| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-8页 |
| 文献综述： 植物抗虫基因工程研究进展 | 第8-19页 |
| 1 苏云金芽孢杆菌内源激素蛋白基因 | 第9-11页 |
| 2 植物来源的抗虫基因 | 第11-16页 |
| 2．1 蛋白酶抑制剂基因 | 第11-14页 |
| 2．1．1 豇豆胰蛋白酶抑制剂基因 | 第13页 |
| 2．1．2 马铃薯蛋白酶抑制剂基因 | 第13页 |
| 2．1．3 水稻巯基蛋白酶抑制剂基因 | 第13-14页 |
| 2．2 植物凝集素基因 | 第14-15页 |
| 2．3 淀粉酶抑制剂基因 | 第15页 |
| 2．4 其他植物来源的抗虫基因 | 第15-16页 |
| 3 昆虫来源的抗虫基因 | 第16-17页 |
| 4 预防昆虫产生耐受性的对策 | 第17-19页 |
| 4．1 基因策略 | 第17页 |
| 4．2 启动子调控 | 第17-18页 |
| 4．3 表达水平调控法 | 第18-19页 |
| 引言 | 第19-20页 |
| 材料与方法 | 第20-31页 |
| 材料 | 第20-23页 |
| 方法 | 第23-31页 |
| 1． 豇豆总RNA的提取 | 第23-24页 |
| 2． 总RNA的RT-PCR扩增 | 第24-25页 |
| 3． PCR产物的回收及连接 | 第25页 |
| 4． 大肠杆菌质粒DNA的提取酶切、感受态制备和转化 | 第25-27页 |
| 5． DNA测序及序列分析 | 第27页 |
| 6． 农杆菌LBA4404感受态细胞的制备、转化及质粒的提取 | 第27页 |
| 7． 芥菜高频再生体系的建立 | 第27-28页 |
| 8． 芥菜外植体的遗传转化 | 第28页 |
| 9． 再生苗总DNA的提取 | 第28-29页 |
| 10． PCR-Southern杂交 | 第29-30页 |
| 11． 转基因植株的抗虫试验 | 第30-31页 |
| 结果与分析 | 第31-44页 |
| 1 豇豆胰蛋白酶抑制剂基因的分离克隆 | 第31-32页 |
| 1．1 总RNA的提取 | 第31页 |
| 1．2 PCR产物的克隆 | 第31-32页 |
| 2 CpTI克隆片段的序列测定及分析 | 第32-35页 |
| 3 CpTI基因片段的中间克隆载体及表达载体的构建和对农杆菌的转化 | 第35-37页 |
| 3．1 中间克隆载体的构建 | 第35-36页 |
| 3．2 表达载体的构建 | 第36页 |
| 3．3 CpTI表达载体对农杆菌的转化 | 第36-37页 |
| 4 芥菜再生体系的建立及其遗传转化 | 第37-41页 |
| 4．1 不同BA和NAA配比对外植体再生的影响 | 第37-38页 |
| 4．2 芥菜离体高频再生体系的建立 | 第38页 |
| 4．3 选择压的确定 | 第38-39页 |
| 4．4 抗生素对芥菜外植体分化的影响 | 第39-40页 |
| 4．5 预培养时间对芥菜外植体转化及再生的影响 | 第40-41页 |
| 4．6 浸菌时间对芥菜外植体转化及再生的影响 | 第41页 |
| 4．7 转基因芥菜抗性植株的获得 | 第41页 |
| 5 转基因芥菜植株的鉴定 | 第41-44页 |
| 5．1 PCR扩增 | 第41-42页 |
| 5．2 PCR-Southern | 第42-43页 |
| 5．3 抗虫性鉴定 | 第43-44页 |
| 讨论 | 第44-48页 |
| 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 发表论文 | 第55-56页 |
| 英文缩写 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 附图 | 第58-65页 |
