| 致谢 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 目录 | 第12-15页 |
| 引言 | 第15-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-33页 |
| 第一节 迟缓爱德华氏菌的研究进展 | 第16-28页 |
| ·迟缓爱德华氏菌分类地位、分布特征和感染途径 | 第16-18页 |
| ·迟缓爱德华氏菌的致病机制 | 第18-28页 |
| ·黏附和入侵 | 第18-20页 |
| ·细胞毒素和胞外酶 | 第20页 |
| ·抗免疫杀伤机制 | 第20-21页 |
| ·细菌分泌系统 | 第21-26页 |
| ·密度感应系统 | 第26-27页 |
| ·铁摄取 | 第27页 |
| ·寡肽透过酶 | 第27-28页 |
| 第二节 迟缓爱德华氏菌的防治 | 第28-33页 |
| ·化学治疗法 | 第28页 |
| ·免疫治疗防治法 | 第28-33页 |
| ·灭活疫苗 | 第29-30页 |
| ·空壳疫苗 | 第30页 |
| ·蛋白疫苗 | 第30-31页 |
| ·DNA疫苗 | 第31页 |
| ·弱毒疫苗 | 第31-32页 |
| ·外膜小泡疫苗 | 第32-33页 |
| 第二章 迟缓爱德华氏菌LSE40ΔaroA基因缺失株的特征及免疫效果 | 第33-47页 |
| ·材料与方法 | 第33-37页 |
| ·菌株和培养基 | 第33-34页 |
| ·实验鱼 | 第34页 |
| ·LSE40ΔaroA突变株表型的分析 | 第34-35页 |
| ·扫描电镜观察细菌形态 | 第34页 |
| ·培养基检测细菌的生长 | 第34页 |
| ·泳动实验 | 第34-35页 |
| ·菌膜形成 | 第35页 |
| ·细菌自凝 | 第35页 |
| ·迟缓爱德华氏菌输送器蛋白的检测 | 第35页 |
| ·LSE40ΔaroA突变株对大菱鲆的半数致死量 | 第35页 |
| ·LSE40ΔaroA在大菱鲆体内存活情况 | 第35页 |
| ·LSE40ΔaroA突变株对大菱鲆的免疫 | 第35-36页 |
| ·注射免疫 | 第36页 |
| ·浸泡免疫 | 第36页 |
| ·免疫相关基因的表达 | 第36-37页 |
| ·RNA提取、DNA消化和反转录 | 第36-37页 |
| ·实时定量PCR | 第37页 |
| ·结果 | 第37-44页 |
| ·野生型LSE40 和突变株LSE40ΔaroA的表型特征比较 | 第37-39页 |
| ·T3SS输送器蛋白的分泌 | 第39页 |
| ·毒力检测 | 第39-40页 |
| ·细菌在鱼体内的存活时间 | 第40-41页 |
| ·突变株LSE40ΔaroA对大菱鲆的免疫效果 | 第41-43页 |
| ·注射免疫效果 | 第41-42页 |
| ·浸泡免疫 | 第42-43页 |
| ·免疫相关基因的表达 | 第43-44页 |
| ·讨论 | 第44-47页 |
| 第三章 迟缓爱德华氏菌基因缺失突变株的构建、毒力检测及其免疫保护效果 | 第47-73页 |
| ·材料和方法 | 第48-57页 |
| ·菌株、质粒、细菌培养、实验鱼和引物 | 第48页 |
| ·基因缺失突变株的构建 | 第48-54页 |
| ·purA基因缺失片段的构建 | 第50-52页 |
| ·含有purA基因缺失片段的pRE112 质粒构建 | 第52-53页 |
| ·两次同源重组构建LSE40ΔpurA基因缺失株 | 第53-54页 |
| ·其它突变株的构建 | 第54页 |
| ·突变株对蓝蔓龙的半数致死量 | 第54-55页 |
| ·注射免疫蓝蔓龙 | 第55页 |
| ·浸泡免疫牙鲆 | 第55-56页 |
| ·LSE40ΔaroAΔesrB免疫大菱鲆 | 第56-57页 |
| ·注射免疫 | 第56页 |
| ·浸泡免疫 | 第56-57页 |
| ·灌喂免疫 | 第57页 |
| ·结果 | 第57-69页 |
| ·突变株的鉴定及表型特征 | 第57-60页 |
| ·LSE40ΔpurA | 第57-58页 |
| ·LSE40Δasd | 第58-59页 |
| ·LSE40ΔaroAΔevpH和LSE40ΔpurAΔaroA | 第59-60页 |
| ·LSE40ΔpurAΔesrB 、 LSE40ΔaroAΔesrB 、 LSE40ΔevpHΔesrB 和LSE40ΔaroAΔevpHΔesrB | 第60页 |
| ·LSE40ΔaroAΔesaC和LSE40ΔaroAΔesaCΔevpH | 第60-62页 |
| ·LSE40ΔaroAΔrpoS | 第61-62页 |
| ·突变株对蓝蔓龙的半数致死量 | 第62-63页 |
| ·弱毒株对蓝蔓龙的免疫保护 | 第63-64页 |
| ·4 株弱毒株浸泡免疫牙鲆的保护 | 第64-66页 |
| ·弱毒株在鱼体内的存活时间 | 第64-65页 |
| ·血清抗体检测 | 第65页 |
| ·免疫保护 | 第65-66页 |
| ·LSE40ΔaroAΔesrB对大菱鲆的免疫保护 | 第66-69页 |
| ·注射免疫 | 第66-68页 |
| ·浸泡免疫 | 第68页 |
| ·灌喂免疫 | 第68-69页 |
| ·讨论 | 第69-73页 |
| 第四章 减毒迟缓爱德华氏菌载体疫苗的构建：T3SS效应蛋白分泌性信号肽的鉴定 | 第73-81页 |
| ·材料与方法 | 第74-76页 |
| ·菌株、培养基、抗体和质粒 | 第74-75页 |
| ·信号肽序列分析 | 第75页 |
| ·预测信号肽重组表达质粒的构建 | 第75页 |
| ·迟缓爱德华氏菌T3SS的诱导表达、蛋白提取和检测 | 第75-76页 |
| ·结果 | 第76-79页 |
| ·分子生物学分析结果 | 第76页 |
| ·预测信号肽重组表达质粒的构建 | 第76-77页 |
| ·融合蛋白的检测 | 第77-79页 |
| ·讨论 | 第79-81页 |
| 结论 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-94页 |
| 简历 | 第94-95页 |
| 发表文章和申请专利 | 第95页 |
