中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-8页 |
第一部分 前言 | 第8-25页 |
一 研究背景 | 第8-23页 |
(一) 肿瘤的转移 | 第8-9页 |
(二) 黏附分子与肿瘤转移 | 第9-10页 |
(三) 整合素与肿瘤转移 | 第10-19页 |
(四) 肝素与肿瘤转移 | 第19-23页 |
二 本论文研究的内容及意义 | 第23-25页 |
第二部分 实验材料与方法 | 第25-34页 |
一 实验材料 | 第25-26页 |
(一) 细胞系与小鼠 | 第25页 |
(二) 蛋白质和抗体 | 第25页 |
(三) 试剂 | 第25-26页 |
(四) 质粒 | 第26页 |
二 实验方法 | 第26-34页 |
(一) 细胞培养 | 第26页 |
(二) 质粒的大量制备 | 第26-28页 |
(三) 建立稳定表达整合素 CHO 细胞株 | 第28-29页 |
(四) 免疫荧光检测 | 第29页 |
(五) 建立稳定表达绿色荧光蛋白的 GFP-A375 和 GFP-816F10 细胞株 | 第29-30页 |
(六) 流式细胞仪检测细胞表面分子 | 第30页 |
(七) 静止粘附实验 | 第30-31页 |
(八) 肿瘤细胞的酶处理 | 第31页 |
(九) 血小板的固定 | 第31-32页 |
(十) 体外模拟毛细血管的层流实验 | 第32页 |
(十一) 血小板和肿瘤细胞在体内三维体系相互作用实时观察的实验 | 第32-34页 |
第三部分 实验结果与分析 | 第34-47页 |
一 血小板整合素αIIbβ3介导了A375 细胞与血小板的相互作用 | 第34-35页 |
二 稳定表达αIIbβ3整合素的CHO细胞株的(GP-CHO)的建立 | 第35-36页 |
三 在静止条件下 A375 细胞与 GP-CHO 细胞间的相互作用 | 第36-39页 |
四 在静止粘附条件下对具有抑制粘附活性的化学修饰肝素的筛选 | 第39-40页 |
五 化学修饰肝素抑制 A375 细胞在层流条件下与 GP-CHO 细胞的粘附 | 第40-41页 |
六 固定的血小板支持 A375 细胞在层流条件下的细胞粘附 | 第41-43页 |
七 化学修饰肝素抑制 A375 细胞在层流条件下与血小板的粘附 | 第43-44页 |
八 肿瘤细胞与血小板在体内肺部血管中的相互作用能够被肝素及肝素修饰物所抑制 | 第44-47页 |
第四部分 讨论 | 第47-51页 |
一 血小板整合素α_(IIb) β_3 介导了A375 细胞与血小板的相互作用及这种相互作用的特异性 | 第47页 |
二 肿瘤细胞表面的硫酸乙酰肝素蛋白聚糖在肿瘤转移过程中的作用 | 第47-48页 |
三 肝素修饰物抑制α_(IIb) β_3 整合素介导的肿瘤细胞与血小板间相互作用的能机制 | 第48-49页 |
四 化学修饰肝素在预防肿瘤转移临床实践中的应用前景 | 第49-51页 |
主要结论 | 第51-52页 |
主要创新点 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-61页 |
附录 | 第61-62页 |
致谢 | 第62页 |