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肝素修饰物对αIIbβ3整合素介导的黑色素瘤细胞与血小板相互作用的影响

中文摘要第1-5页
英文摘要第5-8页
第一部分 前言第8-25页
 一 研究背景第8-23页
  (一) 肿瘤的转移第8-9页
  (二) 黏附分子与肿瘤转移第9-10页
  (三) 整合素与肿瘤转移第10-19页
  (四) 肝素与肿瘤转移第19-23页
 二 本论文研究的内容及意义第23-25页
第二部分 实验材料与方法第25-34页
 一 实验材料第25-26页
  (一) 细胞系与小鼠第25页
  (二) 蛋白质和抗体第25页
  (三) 试剂第25-26页
  (四) 质粒第26页
 二 实验方法第26-34页
  (一) 细胞培养第26页
  (二) 质粒的大量制备第26-28页
  (三) 建立稳定表达整合素 CHO 细胞株第28-29页
  (四) 免疫荧光检测第29页
  (五) 建立稳定表达绿色荧光蛋白的 GFP-A375 和 GFP-816F10 细胞株第29-30页
  (六) 流式细胞仪检测细胞表面分子第30页
  (七) 静止粘附实验第30-31页
  (八) 肿瘤细胞的酶处理第31页
  (九) 血小板的固定第31-32页
  (十) 体外模拟毛细血管的层流实验第32页
  (十一) 血小板和肿瘤细胞在体内三维体系相互作用实时观察的实验第32-34页
第三部分 实验结果与分析第34-47页
 一 血小板整合素αIIbβ3介导了A375 细胞与血小板的相互作用第34-35页
 二 稳定表达αIIbβ3整合素的CHO细胞株的(GP-CHO)的建立第35-36页
 三 在静止条件下 A375 细胞与 GP-CHO 细胞间的相互作用第36-39页
 四 在静止粘附条件下对具有抑制粘附活性的化学修饰肝素的筛选第39-40页
 五 化学修饰肝素抑制 A375 细胞在层流条件下与 GP-CHO 细胞的粘附第40-41页
 六 固定的血小板支持 A375 细胞在层流条件下的细胞粘附第41-43页
 七 化学修饰肝素抑制 A375 细胞在层流条件下与血小板的粘附第43-44页
 八 肿瘤细胞与血小板在体内肺部血管中的相互作用能够被肝素及肝素修饰物所抑制第44-47页
第四部分 讨论第47-51页
 一 血小板整合素α_(IIb) β_3 介导了A375 细胞与血小板的相互作用及这种相互作用的特异性第47页
 二 肿瘤细胞表面的硫酸乙酰肝素蛋白聚糖在肿瘤转移过程中的作用第47-48页
 三 肝素修饰物抑制α_(IIb) β_3 整合素介导的肿瘤细胞与血小板间相互作用的能机制第48-49页
 四 化学修饰肝素在预防肿瘤转移临床实践中的应用前景第49-51页
主要结论第51-52页
主要创新点第52-53页
参考文献第53-61页
附录第61-62页
致谢第62页

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