酶基因启动子的克隆和筛选 | 第36-37页 |
| 1．2．5 重组克隆的鉴定 | 第37页 |
| 1．2．6 淀粉分支酶基因启动子的序列分析 | 第37页 |
| 1．2．7 植物表达载体的构建 | 第37-38页 |
| 1．2．8 农杆菌介导转化烟草 | 第38-39页 |
| 1．2．8．1 农杆菌工程菌液的制备 | 第38页 |
| 1．2．8．2 外植体材料的培养和处理 | 第38页 |
| 1．2．8．3 烟草的转化与再生 | 第38-39页 |
| 1．2．8．4 烟草再生苗的分子检测 | 第39页 |
| 1．2．9 GUS活性的荧光检测和组织染色分析 | 第39-41页 |
| 1．2．9．1 GUS活性的荧光检测 | 第39-41页 |
| 1．2．9．2 GUS活性的组织染色分析 | 第41页 |
| 2．结果与分析 | 第41-49页 |
| 2．1 玉米淀粉分支酶基因启动子的分离和克隆 | 第41-42页 |
| 2．2 玉米淀粉分支酶基因启动子的序列分析 | 第42-43页 |
| 2．3 植物表达载体的构建 | 第43-45页 |
| 2．4 农杆菌介导转化烟草 | 第45-48页 |
| 2．4．1 烟草的浸染及共培养 | 第45页 |
| 2．4．2 选择培养和生根培养 | 第45-48页 |
| 2．5 转基因植株的鉴定 | 第48页 |
| 2．5．1 PCR检测 | 第48页 |
| 2．5．2 转基因植株的Southern杂交检测 | 第48页 |
| 2．6 GUS活性的检测 | 第48-49页 |
| 3．讨论 | 第49-51页 |
| 第二章 玉米淀粉分支酶基因的克隆和高效植物表达载体的构建 | 第51-60页 |
| 1．材料与方法 | 第51-53页 |
| 1．1 材料 | 第51页 |
| 1．1．1 菌种与质粒 | 第51页 |
| 1．1．2 培养基 | 第51页 |
| 1．1．3 试剂与酶 | 第51页 |
| 1．1．4 人工寡核苷酸引物 | 第51页 |
| 1．2 方法 | 第51-53页 |
| 1．2．1 淀粉分支酶基因片段的PCR扩增 | 第51-52页 |
| 1．2．2 淀粉分支酶基因片段的克隆、筛选及鉴定 | 第52页 |
| 1．2．3 淀粉分支酶基因片段的序列分析 | 第52页 |
| 1．2．4 高效植物表达载体的构建 | 第52-53页 |
| 2．结果与分析 | 第53-59页 |
| 2．1 淀粉分支酶基因片段的PCR扩增 | 第53页 |
| 2．2 淀粉分支酶基因片段的克隆和序列测定 | 第53-56页 |
| 2．2．1 淀粉分支酶基因片段的克隆 | 第53-54页 |
| 2．2．2 淀粉分支酶基因片段的序列 | 第54-56页 |
| 2．3 玉米淀粉分支酶基因反义表达载体和siRNA表达体系的构建 | 第56-59页 |
| 2．3．1 玉米淀粉分支酶基因反义表达载体的构建 | 第56页 |
| 2．3．2 玉米淀粉分支酶基因siRNA表达体系的构建 | 第56-59页 |
| 3．讨论 | 第59-60页 |
| 第三章 玉米淀粉分支酶基因的遗传转化 | 第60-67页 |
| 1．材料与方法 | 第60-62页 |
| 1．1 材料 | 第60页 |
| 1．1．1 受体材料 | 第60页 |
| 1．1．2 菌种 | 第60页 |
| 1．1．3 培养基 | 第60页 |
| 1．2 方法 | 第60-62页 |
| 1．2．1 农杆菌介导的遗传转化 | 第60-61页 |
| 1．2．1．1 受体体系的建立 | 第60-61页 |
| 1．2．1．2 目的基因的转化及转化植株的筛选 | 第61页 |
| 1．2．2 花粉管通道法的遗传转化 | 第61-62页 |
| 2．结果与分析 | 第62-64页 |
| 2．1 受体体系的建立 | 第62页 |
| 2．2 农杆菌介导的遗传转化 | 第62-63页 |
| 2．3 抗性植株的分化和生根 | 第63页 |
| 2．4 转化植株的移栽 | 第63-64页 |
| 2．5 花粉管通道法的遗传转化 | 第64页 |
| 3．讨论 | 第64-67页 |
| 第四章 转基因植株的检测 | 第67-81页 |
| 1．材料与方法 | 第67-74页 |
| 1．1 材料 | 第67页 |
| 1．2 方法 | 第67-74页 |
| 1．2．1 PCR检测 | 第67页 |
| 1．2．2 转基因植株的Southern杂交 | 第67-70页 |
| 1．2．3 转基因植株的Northern杂交 | 第70-73页 |
| 1．2．4 转基因植株的淀粉分支酶活性的检测 | 第73页 |
| 1．2．5 转基因植株的直链及支链淀粉含量的测定 | 第73-74页 |
| 1．2．6 转基因植株后代的遗传分析 | 第74页 |
| 2．结果与分析 | 第74-79页 |
| 2．1 PCR检测 | 第74-75页 |
| 2．2 转基因植株的Southern杂交 | 第75-76页 |
| 2．3 转基因植株的Northern杂交 | 第76-77页 |
| 2．4 玉米淀粉分支酶活性的检测 | 第77-78页 |
| 2．5 直链淀粉含量的测定 | 第78-79页 |
| 2．6 转基因植株后代的遗传分析 | 第79页 |
| 3．讨论 | 第79-81页 |
| 结论 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-94页 |
| 附录1 英文缩略词表 | 第94-96页 |
| 附录2 常用缓冲溶液及培养基的配制 | 第96-102页 |
| 附录3 博士期间的主要研究成果 | 第102-104页 |
| 致谢 | 第104页 |
