| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要 | 第8-10页 |
| 缩略语 | 第10-11页 |
| 第一部分 文献综述 | 第11-24页 |
| 1 已克隆的抗病基因及其特点 | 第11-15页 |
| 2 R基因作用机制 | 第15-16页 |
| 3 应用以简并寡核苷酸为引物的PCR技术克隆基因家族成员 | 第16-18页 |
| 4 R基因类似序列(RGA)的研究意义 | 第18-22页 |
| 5 RGA在果树抗病基因研究上的应用 | 第22-24页 |
| 第二部分 研究报告 | 第24-73页 |
| 引言 | 第24-25页 |
| 第一章 植物基因组DNA的PCR分析 | 第25-45页 |
| 1 材料与方法 | 第25-27页 |
| 1．1 两种微量提取DNA方法的比较 | 第25-26页 |
| 1．2 DNA含量的测定和完整性分析 | 第26页 |
| 1．3 简并引物的设计 | 第26页 |
| 1．4 PCR反应体系的优化 | 第26-27页 |
| 1．5 目的基因片段的回收与测定 | 第27页 |
| 2 结果与分析 | 第27-38页 |
| 2．1 不同DNA提取方法的比较 | 第27-30页 |
| 2．2 不同反应条件下的PCR扩增结果 | 第30-35页 |
| 2．3 优化体系下的PCR重复扩增 | 第35-37页 |
| 2．4 目的基因片段的回收后DNA的含量 | 第37-38页 |
| 3 讨论 | 第38-41页 |
| 3．1 植物基因组DNA的提取 | 第38页 |
| 3．2 PCR扩增反应条件的优化和引物筛选 | 第38-41页 |
| 附录1 | 第41-45页 |
| 第二章 获得的抗病同源序列的克隆与分析 | 第45-73页 |
| 1 材料与方法 | 第45-46页 |
| 1．1 感受态细胞的制备与保存 | 第45页 |
| 1．2 连接反应 | 第45页 |
| 1．3 转化 | 第45页 |
| 1．4 α-互补检测 | 第45页 |
| 1．5 阳性质粒的收获和阳性质粒DNA的提取 | 第45-46页 |
| 1．6 阳性质粒DNA和菌液PCR鉴定 | 第46页 |
| 1．7 测序及序列分析 | 第46页 |
| 2 结果与分析 | 第46-58页 |
| 2．1 克隆的α-互补检测 | 第46-47页 |
| 2．2 质粒DNA的电泳检测 | 第47页 |
| 2．3 质粒DNA和菌液的PCR比较鉴定 | 第47-48页 |
| 2．4 测序结果与序列初步的异同分析 | 第48-49页 |
| 2．5 抗病基因同源序列的氨基酸序列分析 | 第49-56页 |
| 2．6 抗病基因同源序列的氨基酸序列聚类分析 | 第56-57页 |
| 2．7 抗病基因同源序列的氨基酸序列同源分析 | 第57-58页 |
| 3 讨论 | 第58-61页 |
| 3．1 目的基因片段的克隆 | 第58-59页 |
| 3．2 克隆的PCR鉴定分析 | 第59页 |
| 3．3 克隆NBS-LRR类与STK类抗病基因同源序列的分析 | 第59-61页 |
| 附录2-1 | 第61-65页 |
| 附录2-2 | 第65-73页 |
| 全文讨论 | 第73-76页 |
| 参考文献 | 第76-83页 |
| 致谢 | 第83页 |