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亚洲玉米螟乙酰葡萄糖胺水解酶(OfOGA)和转移酶(OfOGT)的基因克隆与重组表达

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
引言第10-11页
1 文献综述第11-25页
   ·蛋白的糖基化修饰第11-13页
     ·N-糖基化修饰第11-12页
     ·O-糖基化修饰第12-13页
   ·O-GlcNA糖基化修饰第13-14页
   ·乙酰葡萄糖胺转移酶(OGT)第14-19页
     ·结构与功能第14-17页
     ·催化机理第17页
     ·抑制剂第17-19页
   ·酰葡萄糖胺水解酶(OGA)第19-23页
     ·结构与功能第19-21页
     ·催化机理第21页
     ·抑制剂第21-23页
   ·本论文的选题依据和研究内容第23-25页
     ·选题依据第23-24页
     ·研究内容第24-25页
2 亚洲玉米螟乙酰葡萄糖胺水解酶基因的克隆第25-35页
   ·引言第25页
   ·实验材料与方法第25-28页
     ·实验动物第25页
     ·试剂和试剂盒第25页
     ·总RNA的提取第25-26页
     ·亚洲玉米螟乙酰葡萄糖胺水解酶(OfOGA)基因的克隆第26-28页
     ·生物信息学分析第28页
   ·实验结果第28-34页
     ·亚洲玉米螟总RNA的提取第28-29页
     ·亚洲玉米螟乙酰葡萄糖胺水解酶(OfOGA)基因的克隆第29-31页
     ·洲玉米螟乙酰葡萄糖胺水解酶(OfOGA)基因的生物信息学分析#22第31-34页
   ·讨论第34页
   ·小结第34-35页
3 亚洲玉米螟乙酰葡萄糖胺水解酶的重组表达与纯化第35-46页
   ·引言第35页
   ·实验材料与方法第35-38页
     ·菌株与质粒第35页
     ·培养基与培养条件第35页
     ·试剂与试剂盒第35-36页
     ·主要仪器及设备第36页
     ·洲玉米螟OfOGA基因的克隆与表达载体构建第36页
     ·重组OfOGA在大肠杆菌中的表达与纯化第36-37页
     ·SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳第37页
     ·Western Blotting第37页
     ·金属螯合层析第37-38页
     ·物理性质的测定与预测第38页
     ·酶学活性测定方法第38页
     ·最适pH对酶活力的影响第38页
     ·最适温度对酶活力的影响第38页
   ·实验结果第38-44页
     ·亚洲玉米螟OfOGA基因的克隆与表达载体构建第38-40页
     ·原核表达产物的鉴定第40页
     ·重组表达产物的纯化第40-42页
     ·OfOGA蛋白性质测定及预测第42页
     ·OfOGA催化的最适pH第42页
     ·OfOGA催化的最适温度第42-43页
     ·乙酰葡萄糖胺水解酶(OGA)与乙酰己糖胺酶(HEX)的比较第43-44页
   ·讨论第44页
   ·小结第44-46页
4 亚洲玉米螟乙酰葡萄糖胺转移酶的克隆与重组表达第46-58页
   ·引言第46页
   ·实验方法第46-49页
     ·实验动物第46页
     ·试剂和试剂盒第46页
     ·总RNA的提取第46页
     ·亚洲玉米螟乙酰葡萄糖胺转移酶(OfOGT)基因的克隆第46-48页
     ·亚洲玉米螟OfOGT基因的克隆与表达载体构建第48-49页
     ·重组OfOGT在大肠杆菌中的表达鉴定第49页
   ·实验结果第49-56页
     ·亚洲玉米螟乙酰葡萄糖胺转移酶(OfOGT)基因的获得第49-51页
     ·亚洲玉米螟乙酰葡萄糖胺转移酶(OfOGT)基因的生物信息学分析#42第51-54页
     ·亚洲玉米螟OfOGT基因的克隆与表达载体构建第54-56页
     ·原核表达产物的鉴定第56页
   ·讨论第56页
   ·小结第56-58页
结论第58-59页
参考文献第59-66页
附录A OfOGA的cDNA序列与编码的氨基酸序列第66-71页
附录B OfOGA编码氨基酸全序列与其同源序列的多重序列比对第71-74页
附录C OfOGT的cDNA序列与编码的氨基酸序列第74-79页
附录D OfOGT编码氨基酸全序列与其同源序列的多重序列比对第79-82页
攻读硕士学位期间发表学术论文情况第82-83页
致谢第83-84页

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