| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要 | 第8-10页 |
| 前言 | 第10-12页 |
| 论文 | 第12-51页 |
| 第一章 盐生杜氏藻D. salina(6-4)光裂合酶基因的克隆 | 第12-36页 |
| 1 材料与方法 | 第12-20页 |
| ·材料 | 第12-13页 |
| ·藻种及菌株 | 第12页 |
| ·试剂 | 第12-13页 |
| ·引物及测序 | 第13页 |
| ·方法 | 第13-20页 |
| ·EST序列的生物信息学分析 | 第13-14页 |
| ·EST序列的引物设计 | 第14页 |
| ·EST序列的克隆 | 第14-18页 |
| ·3’RACE扩增D. salina(6-4)光裂合酶3’端序列 | 第18-20页 |
| ·D. salina(6-4)光裂合酶基因的生物信息学分析 | 第20页 |
| 2 结果与分析 | 第20-28页 |
| ·EST生物信息学的分析 | 第20-22页 |
| ·BLASTn | 第21页 |
| ·BLASTx | 第21-22页 |
| ·EST序列的克隆 | 第22-23页 |
| ·改进的Trizol方法提取总RNA | 第22-23页 |
| ·PCR扩增EST序列 | 第23页 |
| ·3’RACE扩增D. salina(6-4)光裂合酶3’端序列 | 第23-24页 |
| ·D. salina(6-4)光裂合酶基因的生物信息学分析 | 第24-28页 |
| ·BLASTn | 第24-25页 |
| ·BLASTx | 第25-27页 |
| ·读框分析 | 第27-28页 |
| 3 讨论 | 第28-36页 |
| ·EST的生物信息学分析 | 第28页 |
| ·利用改进的Trizol方法提取总RNA | 第28页 |
| ·半巢式RACE法克隆基因 | 第28-30页 |
| ·D. salina(6-4)光裂合酶基因的生物信息学分析 | 第30-36页 |
| ·读框分析 | 第30-31页 |
| ·D. salina(6-4)光裂合酶的保守性分析 | 第31-32页 |
| ·(6-4)光裂合酶系统发育 | 第32-36页 |
| 第二章 D. salina(6-4)光裂合酶基因的功能鉴定 | 第36-51页 |
| 1 材料与方法 | 第36-45页 |
| ·材料 | 第36-38页 |
| ·菌种和载体 | 第36页 |
| ·试剂 | 第36-38页 |
| ·引物及测序 | 第38页 |
| ·方法 | 第38-45页 |
| ·D. salina(6-4)光裂合酶基因在大肠杆菌中的表达 | 第38-44页 |
| ·D. salina(6-4)光裂合酶基因ORF的克隆 | 第38-39页 |
| ·表达载体pGEX-4T-1／6-4的构建 | 第39-42页 |
| ·融合蛋白的诱导表达及SDS-PAGE检测 | 第42-44页 |
| ·D. salina(6-4)光裂合酶基因的功能鉴定 | 第44-45页 |
| 2 结果与分析 | 第45-47页 |
| ·D. salina(6-4)光裂合酶基因ORF的克隆 | 第45页 |
| ·表达载体pGEX-4T-1／6-4的构建 | 第45-46页 |
| ·融合蛋白的诱导表达及SDS-PAGE检测 | 第46页 |
| ·D. salina(6-4)光裂合酶基因的功能鉴定 | 第46-47页 |
| 3 讨论 | 第47-51页 |
| ·表达载体 | 第47-49页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第49-50页 |
| ·D. salina(6-4)光裂合酶基因的功能鉴定 | 第50-51页 |
| 结论 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 综述 光裂合酶的研究进展 | 第53-79页 |
| 1 前言 | 第53页 |
| 2 光裂合酶的分类 | 第53-55页 |
| 3 光裂合酶的三维结构 | 第55-57页 |
| 4 光裂合酶的作用机理 | 第57-65页 |
| ·UV引起的DNA损伤 | 第57-58页 |
| ·CPD光裂合酶的作用机理 | 第58-65页 |
| ·CPD光裂合酶对底物的识别和结合 | 第58-60页 |
| ·底物结构对结合的影响 | 第59-60页 |
| ·酶的氨基酸序列与结合的关系 | 第60页 |
| ·光裂合酶对底物的作用 | 第60-65页 |
| ·催化辅基 | 第61-62页 |
| ·天线辅基 | 第62-63页 |
| ·去辅基酶 | 第63-65页 |
| ·二聚体的裂解 | 第65页 |
| ·(6-4)光裂合酶的作用机理 | 第65页 |
| 5 光裂合酶／蓝光受体家族 | 第65-71页 |
| ·蓝光受体 | 第65-69页 |
| ·蓝光受体的功能 | 第67页 |
| ·蓝光受体C末端的活性 | 第67-68页 |
| ·蓝光受体的作用机制 | 第68-69页 |
| ·光裂合酶／蓝光受体家族的系统发育 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-79页 |
