中文摘要 | 第1-6页 |
英文摘要 | 第6-13页 |
1. 引言 | 第13-25页 |
·实蝇检测方法研究进展 | 第14-18页 |
·形态学检疫鉴定及弊端 | 第14-16页 |
·分子生物学检疫鉴定方法研究进展 | 第16-18页 |
·基因芯片技术及其在实蝇研究中的应用 | 第18-23页 |
·基因芯片概述 | 第18-20页 |
·基因芯片的制备 | 第20-22页 |
·合成后加样 | 第20-21页 |
·原位合成法 | 第21-22页 |
·基因芯片的使用 | 第22-23页 |
·靶基因的标记 | 第22页 |
·分子杂交 | 第22-23页 |
·信号检测 | 第23页 |
·研究目的、意义及创新之处 | 第23页 |
·本研究技术路线 | 第23-25页 |
2. 地中海实蝇及其近缘种和桔小实蝇复合种基因芯片的制备 | 第25-33页 |
·材料 | 第25-26页 |
·仪器设备 | 第25页 |
·主要试剂 | 第25-26页 |
·方法 | 第26页 |
·引物的设计与合成 | 第26页 |
·探针的设计与合成 | 第26页 |
·芯片制备 | 第26页 |
·结果与分析 | 第26-31页 |
·实蝇基因芯片通用引物 | 第26-27页 |
·实蝇基因芯片探针 | 第27-29页 |
·质控探针 | 第27页 |
·检测探针 | 第27-29页 |
·地中海实蝇及其近缘种检测探针 | 第28页 |
·桔小实蝇复合种检测探针 | 第28-29页 |
·基因芯片的阵列设计 | 第29-31页 |
·地中海实蝇及其近缘种基因芯片探针阵列设计 | 第29-30页 |
·桔小实蝇复合种基因芯片探针阵列设计 | 第30-31页 |
·讨论 | 第31-33页 |
·引物和探针的设计 | 第31-32页 |
·基因芯片的设计 | 第32-33页 |
3. 实蝇基因芯片杂交体系的建立 | 第33-40页 |
·材料 | 第33-34页 |
·标本 | 第33页 |
·仪器设备 | 第33页 |
·试剂 | 第33-34页 |
·PCR反应试剂 | 第33页 |
·芯片杂交试剂 | 第33-34页 |
·方法 | 第34-36页 |
·实蝇芯片杂交实验 | 第34-35页 |
·靶基因片段荧光标记PCR扩增 | 第34页 |
·分子杂交 | 第34-35页 |
·杂交结果检测分析 | 第35页 |
·杂交体系的优化 | 第35-36页 |
·基因芯片杂交体系模板DNA灵敏度的筛选 | 第35页 |
·基因芯片杂交时间的筛选 | 第35页 |
·基因芯片杂交液的筛选 | 第35-36页 |
·基因芯片杂交温度的筛选 | 第36页 |
·结果与分析 | 第36-38页 |
·基因芯片杂交体系模板DNA灵敏度的筛选 | 第36页 |
·基因芯片杂交时间的筛选 | 第36-37页 |
·基因芯片杂交液的筛选 | 第37页 |
·基因芯片杂交温度的筛选 | 第37-38页 |
·讨论 | 第38-40页 |
4. 地中海实蝇及其近缘种和桔小实蝇复合种基因芯片的初步应用 | 第40-49页 |
·材料 | 第40-41页 |
·标本 | 第40页 |
·仪器设备 | 第40-41页 |
·试剂 | 第41页 |
·Dneasy Tissue Kit DNA提取试剂 | 第41页 |
·凝胶电泳试剂 | 第41页 |
·PCR反应试剂 | 第41页 |
·芯片杂交试剂 | 第41页 |
·方法 | 第41-42页 |
·实蝇DNA Dneasy Tissue Kit提取方法 | 第41页 |
·实蝇模板DNA质量检测 | 第41-42页 |
·实蝇芯片杂交实验 | 第42页 |
·实蝇芯片特异性检测 | 第42页 |
·地中海实蝇及其近缘种芯片特异性检测 | 第42页 |
·桔小实蝇复合种芯片特异性检测 | 第42页 |
·结果与分析 | 第42-46页 |
·实蝇模板DNA质量检测结果 | 第42-43页 |
·靶基因片段荧光标记PCR扩增 | 第43-44页 |
·实蝇芯片特异性检测 | 第44-46页 |
·地中海实蝇及其近缘种芯片特异性检测 | 第44-45页 |
·桔小实蝇复合种芯片特异性检测 | 第45-46页 |
·讨论 | 第46-49页 |
结语 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-58页 |
附录一 本文缩写词及中英文对照 | 第58-60页 |
附录二 地中海实蝇及其近缘种生物芯片检测信号比较 | 第60-68页 |
附录三 桔小实蝇复合种生物芯片检测信号比较 | 第68-74页 |
附录四 | 第74-75页 |
致谢 | 第75-76页 |