摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-10页 |
引言 | 第10-11页 |
1 文献综述 | 第11-25页 |
·蛋白的糖基化修饰 | 第11-13页 |
·N-糖基化修饰 | 第11-12页 |
·O-糖基化修饰 | 第12-13页 |
·O-GlcNA糖基化修饰 | 第13-14页 |
·乙酰葡萄糖胺转移酶(OGT) | 第14-19页 |
·结构与功能 | 第14-17页 |
·催化机理 | 第17页 |
·抑制剂 | 第17-19页 |
·酰葡萄糖胺水解酶(OGA) | 第19-23页 |
·结构与功能 | 第19-21页 |
·催化机理 | 第21页 |
·抑制剂 | 第21-23页 |
·本论文的选题依据和研究内容 | 第23-25页 |
·选题依据 | 第23-24页 |
·研究内容 | 第24-25页 |
2 亚洲玉米螟乙酰葡萄糖胺水解酶基因的克隆 | 第25-35页 |
·引言 | 第25页 |
·实验材料与方法 | 第25-28页 |
·实验动物 | 第25页 |
·试剂和试剂盒 | 第25页 |
·总RNA的提取 | 第25-26页 |
·亚洲玉米螟乙酰葡萄糖胺水解酶(OfOGA)基因的克隆 | 第26-28页 |
·生物信息学分析 | 第28页 |
·实验结果 | 第28-34页 |
·亚洲玉米螟总RNA的提取 | 第28-29页 |
·亚洲玉米螟乙酰葡萄糖胺水解酶(OfOGA)基因的克隆 | 第29-31页 |
·洲玉米螟乙酰葡萄糖胺水解酶(OfOGA)基因的生物信息学分析#22 | 第31-34页 |
·讨论 | 第34页 |
·小结 | 第34-35页 |
3 亚洲玉米螟乙酰葡萄糖胺水解酶的重组表达与纯化 | 第35-46页 |
·引言 | 第35页 |
·实验材料与方法 | 第35-38页 |
·菌株与质粒 | 第35页 |
·培养基与培养条件 | 第35页 |
·试剂与试剂盒 | 第35-36页 |
·主要仪器及设备 | 第36页 |
·洲玉米螟OfOGA基因的克隆与表达载体构建 | 第36页 |
·重组OfOGA在大肠杆菌中的表达与纯化 | 第36-37页 |
·SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第37页 |
·Western Blotting | 第37页 |
·金属螯合层析 | 第37-38页 |
·物理性质的测定与预测 | 第38页 |
·酶学活性测定方法 | 第38页 |
·最适pH对酶活力的影响 | 第38页 |
·最适温度对酶活力的影响 | 第38页 |
·实验结果 | 第38-44页 |
·亚洲玉米螟OfOGA基因的克隆与表达载体构建 | 第38-40页 |
·原核表达产物的鉴定 | 第40页 |
·重组表达产物的纯化 | 第40-42页 |
·OfOGA蛋白性质测定及预测 | 第42页 |
·OfOGA催化的最适pH | 第42页 |
·OfOGA催化的最适温度 | 第42-43页 |
·乙酰葡萄糖胺水解酶(OGA)与乙酰己糖胺酶(HEX)的比较 | 第43-44页 |
·讨论 | 第44页 |
·小结 | 第44-46页 |
4 亚洲玉米螟乙酰葡萄糖胺转移酶的克隆与重组表达 | 第46-58页 |
·引言 | 第46页 |
·实验方法 | 第46-49页 |
·实验动物 | 第46页 |
·试剂和试剂盒 | 第46页 |
·总RNA的提取 | 第46页 |
·亚洲玉米螟乙酰葡萄糖胺转移酶(OfOGT)基因的克隆 | 第46-48页 |
·亚洲玉米螟OfOGT基因的克隆与表达载体构建 | 第48-49页 |
·重组OfOGT在大肠杆菌中的表达鉴定 | 第49页 |
·实验结果 | 第49-56页 |
·亚洲玉米螟乙酰葡萄糖胺转移酶(OfOGT)基因的获得 | 第49-51页 |
·亚洲玉米螟乙酰葡萄糖胺转移酶(OfOGT)基因的生物信息学分析#42 | 第51-54页 |
·亚洲玉米螟OfOGT基因的克隆与表达载体构建 | 第54-56页 |
·原核表达产物的鉴定 | 第56页 |
·讨论 | 第56页 |
·小结 | 第56-58页 |
结论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-66页 |
附录A OfOGA的cDNA序列与编码的氨基酸序列 | 第66-71页 |
附录B OfOGA编码氨基酸全序列与其同源序列的多重序列比对 | 第71-74页 |
附录C OfOGT的cDNA序列与编码的氨基酸序列 | 第74-79页 |
附录D OfOGT编码氨基酸全序列与其同源序列的多重序列比对 | 第79-82页 |
攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第82-83页 |
致谢 | 第83-84页 |