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农药污染土壤有机磷降解酶基因和微生物多样性研究

摘要第1-5页
Abstract第5-8页
1.引言第8-9页
2. 有机磷降解酶及其基因的相关背景介绍第9-27页
   ·有机磷农药简介第9页
   ·有机磷农药微生物降解途径及降解作用机理第9-12页
     ·有机磷降解酶简介第9-10页
     ·甲基对硫磷的初级代谢第10-11页
     ·PNP 的降解途径第11-12页
   ·有机磷降解酶基因的研究现状第12-17页
     ·有机磷降解酶基因的起源第12-14页
     ·有机磷降解酶基因的研究现状第14-17页
     ·微生物对甲基对硫磷的降解第17页
   ·有机磷农药降解菌及其酶制剂的应用第17-18页
   ·宏基因组学技术对土壤微生物多样性研究的应用第18-22页
     ·宏基因组学概述第18-19页
     ·土壤宏基因组学研究现状第19-22页
   ·PCR-DGGE 在研究土壤微生物多样性中的应用第22-24页
     ·DGGE 的基本原理第22-23页
     ·DGGE 在微生物生态学研究中的应用第23-24页
   ·问题和前景展望第24-25页
   ·研究的目的和意义第25-26页
   ·技术路线第26-27页
3. 污染土壤有机磷降解酶基因多样性分析第27-38页
   ·材料与方法第27-32页
     ·试验材料第27页
     ·试验仪器第27页
     ·试剂、工具酶第27页
     ·相关溶液的配制第27-28页
     ·土壤宏基因组的提取第28页
     ·有机磷降解酶基因简并引物设计第28-29页
     ·有机磷降解酶基因片段的扩增第29-30页
     ·有机磷降解酶基因片段文库的构建及阳性克隆的筛选第30-32页
   ·结果与分析第32-36页
     ·提取土壤微生物的宏基因组DNA第32-33页
     ·有机磷降解酶基因简并引物序列及片段扩增第33页
     ·阳性质粒检测鉴定第33页
     ·测序结果分析第33-34页
     ·土壤样品有机磷降解酶基因多样性分析第34-35页
     ·活性泥样品有机磷降解酶基因多样性分析第35-36页
   ·讨论第36-37页
   ·本章小结第37-38页
4. 污染土壤微生物多样性PCR-DGGE 分析第38-46页
   ·材料与方法第38-42页
     ·试验材料第38页
     ·试验仪器第38页
     ·试剂、工具酶第38页
     ·溶液第38-39页
     ·土壤宏基因组提取第39页
     ·V3 可变区特异引物序列第39页
     ·16S V3 片段 PCR 扩增第39页
     ·变性梯度凝胶电泳第39-41页
     ·基因克隆和序列分析第41-42页
   ·结果与分析第42-44页
     ·DGGE 条带特异性分析第42-43页
     ·有机磷污染土壤样品微生物多样性分析第43-44页
   ·讨论第44-45页
   ·本章小结第45-46页
5. 结论第46-47页
参考文献第47-53页
作者简历第53-54页
致谢第54页

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