摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-12页 |
第1章 前言 | 第12-14页 |
第2章 材料和方法 | 第14-30页 |
·实验材料 | 第14-19页 |
·实验细胞与动物 | 第14页 |
·实验器材 | 第14-15页 |
·实验试剂 | 第15-16页 |
·实验用液体的配制 | 第16-19页 |
·细胞培养中的主要试剂配方 | 第16-17页 |
·Western-blot实验中常用试剂 | 第17-18页 |
·细胞免疫荧光常用试剂 | 第18-19页 |
·组织切片以及细胞免疫组织化学常用试剂 | 第19页 |
·实验方法 | 第19-30页 |
·无血清培养获得C6悬浮克隆球 | 第19-20页 |
·有限稀释法制成单细胞悬液和单细胞自我更新能力分析 | 第20页 |
·免疫荧光检测血清诱导后培养细胞中分化抗原的表达 | 第20-21页 |
·裸鼠皮下种植检测致瘤能力 | 第21-22页 |
·组织切片免疫组织化学检测 | 第22-23页 |
·种植瘤细胞的体外培养 | 第23页 |
·C6细胞在含血清和无血清培养基中交替培养 | 第23页 |
·流式细胞仪检测CD133与GFAP的表达 | 第23-24页 |
·免疫荧光法检测抗原共表达 | 第24页 |
·免疫磁珠分选CD133阳性细胞 | 第24-25页 |
·Western Blot法检测CD133分选纯度 | 第25-27页 |
·免疫荧光及免疫组化检测CD133分选纯度 | 第27-28页 |
·BrdUrd染色检测增殖能力 | 第28页 |
·Hoechst 33342染料孵育实验 | 第28-29页 |
·免疫荧光检测ABCG2的表达 | 第29页 |
·统计学分析 | 第29-30页 |
第3章 结果 | 第30-44页 |
·大部分C6细胞具有肿瘤干细胞的特性 | 第30-32页 |
·C6细胞具有自我更新能力 | 第30页 |
·C6细胞具有多潜能分化能力 | 第30-31页 |
·血清培养基中的C6细胞具有去分化的趋势 | 第31页 |
·C6细胞具有体内致瘤能力 | 第31页 |
·裸鼠种植瘤细胞具有与母代C6细胞相似的生物学特性 | 第31-32页 |
·C6细胞可以稳定地在两种培养基间转换生长方式 | 第32-33页 |
·C6细胞生长方式随着培养基改变而转换 | 第32页 |
·无血清中的C6悬浮克隆球具有较高的肿瘤干细胞比例 | 第32-33页 |
·CD133阴性C6细胞亚群中亦存在肿瘤干细胞样细胞 | 第33-34页 |
·免疫荧光与Western Blot鉴定磁珠分选后的细胞纯度 | 第33页 |
·部分CD133阴性细胞具有肿瘤干细胞的特性 | 第33-34页 |
·HOECHST 33342染色对C6细胞具有毒性作用 | 第34-44页 |
第4章 讨论 | 第44-51页 |
·脑肿瘤干细胞是胶质瘤发生与复发的根源 | 第44-45页 |
·大鼠C6胶质瘤细胞系中存在肿瘤干细胞样细胞 | 第45-46页 |
·需要寻找更为全面而可靠的脑肿瘤干细胞鉴定方法 | 第46-51页 |
结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-55页 |
综述 | 第55-71页 |
致谢 | 第71页 |