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大鼠C6胶质瘤细胞系中肿瘤干细胞样细胞的鉴定及其生物学特性的研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-12页
第1章 前言第12-14页
第2章 材料和方法第14-30页
   ·实验材料第14-19页
     ·实验细胞与动物第14页
     ·实验器材第14-15页
     ·实验试剂第15-16页
     ·实验用液体的配制第16-19页
       ·细胞培养中的主要试剂配方第16-17页
       ·Western-blot实验中常用试剂第17-18页
       ·细胞免疫荧光常用试剂第18-19页
       ·组织切片以及细胞免疫组织化学常用试剂第19页
   ·实验方法第19-30页
     ·无血清培养获得C6悬浮克隆球第19-20页
     ·有限稀释法制成单细胞悬液和单细胞自我更新能力分析第20页
     ·免疫荧光检测血清诱导后培养细胞中分化抗原的表达第20-21页
     ·裸鼠皮下种植检测致瘤能力第21-22页
     ·组织切片免疫组织化学检测第22-23页
     ·种植瘤细胞的体外培养第23页
     ·C6细胞在含血清和无血清培养基中交替培养第23页
     ·流式细胞仪检测CD133与GFAP的表达第23-24页
     ·免疫荧光法检测抗原共表达第24页
     ·免疫磁珠分选CD133阳性细胞第24-25页
     ·Western Blot法检测CD133分选纯度第25-27页
     ·免疫荧光及免疫组化检测CD133分选纯度第27-28页
     ·BrdUrd染色检测增殖能力第28页
     ·Hoechst 33342染料孵育实验第28-29页
     ·免疫荧光检测ABCG2的表达第29页
     ·统计学分析第29-30页
第3章 结果第30-44页
   ·大部分C6细胞具有肿瘤干细胞的特性第30-32页
     ·C6细胞具有自我更新能力第30页
     ·C6细胞具有多潜能分化能力第30-31页
     ·血清培养基中的C6细胞具有去分化的趋势第31页
     ·C6细胞具有体内致瘤能力第31页
     ·裸鼠种植瘤细胞具有与母代C6细胞相似的生物学特性第31-32页
   ·C6细胞可以稳定地在两种培养基间转换生长方式第32-33页
     ·C6细胞生长方式随着培养基改变而转换第32页
     ·无血清中的C6悬浮克隆球具有较高的肿瘤干细胞比例第32-33页
   ·CD133阴性C6细胞亚群中亦存在肿瘤干细胞样细胞第33-34页
     ·免疫荧光与Western Blot鉴定磁珠分选后的细胞纯度第33页
     ·部分CD133阴性细胞具有肿瘤干细胞的特性第33-34页
   ·HOECHST 33342染色对C6细胞具有毒性作用第34-44页
第4章 讨论第44-51页
   ·脑肿瘤干细胞是胶质瘤发生与复发的根源第44-45页
   ·大鼠C6胶质瘤细胞系中存在肿瘤干细胞样细胞第45-46页
   ·需要寻找更为全面而可靠的脑肿瘤干细胞鉴定方法第46-51页
结论第51-52页
参考文献第52-55页
综述第55-71页
致谢第71页

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