| 缩略词表 | 第1-9页 |
| 摘要 | 第9-12页 |
| ABSTRACT | 第12-16页 |
| 第一章 引言 | 第16-20页 |
| ·流感疫苗 | 第16页 |
| ·现有的流感疫苗生产系统 | 第16-17页 |
| ·糖基化在蛋白质折叠中的作用 | 第17-18页 |
| ·糖基化对抗原免疫原性的影响 | 第18-19页 |
| ·α-1,6 甘露糖转移酶基因缺陷的毕赤酵母菌在疫苗上的应用前景 | 第19-20页 |
| 第二章 实验材料 | 第20-25页 |
| ·菌株、质粒 | 第20页 |
| ·工具酶、抗体及分子量标准 | 第20页 |
| ·主要试剂及试剂盒 | 第20-21页 |
| ·主要仪器 | 第21页 |
| ·主要培养基 | 第21-22页 |
| ·主要溶液 | 第22-24页 |
| ·实验动物 | 第24-25页 |
| 第三章 实验方法 | 第25-35页 |
| ·引物的设计 | 第25页 |
| ·目的基因的克隆 | 第25-26页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第26-29页 |
| ·重组酵母表达载体pPIC9-NA 的构建 | 第26-28页 |
| ·重组大肠表达载体pET226-NA 的构建 | 第28-29页 |
| ·重组表达菌株的构建 | 第29-31页 |
| ·重组酵母表达菌株的构建 | 第29-31页 |
| ·重组大肠杆菌表达菌株的构建 | 第31页 |
| ·重组表达菌株的培养 | 第31页 |
| ·重组酵母表达菌株的培养 | 第31页 |
| ·重组大肠杆菌表达菌株的培养 | 第31页 |
| ·NA 重组蛋白的纯化 | 第31-33页 |
| ·酵母菌表达的NA 重组蛋白的纯化 | 第31-32页 |
| ·大肠杆菌表达的重组蛋白NA 的纯化 | 第32-33页 |
| ·重组蛋白NA 的PNGASE F 酶切分析 | 第33页 |
| ·重组蛋白NA 的浓度测定 | 第33页 |
| ·重组蛋白NA 的免疫原性分析 | 第33-34页 |
| ·统计分析方法 | 第34-35页 |
| 第四章 实验结果 | 第35-48页 |
| ·NA 基因的获得 | 第35页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第35-38页 |
| ·pPIC9-NA 重组酵母表达载体的构建 | 第35-37页 |
| ·pET226-NA 重组大肠杆菌表达载体的构建 | 第37-38页 |
| ·重组表达菌株的构建 | 第38-39页 |
| ·酵母重组表达菌株的构建 | 第38-39页 |
| ·重组大肠杆菌表达菌株的构建 | 第39页 |
| ·NA 重组蛋白的纯化 | 第39-43页 |
| ·重组酵母菌表达的NA 的纯化 | 第39-41页 |
| ·重组大肠杆菌表达的NA 的纯化 | 第41-43页 |
| ·NA 的PNGASE F 酶切分析 | 第43页 |
| ·蛋白浓度测定 | 第43-44页 |
| ·不同糖基化NA 的免疫原性分析 | 第44-48页 |
| ·低糖化的NA 能诱导更高抗体滴度的产生 | 第44-46页 |
| ·各种NA 诱导产生的抗体滴度均有剂量依赖性 | 第46-48页 |
| 第五章 讨论 | 第48-51页 |
| ·G5115 与GJK01 表达的NA 的糖基化程度比较 | 第48页 |
| ·酵母表达系统的低糖基化修饰在增强NA 免疫原性中的作用 | 第48-49页 |
| ·低甘露糖基化NA 成为候选基因工程流感疫苗的可能性 | 第49-50页 |
| ·GJK01 成为糖蛋白疫苗研究和开发平台的可能性 | 第50-51页 |
| 第六章 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-56页 |
| 文献综述 | 第56-62页 |
| 研究论著 | 第62-71页 |
| 个人简历 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
