| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-47页 |
| 1 DNA损伤修复 | 第13-22页 |
| ·细胞内主要的DNA损伤修复途径 | 第13-15页 |
| ·DNA双链断裂的损伤修复 | 第15-20页 |
| ·引起DNA双链断裂的原因 | 第15-16页 |
| ·DNA双链断裂的修复方式 | 第16-20页 |
| ·同源重组(homologous recombination) | 第17-18页 |
| ·非同源重组 | 第18-19页 |
| ·同源重组与非同源末端连接的比较 | 第19-20页 |
| ·修复通路间的相互作用 | 第20-21页 |
| ·DNA损伤修复与肿瘤的关系 | 第21-22页 |
| 2 大规模蛋白质相互作用研究方法 | 第22-28页 |
| ·酵母双杂交 | 第22-23页 |
| ·噬菌体展示 | 第23-25页 |
| ·蛋白质芯片 | 第25页 |
| ·串联亲和纯化技术 | 第25-26页 |
| ·基于质谱的稳定同位素标记技术 | 第26-27页 |
| ·基于生物信息学的分析方法 | 第27-28页 |
| 3 本论文的选题目的及意义 | 第28-31页 |
| 参考文献 | 第31-47页 |
| 第二章 蛋白质组学解析H2AX相关的蛋白相互作用复合物的研究 | 第47-106页 |
| 1 引言 | 第47-48页 |
| 2 实验部分 | 第48-55页 |
| ·化学试剂、细胞及抗体 | 第48-49页 |
| ·稳定细胞株的构建 | 第49页 |
| ·稳定细胞株的鉴定 | 第49-50页 |
| ·细胞培养、体内标记及实验分组 | 第50页 |
| ·蛋白提取和蛋白复合物的纯化 | 第50-51页 |
| ·SDS-PAGE考染及胶内酶解、提肽 | 第51页 |
| ·酶解肽段的液相色谱分离 | 第51-52页 |
| ·数据库搜索和蛋白鉴定 | 第52页 |
| ·免疫印迹 | 第52-53页 |
| ·激光共聚焦显微镜扫描 | 第53页 |
| ·博来霉素刺激实验 | 第53-54页 |
| ·肝癌动物模型的建立 | 第54页 |
| ·免疫组织化学染色 | 第54-55页 |
| 3 结果与讨论 | 第55-94页 |
| ·稳定细胞株的构建 | 第55-58页 |
| ·稳定同位素标记的双标签鉴定策略 | 第58-60页 |
| ·7701细胞中H2AX相互作用复合物的蛋白质组分析 | 第60-70页 |
| ·H2AX相互作用复合物的差异表达蛋白组分鉴定和定量分析 | 第60页 |
| ·7701细胞中定量鉴定到的H2AX蛋白复合物的验证 | 第60-63页 |
| ·7701细胞中H2AX相互作用复合物的蛋白表达分析 | 第61-62页 |
| ·7701细胞中H2AX相互作用复合物的细胞定位研究 | 第62-63页 |
| ·7701细胞鉴定到的H2AX蛋白复合物的功能分类 | 第63-69页 |
| ·7701细胞H2AX蛋白复合物的功能研究 | 第69-70页 |
| ·7703细胞中H2AX相互作用复合物的蛋白质组分析 | 第70-84页 |
| ·H2AX相互作用复合物的差异表达蛋白组分鉴定和定量分析 | 第70页 |
| ·7703细胞中定量鉴定到的H2AX蛋白复合物的验证 | 第70-74页 |
| ·7703细胞中H2AX相互作用复合物的蛋白表达分析 | 第70-72页 |
| ·7703细胞中H2AX相互作用复合物的细胞定位研究 | 第72-74页 |
| ·7703细胞内H2AX蛋白复合物的功能分类 | 第74-83页 |
| ·7703细胞H2AX蛋白复合物的功能研究 | 第83-84页 |
| ·比较H2AX相百作用复合物在7701细胞和7703细胞中的表达变化 | 第84-90页 |
| ·H2AX相互作用复合物在tag—7701/tag—7703混合组的表达和定量分析 | 第84-85页 |
| ·验证H2AX相互作用复合物在正常细胞与肝癌细胞的结合情况 | 第85-86页 |
| ·比较H2AX相瓦作用复合物在正常细胞与肝癌细胞的功能分类情况 | 第86-87页 |
| ·动物模型病理免疫组化揭示部分相互作用蛋白与肝癌发生发展的关系 | 第87-90页 |
| ·H2AX相互作用的蛋白功能解析 | 第90-94页 |
| ·PARP-1 | 第90-91页 |
| ·KU70 | 第91页 |
| ·HSP60 | 第91-92页 |
| ·PCNA | 第92页 |
| ·14-3-3 zeta | 第92-93页 |
| ·CFL | 第93-94页 |
| ·VCP | 第94页 |
| 4 结论 | 第94-95页 |
| 参考文献 | 第95-106页 |
| 第三章 蛋白质组学解析RAD52相关的蛋白相瓦作用复合物的研究 | 第106-136页 |
| 1 引言 | 第106-107页 |
| 2 实验部分 | 第107-111页 |
| ·化学试剂、抗体和仪器 | 第107-108页 |
| ·稳定细胞系的构建 | 第108页 |
| ·稳定细胞系的鉴定 | 第108页 |
| ·细胞培养、体内标记及实验分组 | 第108-109页 |
| ·蛋白提取和RAD52蛋白复合物的纯化 | 第109页 |
| ·SDS-PAGE考染的胶内酶解 | 第109-110页 |
| ·酶解肽段的液相色谱分离 | 第110页 |
| ·数据库搜索和蛋白鉴定 | 第110-111页 |
| 3 结果与讨论 | 第111-130页 |
| ·稳定细胞株的构建 | 第111-112页 |
| ·稳定同位素标记的双标签鉴定策略 | 第112-114页 |
| ·RAD52相互作用复合物的差异表达蛋白组分鉴定和定量分析 | 第114-115页 |
| ·RAD52蛋白复合物的功能分类 | 第115-130页 |
| ·RAD52相互作用复合物在正常细胞7701的功能分类 | 第116-121页 |
| ·RAD52相互作用复合物在肝癌细胞7703的功能分类 | 第121-129页 |
| ·比较RAD52相互作用复合物在正常细胞与肝癌细胞的功能分类情况 | 第129-130页 |
| 4 结论与展望 | 第130-131页 |
| 参考文献 | 第131-136页 |
| 致谢 | 第136-137页 |
