| 中文摘要 | 第1-10页 |
| 英文摘要 | 第10-12页 |
| 主要缩略词表 | 第12-13页 |
| 第一部分 文献综述 | 第13-29页 |
| 1． 野桑蚕的研究与家蚕的起源 | 第13-16页 |
| 1．1 野桑蚕的研究 | 第13-15页 |
| 1．1．1 生物学上的研究 | 第13页 |
| 1．1．2 遗传物质的研究 | 第13-14页 |
| 1．1．2．1 染色体数目及结构变异研究 | 第13-14页 |
| 1．1．2．2 DNA多态性研究 | 第14页 |
| 1．1．2．3 Giemsa淡染性染色体研究 | 第14页 |
| 1．1．3 同工酶手段研究野桑蚕 | 第14页 |
| 1．1．4 育种学上的研究 | 第14-15页 |
| 1．1．5 作为桑园害虫的研究 | 第15页 |
| 1．2 家蚕的起源研究 | 第15-16页 |
| 2． 家蚕及野桑蚕分子系统学研究进展 | 第16-20页 |
| 2．1 分子系统学概述及研究方法 | 第16-17页 |
| 2．1．1 分子系统学概述 | 第16页 |
| 2．1．2 方法及意义 | 第16-17页 |
| 2．1．3 系统发生树的重建方法 | 第17页 |
| 2．2 家蚕、野桑蚕分子系统学研究进展 | 第17-20页 |
| 2．2．1 家蚕、野桑蚕核酸之外的分子系统学研究 | 第17页 |
| 2．2．2 RFLP在家蚕、野桑蚕分子系统学上的应用 | 第17-18页 |
| 2．2．3 RAPD在家蚕、野桑蚕分子系统学中的应用 | 第18页 |
| 2．2．4 AFLP在家蚕、野桑蚕分子系统学上的应用 | 第18页 |
| 2．2．5 SSR在家蚕、野桑蚕分子系统学上的应用 | 第18-19页 |
| 2．2．6 核酸序列分析在家蚕、野桑蚕分子系统学上的应用 | 第19-20页 |
| 3． α-淀粉酶及基因 | 第20-29页 |
| 3．1 α-淀粉酶及基因概述 | 第20页 |
| 3．2 家蚕α-淀粉酶及基因的研究进展 | 第20-26页 |
| 3．2．1 血淋巴和消化液淀粉酶 | 第21-22页 |
| 3．2．1．1 家蚕消化液淀粉酶 | 第21-22页 |
| 3．2．1．2 家蚕血淋巴淀粉酶 | 第22页 |
| 3．2．2 消化液淀粉酶活性与产量性状的相关性及其活性的遗传模式 | 第22-24页 |
| 3．2．2．1 品种间的活性差异 | 第22-23页 |
| 3．2．2．2 外界条件对活性的影响 | 第23页 |
| 3．2．2．3 活性与产量性状的相关性 | 第23-24页 |
| 3．2．2．4 活性的遗传模式 | 第24页 |
| 3．2．3 消化液淀粉酶的同工酶及其遗传模式 | 第24-25页 |
| 3．2．3．1 品种间同工酶谱的差异 | 第24-25页 |
| 3．2．3．2 同工酶的遗传模式 | 第25页 |
| 3．2．4 消化液淀粉酶作为家蚕育种的标记 | 第25页 |
| 3．2．5 家蚕消化液淀粉酶基因 | 第25-26页 |
| 3．3 其他鳞翅目昆虫α-淀粉酶及基因的研究概况 | 第26-27页 |
| 3．4 基于α-淀粉酶及基因的分子系统学研究 | 第27-29页 |
| 第二部分 引言 | 第29-32页 |
| 1． 论文研究的目的和意义 | 第29-30页 |
| 2． 主要实验内容 | 第30-31页 |
| 3． 技术路线 | 第31-32页 |
| 第三部分 野桑蚕α-淀粉酶全基因的分段克隆与序列测定 | 第32-54页 |
| 1． 材料与方法 | 第32-40页 |
| 1．1 材料 | 第32-34页 |
| 1．1．1 实验材料 | 第32-33页 |
| 1．1．2 主要生化试剂 | 第33页 |
| 1．1．3 常用溶液的配制 | 第33-34页 |
| 1．1．4 主要仪器 | 第34页 |
| 1．2 方法 | 第34-40页 |
| 1．2．1 野桑蚕模板DNA的制备 | 第34-35页 |
| 1．2．2 PCR体系及扩增程序 | 第35-36页 |
| 1．2．2．1 PCR反应体系 | 第35页 |
| 1．2．2．2 PCR扩增程序 | 第35-36页 |
| 1．2．3 目的片段的回收 | 第36页 |
| 1．2．4 目的片段的克隆 | 第36-39页 |
| 1．2．4．1 质粒载体的准备 | 第36-37页 |
| 1．2．4．2 目的片段的准备 | 第37页 |
| 1．2．4．3 目的片段与载体的连接 | 第37页 |
| 1．2．4．4 感受态细胞的制备 | 第37-38页 |
| 1．2．4．5 转化 | 第38页 |
| 1．2．4．6 转化子的蓝白菌落筛选与鉴定 | 第38-39页 |
| 1．2．5 测序与序列分析 | 第39-40页 |
