| 前言 | 第1-7页 |
| 第一章 材料和方法 | 第7-18页 |
| 1 主要仪器和试剂 | 第7-9页 |
| 1．1 主要仪器 | 第7页 |
| 1．2 主要试剂 | 第7-8页 |
| 1．3 主要试剂配置 | 第8-9页 |
| 2 细胞和病毒的培养及收获 | 第9页 |
| 3 目的基因的获得、纯化和鉴定 | 第9-11页 |
| 3．1 目的基因的选择和PCR引物的设计合成 | 第9-10页 |
| 3．2 HHV8 DNA模板的制备 | 第10页 |
| 3．3 PCR扩增 | 第10页 |
| 3．4 PCR扩增产物的纯化 | 第10-11页 |
| 3．5 目的基因的序列测定 | 第11页 |
| 4 HHV8 ORF65原核重组表达质粒的构建 | 第11-13页 |
| 4．1 目的基因及载体pThioHisA的酶切及回收 | 第11-12页 |
| 4．2 载体与目的基因的连接 | 第12页 |
| 4．3 重组质粒的转化 | 第12页 |
| 4．4 重组原核表达质粒的筛选及鉴定 | 第12-13页 |
| 5 重组克隆的诱导表达及表达蛋白的检测 | 第13-14页 |
| 6 重组融合蛋白的纯化 | 第14-15页 |
| 7 重组蛋白抗原性分析 | 第15-18页 |
| 7．1 HHV8 IgG和IgM阳性血清的筛选 | 第15-16页 |
| 7．1．1 标本的采集 | 第15页 |
| 7．1．2 IFA法检测血清标本中HHV8 IgG、IgM | 第15-16页 |
| 7．2 Western印迹检测重组融合蛋白的特异性 | 第16-17页 |
| 7．3 包被ELISA板进行抗原性分析 | 第17-18页 |
| 8 与同类产品比较 | 第18页 |
| 第二章 结果 | 第18-25页 |
| 1 目的基因的PCR扩增 | 第18-19页 |
| 2 原核重组表达质粒的筛选鉴定 | 第19页 |
| 3 目的基因的序列鉴定 | 第19-20页 |
| 4 表达重组融合蛋白的检测 | 第20-21页 |
| 5 表达融合蛋白的纯化 | 第21-22页 |
| 6 重组蛋白抗原性分析 | 第22-23页 |
| 7 ELISA试验结果 | 第23-25页 |
| 7．1 与同类产品比较的结果 | 第23-25页 |
| 第三章 讨论 | 第25-28页 |
| 第四章 结论 | 第28-29页 |
| 参考文献 | 第29-32页 |
| 致谢 | 第32-33页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第33-34页 |
| 综述 | 第34-55页 |
| 一 HHV-8基因组结构 | 第35-41页 |
| 二 HHV-8与趋化因子 | 第41-42页 |
| 三 HHV-8的致病性与免疫性 | 第42-43页 |
| 四 HHV-8相关疾病以及血清流行病学特点 | 第43-48页 |
| 五 HHV-8的实验室诊断 | 第48-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
| 学位论文独创性声明 | 第55-56页 |
