| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 前言 | 第8-22页 |
| 一. 赤潮毒素及其检测方法 | 第8-16页 |
| 1 赤潮毒素 | 第8-11页 |
| 2 赤潮毒素的检测方法 | 第11-16页 |
| 二. 原癌基因c-fos及其启动子 | 第16-18页 |
| 1 c-fos基因的结构特点 | 第16-17页 |
| 2 c-fos基因的诱导表达及调控机制 | 第17-18页 |
| 三. 报告基因-增强型绿色荧光蛋白 | 第18-21页 |
| 1 绿色荧光蛋白的分子特性及发光机制 | 第18-19页 |
| 2 绿色荧光蛋白的应用特点 | 第19-21页 |
| 四. 本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 第二章 真核表达载体pEGFP-c-fos的构建 | 第22-37页 |
| 一. 材料 | 第22-25页 |
| 1 菌株、质粒 | 第22页 |
| 2 主要生化试剂 | 第22页 |
| 3 培养基、溶液及缓冲液的配制 | 第22-24页 |
| 4 主要仪器 | 第24-25页 |
| 二. 方法 | 第25-33页 |
| 1 技术路线 | 第25-26页 |
| 2 构建步骤 | 第26-33页 |
| 三. 结果 | 第33-34页 |
| 1 pEGFP质粒酶切鉴定图 | 第33页 |
| 2 pEGFP-c-fos重组质粒鉴定图 | 第33-34页 |
| 3 测序鉴定 | 第34页 |
| 四. 讨论 | 第34-36页 |
| 1 真核表达载体的选取 | 第34-35页 |
| 2 载体构建 | 第35-36页 |
| 五. 小结 | 第36-37页 |
| 第三章 重组质粒pEGFP-c-fos的表达及其在赤潮毒素检测中的应用 | 第37-50页 |
| 一. 材料 | 第37-38页 |
| 1 细胞株 | 第37页 |
| 2 主要生化试剂 | 第37页 |
| 3 细胞培养液、抗生素及缓冲液的配制 | 第37-38页 |
| 二. 方法 | 第38-40页 |
| 1 细胞培养 | 第38页 |
| 2 细胞转染及抗性克隆的筛选 | 第38-39页 |
| 3 重组质粒pEGFP-c-fos在BIU-87细胞中的表达 | 第39页 |
| 4 在赤潮毒素检测中的初步应用 | 第39-40页 |
| 三. 结果 | 第40-45页 |
| 1 抗性克隆的筛选及形成 | 第40-41页 |
| 2 乌头碱处理后抗性克隆中绿色荧光蛋白的表达情况 | 第41-42页 |
| 3 在赤潮毒素检测中的初步应用 | 第42-45页 |
| 四. 讨论 | 第45-49页 |
| 1 细胞株的选取 | 第45页 |
| 2 转染方法的选取 | 第45-46页 |
| 3 影响细胞转染效率的因素 | 第46-47页 |
| 4 绿色荧光蛋白的定量研究 | 第47-49页 |
| 五. 小结 | 第49-50页 |
| 第四章 总结与展望 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-56页 |
| 附录一 重组质粒c-fos启动子测序图谱(正向) | 第56-57页 |
| 附录二 重组质粒c-fos启动子测序图谱(反向) | 第57-58页 |
| 在学期间发表的论文 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59页 |