| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-19页 |
| 一 植物铁营养研究概述及缺铁胁迫机理 | 第8-10页 |
| 二 NRAMP基因家族概述及研究进展 | 第10-17页 |
| 1 各种植物中Nramp基因家族成员的发现 | 第11-12页 |
| 2 植物Nramp基因家族的同源性及序列分析 | 第12-13页 |
| 3 利用酵母功能互补进行功能鉴定: | 第13-14页 |
| 4 NRAMP在植物中的表达模式和调控 | 第14-16页 |
| 5 Nramp编码蛋白的亚细胞及组织定位 | 第16-17页 |
| 三 本实验的研究背景、内容 | 第17-19页 |
| 1 研究背景 | 第17-18页 |
| 2 本实验研究内容 | 第18-19页 |
| 第二章 实验材料、试剂及方法 | 第19-21页 |
| 一 实验材料与试剂 | 第19页 |
| 二 实验仪器 | 第19页 |
| 三 实验方法 | 第19-21页 |
| 第三章 结果分析与讨论 | 第21-58页 |
| 一 缺铁5天OSNRAMP1基因的实时定量PCR | 第21页 |
| 二 水稻缺铁高效表达基因OSNRAMP1序列分析 | 第21-23页 |
| 三 瞬时表达载体P35S::OSNRAMP1-GFP的构建 | 第23-25页 |
| 四 农杆菌介导的叶盘法转化烟草 | 第25-27页 |
| 五 T1代及T2代转基因烟草的培育、筛选与分子生物学鉴定 | 第27-29页 |
| 六 转基因烟草的表型观察 | 第29-35页 |
| 1 根部表型观察 | 第29-31页 |
| 2 光合作用指标的分析 | 第31-32页 |
| 3 转基因烟草的植株及种子铁含量分析 | 第32-35页 |
| 七 转基因BY-2的转化与培养 | 第35页 |
| 八 利用转基因BY-2进行离子的非损伤检测 | 第35-44页 |
| 1.不同铁处理条件下Ca~(2+)的流动检测 | 第36-38页 |
| 2.不同铁处理条件下Cd~(2+)的流动检测 | 第38-41页 |
| 3.不同铁处理条件下H~+的流动检测 | 第41-44页 |
| 九 转基因BY-2中OSNRAMP1的定位观察与动态分析 | 第44-50页 |
| 1.运用生物信息学预测OSNRAMP1的亚细胞定位 | 第44-45页 |
| 2.利用GFP绿色荧光融合蛋白对OSNRAMP1进行定位 | 第45-46页 |
| 3.利用GFP及特异性生物染料对OSNRAMP1进行定位 | 第46-50页 |
| 十 转基因BY-2的膜蛋白的提取 | 第50-51页 |
| 1.转基因BY-2全蛋白的提取和杂交 | 第50-51页 |
| 2.转基因BY-2膜蛋白的提取和杂交 | 第51页 |
| 十一 细菌表达载体的构建及转化 | 第51-54页 |
| 十二 细菌膜蛋白的提取、纯化及WESTERN-BLOTTING | 第54-55页 |
| 1.细菌全蛋白的提取和杂交 | 第54-55页 |
| 2.细菌表达OSNRAMP1膜蛋白的提取和纯化 | 第55页 |
| 十三 讨论 | 第55-58页 |
| 第四章 小结与展望 | 第58-61页 |
| 一 小结 | 第58页 |
| 二 展望 | 第58-61页 |
| 参考文献 | 第61-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
