第一章 文献综述 | 第1-32页 |
·生理功能 | 第13-15页 |
·理化性质 | 第15-16页 |
·rHSA的表达系统 | 第16-20页 |
·原核表达系统 | 第16页 |
·酵母表达体系 | 第16-19页 |
·其他表达体系 | 第19-20页 |
·高密度发酵生产人血清白蛋白 | 第20-21页 |
·蛋白酶对rHSA的降解 | 第21-22页 |
·流加模型 | 第22-23页 |
·重组人血清白蛋白的分离纯化 | 第23-29页 |
·人源血浆白蛋白(pHSA)的提取 | 第23-26页 |
·rHSA的提取 | 第26-29页 |
·rHSA与pHSA的比较 | 第29页 |
·国内外rHSA研究现状 | 第29-30页 |
·发酵法生产重组人血清白蛋白的研究意义 | 第30-32页 |
第二章 实验材料与方法 | 第32-41页 |
·菌种和培养基 | 第32-33页 |
·菌种 | 第32页 |
·培养基 | 第32-33页 |
·实验药品与仪器设备 | 第33页 |
·培养方法 | 第33页 |
·菌体培养 | 第33页 |
·重组白蛋白的诱导表达 | 第33页 |
·分析方法 | 第33-41页 |
·菌体干重测定方法 | 第33页 |
·酵母细胞密度分析 | 第33-34页 |
·铵离子浓度测定 | 第34-35页 |
·高碘酸钠氧化法测甘油浓度 | 第35-37页 |
·总蛋白测定 | 第37-39页 |
·甲醇浓度测定 | 第39页 |
·SDS-PAGE凝胶电泳 | 第39页 |
·重组人血清白蛋白测定方法 | 第39-41页 |
第三章 生长期发酵条件的研究 | 第41-48页 |
·不同种子培养基对毕赤酵母菌种生长的影响 | 第41-43页 |
·装液量对菌种生长的影响 | 第43-44页 |
·离心的影响 | 第44页 |
·菌体浓度的影响 | 第44-45页 |
·正交实验 | 第45-46页 |
·小结 | 第46-48页 |
第四章 诱导期添加不同成分的影响 | 第48-58页 |
·诱导期pH变化对蛋白表达的影响 | 第48-49页 |
·微量元素PTM1对蛋白表达的影响 | 第49-52页 |
·有无PTM1对蛋白表达的影响 | 第49-50页 |
·生长期不同PTM1浓度对菌体生长及蛋白表达的影响 | 第50-52页 |
·诱导期不同PTM1浓度对蛋白表达的影响 | 第52页 |
·硫酸铵对菌体生长及白蛋白表达的影响 | 第52-54页 |
·油酸的影响 | 第54-55页 |
·甲醇加量的影响 | 第55-57页 |
·小结 | 第57-58页 |
第五章 甲醇流加策略对重组毕赤酵母高密度发酵的影响 | 第58-63页 |
·根据溶氧控制甲醇流加 | 第58-59页 |
·通过气相色谱检测控制甲醇流加 | 第59-60页 |
·甲醇-甘油混合流加 | 第60-62页 |
·小结 | 第62-63页 |
第六章 离子交换层析分离人血清白蛋白 | 第63-72页 |
·实验材料 | 第63页 |
·温度对吸附的影响 | 第63-64页 |
·pH对吸附的影响 | 第64-66页 |
·离子强度对吸附的影响 | 第66-67页 |
·进样浓度对吸附的影响 | 第67-68页 |
·pH对脱附的影响 | 第68-69页 |
·离子强度对脱附的影响 | 第69-70页 |
·载体对重组人血清白蛋白和杂蛋白的分离 | 第70-71页 |
·小结 | 第71-72页 |
第七章 今后工作建议 | 第72-74页 |
参考文献 | 第74-82页 |
附 录 | 第82-85页 |
附录一 实验药品及材料 | 第82-84页 |
附录二 主要实验设备 | 第84-85页 |
致 谢 | 第85-86页 |
攻读硕士学位期间发表论文目录 | 第86页 |