| 1．2．5．1 序列测定 | 第39页 |
| 1．2．5．2 片段5、6的序列测定 | 第39-40页 |
| 1．2．5．3 序列分析所用软件 | 第40页 |
| 2． 结果与分析 | 第40-54页 |
| 2．1 基因组DNA的提取 | 第40-41页 |
| 2．2 引物的设计 | 第41-42页 |
| 2．3 野桑蚕α-淀粉酶基因的分段扩增 | 第42页 |
| 2．4 野桑蚕α-淀粉酶基因的分段克隆 | 第42-45页 |
| 2．4．1 片段1、5、7的克隆 | 第42-44页 |
| 2．4．1．1 片段1、5、7的滞后质粒检测 | 第42-43页 |
| 2．4．1．2 片段1、5、7滞后质粒的PCR扩增检测 | 第43页 |
| 2．4．1．3 片段1、5、7滞后质粒的酶切鉴定 | 第43-44页 |
| 2．4．2 片段3、4、6的克隆 | 第44-45页 |
| 2．4．2．1 片段3、4、6的滞后质粒检测 | 第44页 |
| 2．4．2．2 片段3、4、6滞后质粒的PCR检测 | 第44-45页 |
| 2．4．2．3 片段3、4、6滞后质粒的酶切鉴定 | 第45页 |
| 2．4．3 对经过检测的阳性克隆作永久性保存 | 第45页 |
| 2．5 野桑蚕α-淀粉酶基因的分段序列测定及拼接 | 第45-47页 |
| 2．5．1 片段1的序列测定与分析 | 第45-46页 |
| 2．5．2 片段2、3、4、5的序列测定 | 第46-47页 |
| 2．5．2．1 片段2的序列测定与分析 | 第46页 |
| 2．5．2．2 片段3、4、5的序列测定与分析 | 第46-47页 |
| 2．5．3 片段6、7的序列测定 | 第47页 |
| 2．5．4 全基因序列拼接 | 第47页 |
| 2．6 野桑蚕α-淀粉酶全基因的整体结构分析 | 第47-49页 |
| 2．7 野桑蚕、家蚕α-淀粉酶基因的分析比较 | 第49-54页 |
| 2．7．1 全基因序列的统计比较 | 第49-50页 |
| 2．7．2 密码子碱基组成的统计比较 | 第50页 |
| 2．7．3 推定氨基酸序列的分析比较 | 第50-51页 |
| 2．7．4 野桑蚕与家蚕IntronⅡ中non-LTR retrotransposon的序列比较 | 第51-52页 |
| 2．7．5 五种昆虫α-淀粉酶基因序列同源性比较 | 第52-54页 |
| 第四部分 IntronⅠ的分子系统学分析 | 第54-58页 |
| 1． 材料与方法 | 第54-55页 |
| 1．1 家蚕品种 | 第54页 |
| 1．2 主要实验仪器、生化试剂及常用溶液的配制 | 第54页 |
| 1．3 DNA的提取 | 第54-55页 |
| 1．4 PCR的扩增体系和扩增程序 | 第55页 |
| 1．5 实验数据的收集及整理 | 第55页 |
| 2． 结果与分析 | 第55-58页 |
| 2．1 基因组DNA的提取 | 第55页 |
| 2．2 IntronⅠ的扩增结果与序列测定 | 第55-56页 |
| 2．2．1 引物的设计 | 第55-56页 |
| 2．2．2 IntronⅠ的扩增 | 第56页 |
| 2．2．3 IntronⅠ的序列测定与拼接 | 第56页 |
| 2．3 基于IntronⅠ的分子系统学研究 | 第56-58页 |
| 第五部分 讨论 | 第58-63页 |
| 1． PCR扩增和片段的克隆 | 第58-59页 |
| 1．1 特异引物的设计 | 第58页 |
| 1．2 退火温度的确定 | 第58页 |
| 1．3 片段的克隆 | 第58-59页 |
| 2． 家蚕和野桑蚕之间的亲缘关系 | 第59页 |
| 2．1 基因结构与基因序列的统计比较 | 第59页 |
| 2．2 氨基酸序列及密码子碱基组成的分析比较 | 第59页 |
| 3． 家蚕和野桑蚕α-淀粉酶基因的分子进化研究 | 第59-62页 |
| 3．1 内含子和外显子的分子进化研究 | 第59-60页 |
| 3．2 基因密码子的碱基组成分析 | 第60页 |
| 3．3 推定氨基酸序列的分析比较 | 第60-61页 |
| 3．4 IntronⅡ的分子进化研究 | 第61页 |
| 3．5 基于IntronⅠ的分子系统学研究 | 第61-62页 |
| 4． 进一步研究的思路 | 第62-63页 |
| 第六部分 结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-72页 |
| 附录1． 野桑蚕α-淀粉酶基因序列 | 第72-74页 |
| 附录2 部分家蚕品种和野桑蚕α-淀粉酶基因intronⅠ的Clustal W序列对准图 | 第74-77页 |
| 致谢 | 第77页 |
