| 致谢 | 第1-5页 |
| 中文摘要 | 第5-6页 |
| 缩略语 | 第6-11页 |
| 第一章 α干扰素的研究背景 | 第11-21页 |
| ·IFN-α的理化特征 | 第11-12页 |
| ·IFN-α的产生和调节 | 第12-13页 |
| ·IFN-α的功能及其作用机制 | 第13-14页 |
| ·IFN-α的基因工程研究 | 第14页 |
| ·IFN-α的临床应用 | 第14-16页 |
| ·现在临床上使用的干扰素制剂 | 第16-17页 |
| ·本论文的选题依据及研究目标 | 第17-18页 |
| 参考文献: | 第18-21页 |
| 第二章 杆状病毒表达载体系统 | 第21-34页 |
| ·杆状病毒的分类 | 第21页 |
| ·杆状病毒的生活循环 | 第21-22页 |
| ·杆状病毒的基因及其功能 | 第22-23页 |
| ·杆状病毒表达系统的建立及其原理 | 第23-25页 |
| ·杆状病毒载体表达系统的改进 | 第25-26页 |
| ·重组病毒筛选方法的改进 | 第25页 |
| ·提高病毒重组效率方面的改进 | 第25-26页 |
| ·杆状病毒表达载体的改进 | 第26页 |
| ·杆状病毒载体表达系统的特点 | 第26-28页 |
| ·杆状病毒表达系统的优点 | 第26-27页 |
| ·家蚕／BmNPV系统相对于sf细胞／AcNPV系统的优势 | 第27页 |
| ·杆状病毒表达系统存在的缺陷 | 第27-28页 |
| ·BESV表达水平的影响因素 | 第28-29页 |
| ·细胞类型与质量 | 第28页 |
| ·外源蛋白的性质 | 第28页 |
| ·启动子序列的完整性与类型 | 第28页 |
| ·在昆虫细胞内表达与幼虫体内表达 | 第28-29页 |
| ·其它因素 | 第29页 |
| ·结语 | 第29-30页 |
| 参考文献: | 第30-34页 |
| 第三章 重组转移载体的构建 | 第34-46页 |
| ·材料和试剂 | 第34-36页 |
| ·实验方法 | 第36-41页 |
| ·PCR反应模板扩增目的片段 | 第36-37页 |
| ·低熔点胶回收目的片段 | 第37页 |
| ·目的基因与载体的连接反应 | 第37-38页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第38页 |
| ·连接产物转化感受态细胞 | 第38页 |
| ·碱法小批量抽提质粒DNA | 第38-39页 |
| ·重组转移载体pBac-IFNα_(2b)的鉴定 | 第39-40页 |
| ·质粒的大量制备 | 第40-41页 |
| ·大量抽提的质粒DNA的Sepharose 2B柱纯化 | 第41页 |
| ·核酸电泳 | 第41页 |
| ·结果与分析 | 第41-46页 |
| ·人α_(2b)-干扰素基因的序列测定及氨基酸序列分析 | 第41-43页 |
| ·重组转移载体pBac-IFNα_(2b)的构建 | 第43-45页 |
| ·重组转移载体pBac-IFNα_(2b)的双酶切与PCR鉴定 | 第45-46页 |
| 第四章 共转染及重组病毒的筛选与鉴定 | 第46-60页 |
| ·材料和试剂 | 第46-48页 |
| ·实验方法 | 第48-54页 |
| ·细胞培养与冻存 | 第48页 |
| ·病毒培养 | 第48页 |
| ·病毒滴度测定 | 第48页 |
| ·Bm-BacPAK6 DNA的提取及酶切线性化 | 第48-49页 |
| ·重组转移质粒与线性化病毒DNA共转染 | 第49-50页 |
| ·重组病毒的筛选 | 第50页 |
| ·重组病毒的PCR鉴定 | 第50-51页 |
| ·重组病毒的DNA Southern杂交鉴定 | 第51-54页 |
| ·结果与分析 | 第54-60页 |
| ·病毒Bm-BacPAK6 DNA的线性化 | 第54-56页 |
| ·共转染及重组病毒的筛选 | 第56-57页 |
| ·重组病毒的PCR鉴定 | 第57页 |
| ·重组病毒的Southen杂交鉴定 | 第57-58页 |
| ·重组病毒的滴度测定 | 第58-60页 |
| 第五章 重组病毒在家蚕培养细胞和幼虫中表达 | 第60-72页 |
| ·材料和试剂 | 第60-62页 |
| ·实验方法 | 第62-66页 |
| ·人羊膜WISH细胞培养与冻存 | 第62-63页 |
| ·水泡性口炎病毒培养与滴度测定 | 第63页 |
| ·重组病毒在家蚕培养细胞及五龄幼虫、蚕蛹中的表达 | 第63-64页 |
| ·表达产物的生物活性测定 | 第64-65页 |
| ·SDS-PAGE电泳分析 | 第65页 |
| ·表达产物的ELISA检测 | 第65页 |
| ·表达产物的Western blotting分析 | 第65-66页 |
| ·结果分析 | 第66-70页 |
| ·ELISA检测家蚕细胞与家蚕幼虫在不同时段表达人α_(2b)-干扰素 | 第66-68页 |
| ·人干扰素-α_(2b)表达产物的抗病毒活性测定 | 第68页 |
| ·人干扰素-α_(2b)表达产物的SDS-PAGE和Western blotting分析 | 第68-70页 |
| ·讨论 | 第70-71页 |
| 参考文献: | 第71-72页 |
| 第六章 蚕蛹中的表达产物小鼠口服抗急性肝损伤研究 | 第72-76页 |
| ·材料与试剂 | 第72页 |
| ·实验方法 | 第72-73页 |
| ·实验动物分组 | 第72页 |
| ·用药 | 第72页 |
| ·血清中ALT，AST含量测定 | 第72-73页 |
| ·结果与分析 | 第73页 |
| ·讨论 | 第73-75页 |
| 参考文献: | 第75-76页 |
| 结论 | 第76-77页 |
| Abstract | 第77-78页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第78-79页 |
