| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 1 引言 | 第13-43页 |
| ·盐分过多对植物造成的伤害 | 第14页 |
| ·植物的耐盐机理 | 第14-17页 |
| ·形态适应在植物耐盐性中的重要作用 | 第14-15页 |
| ·渗透调节在植物耐盐性中的重要作用 | 第15-16页 |
| ·离子区隔化在植物耐盐性中的重要作用 | 第16-17页 |
| ·Na~+／H~+逆向转运蛋白研究进展 | 第17-29页 |
| ·Na~+／H~+逆向转运蛋白的发现、特征及其功能 | 第17-20页 |
| ·Na~+／H~+逆向转运蛋白与植物耐盐性的关系 | 第20-23页 |
| ·Na~+／H~+逆向转运蛋白的分子特征 | 第23-28页 |
| ·Na~+／H~+逆向转运蛋白与其它转运蛋白的关系 | 第28-29页 |
| ·基因克隆的研究 | 第29-38页 |
| ·序列克隆法 | 第29-31页 |
| ·功能克隆法(Functiortal cloning) | 第31-32页 |
| ·定位克隆法(Positional cloning) | 第32-33页 |
| ·表型克隆法(phenotype cloning) | 第33-34页 |
| ·差异表达分析法 | 第34-36页 |
| ·转座子标记法(transposon tagging) | 第36页 |
| ·应用DNA芯片技术筛选新基因 | 第36-38页 |
| ·本研究目的意义及技术路线 | 第38-42页 |
| ·本研究目的竟义 | 第38-40页 |
| ·研究内容 | 第40页 |
| ·预期目标 | 第40-41页 |
| ·技术路线 | 第41-42页 |
| ·存在的问题及展望 | 第42-43页 |
| 2 材料与方法 | 第43-62页 |
| ·实验材料 | 第43-44页 |
| ·本实验所涉及的菌株及质粒 | 第43页 |
| ·植物材料 | 第43页 |
| ·酶及试剂 | 第43-44页 |
| ·实验方法 | 第44-62页 |
| ·细菌的培养和菌种的保存 | 第44页 |
| ·大肠杆菌质粒的提取(碱裂解法) | 第44-45页 |
| ·植物总DNA的提取方法(CTAB法) | 第45页 |
| ·植物总RNA提取 | 第45-47页 |
| ·逆转录反应 | 第47页 |
| ·PCR反应 | 第47-48页 |
| ·DNA片段的快速纯化／回收(参照鼎国产品说明书) | 第48页 |
| ·PCR产物的克隆 | 第48-50页 |
| ·cDNA末端的分离 | 第50-51页 |
| ·5′RACE步骤 | 第51-54页 |
| ·3′RACE步骤 | 第54-56页 |
| ·同位素标记探针的Southern杂交 | 第56-59页 |
| ·同位素标记探针的Northern杂交 | 第59-61页 |
| ·RT-PCR分析Na~+／H~+逆向转运蛋白基因的表达 | 第61-62页 |
| 3 结果与分析 | 第62-90页 |
| ·盐角草Na~+／H~+逆向转运蛋白基因克隆及特性 | 第62-78页 |
| ·盐角草Na~+／H~+逆向转运蛋白同源片断的获得 | 第62-69页 |
| ·盐角草Na~+／H~+逆向转运蛋白全长cDNA的克隆 | 第69-72页 |
| ·盐角草Na~+／H~+逆向转运蛋白和其它Na~+／H~+逆向转运蛋白氨基酸序列的比较 | 第72-77页 |
| ·盐角草Na~+／H~+逆向转运蛋白基因的Southern blotting分析 | 第77页 |
| ·盐角草Na~+／H~+逆向转运蛋白基因表达的RT-PCR分析 | 第77-78页 |
| ·番杏Na~+／H~+逆向转运蛋白基因克隆及特性分析 | 第78-89页 |
| ·番杏Na~+／H~+逆向转运蛋白同源片断的获得 | 第78-82页 |
| ·番杏Na~+／H~+逆向转运蛋白全长cDNA的克隆 | 第82-84页 |
| ·TtNHX1与其它Na~+／H~+逆向转运蛋白氨基酸序列比较 | 第84-87页 |
| ·番杏Na~+／H~+逆向转运蛋白基因的Southern blotting分析 | 第87-88页 |
| ·番杏Na~+／H~+逆向转运蛋白基因表达的Northern blotting分析 | 第88页 |
| ·番杏Na~+／H~+逆向转运蛋白基因表达的RT-PCR分析 | 第88-89页 |
| ·小结 | 第89-90页 |
| ·SeNHX1和TtNHX1基因的比较 | 第89页 |
| ·基因的类型 | 第89页 |
| ·基因的表达特性 | 第89-90页 |
| 4 讨论 | 第90-95页 |
| ·Na~+／H~+逆向转运蛋白基因与植物耐盐基因工程 | 第90-91页 |
| ·实验选材与方法设计 | 第91-92页 |
| ·Na~+／H~+逆向转运蛋白基因的特性 | 第92-93页 |
| ·基因的克隆 | 第92页 |
| ·基因的特性 | 第92-93页 |
| ·存在的问题及展望 | 第93-95页 |
| 5 结论 | 第95-97页 |
| ·盐角草、番杏Na~+／H~+逆向转运蛋白基因的克隆 | 第95页 |
| ·SeNHX1、TtNHX1基因的特性 | 第95-97页 |
| ·SeNHX1、TtNHX1具有高度保守性 | 第95页 |
| ·SeNHX1、TtNHX1是液泡型的Na~+／H~+逆向转运蛋白基因 | 第95-96页 |
| ·SeNHX1、TtNHX1基因拷贝数 | 第96页 |
| ·SeNHX1、TtNHX1基因表达特性 | 第96-97页 |
| 参考文献 | 第97-109页 |
| 致谢 | 第109-110页 |
| 在学期间已发表和待发表的论文及注册的基因 | 第110页 |
