中文摘要 | 第1-10页 |
英文摘要 | 第10-15页 |
前言 | 第15-17页 |
主要材料 | 第17-18页 |
第一部分 新生隐球菌荚膜相关基因CAP64的检测和意义 | 第18-29页 |
前言 | 第18-21页 |
结果 | 第21-25页 |
讨论 | 第25-28页 |
小结 | 第28-29页 |
第二部分 新生隐球菌荚膜相关基因CAP59最大外显子的序列分析和意义 | 第29-53页 |
前言 | 第29页 |
实验步骤和方法 | 第29-32页 |
1 CAP59荚膜缺陷株CAP59基因最大外显子的序列 | 第29页 |
2 CPA59最大外显子序列的PCR扩增 | 第29-30页 |
3 PCR扩增产物装入pCEM~(2)-T载体进行测序 | 第30-32页 |
结果 | 第32-49页 |
讨论 | 第49-51页 |
小结 | 第51-53页 |
第三部分 新生隐球菌CAP59和CAP64荚膜缺陷株ura5-突变株的筛选和鉴定 | 第53-72页 |
引言 | 第53页 |
实验步骤和方法 | 第53-58页 |
一. 基因一步中断方法获取新生隐球菌荚膜缺陷株的ura5-突变株 | 第53-57页 |
1 整合型质粒pTUG418的构建 | 第53-54页 |
2 质粒pCXJU的构建 | 第54-55页 |
3 ura5-突变株的筛选 | 第55页 |
4 ura5-突变株的鉴定 | 第55-57页 |
二. 硫酸二乙酯化学诱变法获得ura5-突变株 | 第57-58页 |
1 ura5-诱变方法 | 第57-58页 |
2 ura5-突变株的筛选 | 第58页 |
3 ura5-突变株的鉴定 | 第58页 |
结果 | 第58-69页 |
讨论 | 第69-71页 |
小结 | 第71-72页 |
第四部分 绿色荧光蛋白GFP基因和荚膜基因融合表达载体的初步构建 | 第72-86页 |
前言 | 第72页 |
实验步骤和方法 | 第72-76页 |
1 新生隐球菌GAL7启动子的PCR扩增 | 第72页 |
2 新生物球菌CAL7启动子的PCR测序鉴定 | 第72页 |
3 GAL7启动子PCR产物的双切 | 第72页 |
4 绿色荧光蛋白GFP的扩增 | 第72-73页 |
5 GFP的PCR产物测序鉴定 | 第73页 |
6 GFP的PCR产物的双切 | 第73-76页 |
结果 | 第76-84页 |
讨论 | 第84-85页 |
小结 | 第85-86页 |
结论 | 第86-87页 |
参考文献 | 第87-91页 |
综述 | 第91-105页 |
博士期间书写论文 | 第105-106页 |
致谢 | 第106页 |