| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 前言 | 第11-13页 |
| 第一部分 peDNA3.1一1d2、peDNA3.1一1d2一DBM和peDNA3.1一1d2一DBM-HLH质粒的构建 | 第13-32页 |
| 摘要 | 第13页 |
| 一、实验材料 | 第13-14页 |
| 二、实验方法 | 第14-15页 |
| 三、实验步骤 | 第15-25页 |
| 1 重叠 PCR 制备 Id2-DBM-δ HLH 并鉴定 | 第15-18页 |
| 2 构建 pcDNA3.1-Id2-DBM-δ HLH 质粒 | 第18-21页 |
| 3 构建 pcDNA3.1-Id2-DBM 质粒 | 第21-23页 |
| 4 构建 pcDNA3.1-Id2 质粒 | 第23-25页 |
| 四、结果 | 第25-29页 |
| 1 Id2-DBM-δ hlh 构建成功 | 第25-26页 |
| 2 pcDNA3.1-Id2-DBM-δ HLH 质粒构建成功 | 第26-27页 |
| 3 pcDNA3.1-Id2-DBM 质粒构建成功 | 第27页 |
| 4 pcDNA3.1-Id2 质粒构建成功 | 第27-29页 |
| 五、讨论 | 第29-30页 |
| 六、结论 | 第30页 |
| 参考文献 | 第30-32页 |
| 第二部分 Id2 通过非 HLH 结构域促进 MCF-7细胞的侵袭性 | 第32-51页 |
| 摘要 | 第32-33页 |
| 一、实验路线 | 第33页 |
| 二、实验材料 | 第33-35页 |
| 三、实验方法 | 第35-43页 |
| 1 稳定转染 MCF-7细胞系的建立 | 第35-36页 |
| 2 检测peDNA3.l、peDNA3.l一IdZ、pcnNA3.l一IdZ一nBM检测质粒是否已稳定转染进 MCF-7细胞 | 第36-41页 |
| ·Westen blot 检测 MCF-7细胞中 Id2表达水平 | 第36-40页 |
| ·RT-PCR 检测基因表达水平 | 第40-41页 |
| 3 Id2对 MCF-7细胞的增殖影响 | 第41-42页 |
| 4 Id2对 MCF-7细胞迁移能力的影响 | 第42-43页 |
| ·细胞划痕生长定性实验 | 第42页 |
| ·Transwell 穿膜运动实验 | 第42-43页 |
| 5 Westen blot 检测 Id2对 MCF-7细胞 E-cardherin 的蛋白水平的影响 | 第43页 |
| 四、结果 | 第43-47页 |
| 1 Westen blot 检测 MCF-7细胞中 Id2表达水平 | 第43页 |
| 2 RT-PCR 检测显示质粒在 MCF-7细胞中稳定表达 | 第43-44页 |
| 3 Id2、Id2-DBM、Id2-DBM-δ HLH 的过表达对 MCF-7细胞的生长增殖无明显影响 | 第44页 |
| 4 Id2、Id2-DBM、Id2-DBM-δ HLH 的过表达提高了 MCF-7的迁移能力 | 第44-47页 |
| 五、讨论 | 第47-49页 |
| 六、结论 | 第49页 |
| 参考文献 | 第49-51页 |
| 第三部分 Id2通过非 HLH 结构域促进 SKOV-3细胞的侵袭性 | 第51-65页 |
| 摘要 | 第51-52页 |
| 一、实验路线 | 第52页 |
| 二、实验材料 | 第52-54页 |
| 三、实验方法 | 第54-55页 |
| 1 G418筛选浓度的确定 | 第54页 |
| 2 稳定转染 SKOV-3细胞系的建立 | 第54页 |
| 3 Westen blot 检测 Id2表达及 RT-PCR 检测基因表达水平 | 第54页 |
| 4 Id2对 SKOV-3细胞的增殖影响 | 第54-55页 |
| 5 Id2对 SKOV-3细胞迁移能力的影响 | 第55页 |
| 6 Westen blot 检测 Id2对 SKOV-3细胞 E-cardherin 的蛋白水平的影响 | 第55页 |
| 四、结果 | 第55-59页 |
| 1 Westen blot 检测 SKOV-3细胞中 Id2表达水平 | 第55-56页 |
| 2 R-TpCR检测显示peDNA3.l、penNA3.l一Id2、peDNA3.l一Id2一naM和peDNA3.1-Id2-DBM-HLH在SKOV-3细胞中稳定表达 | 第56-57页 |
| 3 Id2、Id2-DBM、Id2-DBM-δ HLH 的过表达对 SKOV-3细胞的生长增殖无明显影响 | 第57页 |
| 4 Id2、Id2-DBM、Id2-DBM-δ HLH 的过表达提高了 SKOV-3的迁移能力 | 第57-59页 |
| 五、讨论 | 第59-61页 |
| 六、结论 | 第61-62页 |
| 课题总结 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-65页 |
| 文献综述 | 第65-73页 |
| 中英文对照英文缩略语表 | 第73-74页 |
| 在读硕士期间发表的文章 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
