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家蚕表皮高丰度表达基因BmGCP2的克隆、表达及分析

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
第一部分 文献综述第11-21页
   ·昆虫的体壁第11-14页
     ·昆虫体壁的作用第11页
     ·昆虫体壁的构成第11-14页
   ·昆虫的表皮第14-16页
     ·昆虫表皮的化学组成第14页
     ·昆虫的表皮的特性第14-16页
   ·昆虫的表皮蛋白第16-17页
   ·家蚕的表皮蛋白研究进展第17-21页
第二部分 引言第21-23页
   ·研究目的及意义第21页
   ·研究内容第21-22页
   ·技术路线第22-23页
第三部分 材料与方法第23-43页
   ·材料第23-29页
     ·实验材料第23页
     ·载体及宿主菌第23页
     ·主要试剂第23-28页
     ·主要仪器第28-29页
     ·生物信息学分析工具第29页
   ·方法第29-43页
     ·BmGCP2基因的全长CDS序列的电子克隆第29页
     ·BmGCP2基因的克隆和鉴定第29-34页
     ·BmGCP2基因的序列分析第34页
     ·BmGCP2基因的表达谱分析第34-35页
     ·重组表达质粒的构建第35-36页
     ·含表达质粒菌株的诱导第36-38页
     ·蛋白表达形式的鉴定第38页
     ·蛋白表达条件的优化第38-39页
     ·目的蛋白包涵体的提取第39页
     ·目的蛋白包涵体的纯化第39-40页
     ·抗体的制备及纯化第40-41页
     ·家蚕BmGCP2蛋白组织表达谱分析第41-43页
第四部分 结果与分析第43-56页
   ·BmGCP2基因的全长CDS序列的电子克隆第43页
   ·BmGCP2基因的克隆和鉴定第43-45页
   ·BmGCP2基因的序列分析第45-46页
   ·BmGCP2基因的氨基酸序列分析第46-48页
   ·BmGCP2基因的表达谱分析第48-49页
     ·BmGCP2基因的组织表达谱分析第48页
     ·BmGCP2基因在家蚕不同发育时期的表达谱分析第48-49页
   ·重组表达质粒的构建第49-51页
     ·BmGCP2P基因片段的克隆第49-50页
     ·重组表达质粒的构建第50-51页
   ·BmGCP2P/pGEX-4T-1的诱导表达第51页
   ·目的蛋白表达形式的鉴定第51-52页
   ·目的蛋白表达条件的优化第52-53页
     ·IPTG诱导浓度的优化第52-53页
     ·诱导时间的优化第53页
   ·包涵体的提取与纯化第53页
   ·抗体的制备及纯化第53-54页
   ·家蚕各组织总蛋白的提取及浓度测定第54页
   ·Western blotting检测组织中BmGCP2蛋白的表达情况第54-56页
第五部分 讨论第56-58页
   ·BmGCP2基因的氨基酸序列第56页
   ·BmGCP2基因的调控元件分析第56页
   ·BmGCP2基因编码蛋白的功能分析第56-58页
第六部分 小结第58-60页
   ·家蚕BmGCP2基因的克隆及序列分析第58页
   ·BmGCP2基因的表达谱分析第58页
   ·BmGCP2P基因的原核表达第58页
   ·BmGCP2蛋白的表达特性研究第58-60页
参考文献第60-65页
附录第65-67页
发表文章及参研课题第67-69页
致谢第69-70页

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