| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-23页 |
| ·细菌外膜微孔蛋白的结构及其生物学特性 | 第13-21页 |
| ·微孔蛋白(porin)的结构 | 第13-15页 |
| ·porin通道功能 | 第15-16页 |
| ·porin与宿主细胞凋亡 | 第16页 |
| ·porin信号传导作用 | 第16-17页 |
| ·porin表达的调控 | 第17-19页 |
| ·porin在抗生素耐药方面的应用 | 第19页 |
| ·porin与细菌致病性的关系 | 第19-20页 |
| ·porin与宿主细胞的免疫作用 | 第20-21页 |
| ·幽门螺杆菌微孔蛋白 | 第21页 |
| ·本研究的内容及技术路线 | 第21-23页 |
| ·研究内容 | 第21页 |
| ·技术路线 | 第21-23页 |
| 第二章 hopX基因克隆及序列分析 | 第23-31页 |
| ·材料 | 第23-24页 |
| ·数据来源 | 第23页 |
| ·菌种和载体 | 第23页 |
| ·工具酶及试剂盒 | 第23页 |
| ·主要溶液 | 第23-24页 |
| ·主要仪器 | 第24页 |
| ·方法 | 第24-27页 |
| ·Hp染色体DNA的提取 | 第24页 |
| ·目的基因的扩增 | 第24-25页 |
| ·目的基因T-A克隆和测序 | 第25-26页 |
| ·HopX化学特征分析及抗原性预测 | 第26-27页 |
| ·结果 | 第27-29页 |
| ·hopX基因的序列特征 | 第27页 |
| ·氨基酸序列的同源性比较 | 第27-28页 |
| ·hopX编码多肽抗原性分析 | 第28-29页 |
| ·讨论 | 第29-31页 |
| 第三章 hopX基因在大肠杆菌中的表达纯化及抗体的制备 | 第31-41页 |
| ·材料 | 第31-33页 |
| ·一般材料 | 第31页 |
| ·其它试剂 | 第31页 |
| ·主要仪器 | 第31页 |
| ·主要溶液 | 第31-33页 |
| ·方法 | 第33-37页 |
| ·重组表达质粒的构建和鉴定 | 第33-34页 |
| ·融合蛋白的表达 | 第34页 |
| ·Western blot分析 | 第34-35页 |
| ·目的蛋白的纯化和复性 | 第35-36页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第36页 |
| ·ELISA检测抗血清的效价 | 第36-37页 |
| ·结果 | 第37-39页 |
| ·hopX基因的T-A克隆 | 第37页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第37-38页 |
| ·重组蛋白在E.Coil中的表达及Western blot鉴定 | 第38-39页 |
| ·目的蛋白的回收 | 第39页 |
| ·抗血清效价的测定 | 第39页 |
| ·讨论 | 第39-41页 |
| 第四章 幽门螺杆菌微孔蛋白HopX依赖MAPK通路诱导SGC7901细胞分泌IL-8 | 第41-49页 |
| ·材料 | 第42页 |
| ·细胞系和培养基 | 第42页 |
| ·试剂 | 第42页 |
| ·主要仪器 | 第42页 |
| ·方法 | 第42-44页 |
| ·人胃癌细胞株SGC7901的培养 | 第42页 |
| ·ELISA法检测HopX诱导SGC7901细胞分泌IL-8的影响 | 第42页 |
| ·RNA的提取 | 第42-43页 |
| ·MAPK信号通路的相关性 | 第43页 |
| ·RT-PCR检测IL-8mRNA的表达 | 第43页 |
| ·标准曲线的绘制及荧光定量 | 第43页 |
| ·实验数据分析 | 第43-44页 |
| ·实验结果 | 第44-46页 |
| ·HopX诱导SGC7901细胞分泌IL-8 ELISA结果 | 第44页 |
| ·RT-PCR检测HopX诱导SGC7901表达IL-8mRNA的水平 | 第44-46页 |
| ·PD-98059作用后HopX诱导SGC7901 IL-8mRNA的表达水平 | 第46页 |
| ·讨论 | 第46-49页 |
| 第五章 HopX对胃癌细胞增殖与凋亡的影响 | 第49-55页 |
| ·材料 | 第49页 |
| ·细胞系和培养基 | 第49页 |
| ·试剂 | 第49页 |
| ·主要仪器 | 第49页 |
| ·方法 | 第49-51页 |
| ·细胞培养 | 第49-50页 |
| ·细胞计数和形态观察 | 第50页 |
| ·MTT法测定nopX对细胞增殖的影响 | 第50页 |
| ·细胞周期和DNA倍体分析 | 第50页 |
| ·DNA琼脂糖凝胶电泳 | 第50页 |
| ·Hoechest33258荧光染色检测细胞凋亡 | 第50-51页 |
| ·结果 | 第51-53页 |
| ·HopX对SGC7901细胞活力的影响 | 第51页 |
| ·MTT法检测HopX对SGC7901细胞增殖的影响 | 第51-52页 |
| ·细胞形态学观察 | 第52页 |
| ·流式细胞仪分析细胞周期及DNA倍体 | 第52页 |
| ·DNA琼脂糖凝胶电泳检测结果 | 第52-53页 |
| ·讨论 | 第53-55页 |
| 第六章 结论与展望 | 第55-56页 |
| ·主要结论 | 第55页 |
| ·展望 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-64页 |
| 硕士期间发表的论文 | 第64页 |
