| 致谢 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-19页 |
| ·苜蓿秋眠性 | 第9-11页 |
| ·苜蓿秋眠性的概念 | 第9-10页 |
| ·苜蓿秋眠性的生理生化特性研究 | 第10-11页 |
| ·温度和光照与秋眠的关系 | 第10页 |
| ·秋眠性与光合能力 | 第10-11页 |
| ·光敏色素研究进展 | 第11-15页 |
| ·光敏色素的发现 | 第11-12页 |
| ·光敏色素的种类和结构 | 第12页 |
| ·光敏色素分子基因及作用方式 | 第12-13页 |
| ·光敏色素基因 | 第12-13页 |
| ·光敏色素的作用方式 | 第13页 |
| ·光敏色素的生理功能 | 第13-15页 |
| ·光敏色素与光周期 | 第13-14页 |
| ·光敏色素对细胞生长的调节 | 第14-15页 |
| ·光敏色素对基因表达的调控 | 第15页 |
| ·实时荧光定量PCR（FQ-PCR）技术及其应用 | 第15-19页 |
| ·FQ-PCR的原理 | 第16-17页 |
| ·FQ-PCR的定量方法 | 第17-18页 |
| ·绝对定量 | 第17页 |
| ·标准曲线法的相对定量 | 第17-18页 |
| ·比较Ct值的相对定量法 | 第18页 |
| ·FQ-PCR的特点 | 第18页 |
| ·FQ-PCR的应用 | 第18-19页 |
| 2 引言 | 第19-20页 |
| 3 材料与方法 | 第20-33页 |
| ·试验设计 | 第20页 |
| ·不同温度试验阶段 | 第20页 |
| ·不同光周期试验第一阶段 | 第20页 |
| ·不同光周期试验第二阶段 | 第20页 |
| ·试验材料 | 第20-23页 |
| ·样品、菌株 | 第20页 |
| ·主要试剂 | 第20-21页 |
| ·主要仪器设备 | 第21页 |
| ·实验所用溶液及其配制 | 第21-23页 |
| ·RT-PCR、FQ-PCR 方法的建立 | 第23-33页 |
| ·引物的设计和合成 | 第23-24页 |
| ·引物设计的思路 | 第23-24页 |
| ·引物的合成 | 第24页 |
| ·紫花苜蓿总RNA的提取 | 第24-27页 |
| ·提总RNA前的准备工作 | 第24-25页 |
| ·抽提时注意事项 | 第25页 |
| ·提取主要步骤 | 第25-26页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检测 | 第26-27页 |
| ·扩增产物的纯化 | 第27-28页 |
| ·PCR 产物的测序与序列比对 | 第28页 |
| ·反转录PCR | 第28-33页 |
| ·准备工作 | 第28页 |
| ·RT 时注意事项 | 第28-29页 |
| ·RT-PCR 具体步骤 | 第29-30页 |
| ·温度、光周期处理后试验样品 RNA 的提取以及浓度的测定 | 第30页 |
| ·【SYBR Green Assay】FQ-PCR 反应 | 第30-32页 |
| ·试验结果的处理 | 第32-33页 |
| 4 结果 | 第33-53页 |
| ·紫花苜蓿肌动蛋白基因片段的扩增 | 第33-39页 |
| ·总RNA提取与检测 | 第33页 |
| ·基因普通 RT-PCR 结果 | 第33页 |
| ·RT-PCR 产物测序结果 | 第33-34页 |
| ·测序结果的相似性检索 | 第34-39页 |
| ·紫花苜蓿Actin、phyA、phyB FQ-PCR 扩增片段的鉴定 | 第39-45页 |
| ·图3-1 紫花苜蓿的Actin、phyA、phyB 片段琼脂糖凝胶电泳图 | 第39-40页 |
| ·Actin 的鉴定 | 第40-41页 |
| ·phyA 的鉴定 | 第41-42页 |
| ·phyB 的鉴定 | 第42-44页 |
| ·phyA、phyB 与 Actin 荧光定量 PCR 引物熔解曲线图 | 第44页 |
| ·phyA、phyB与Actin试验样品荧光定量PCR扩增曲线 | 第44-45页 |
| ·不同温度对秋眠型紫花苜蓿phyA、phyB mRNA 丰度的影响 | 第45-47页 |
| ·不同光周期对不同秋眠型紫花苜蓿phyA、phyB mRNA 相对含量的影响 | 第47-50页 |
| ·大苗不同光周期对不同秋眠型紫花苜蓿phyA、phyB mRNA 相对含量的影响 | 第47-48页 |
| ·小苗不同光周期对不同秋眠型紫花苜蓿phyA、phyB mRNA 相对含量的影响 | 第48-50页 |
| ·不同秋眠型紫花苜蓿相同光周期phyA、phyB mRNA 相对含量的变化规律 | 第50-53页 |
| ·大苗不同秋眠型紫花苜蓿相同光周期phyA、phyB mRNA 相对含量的变化规律 | 第50页 |
| ·小苗不同秋眠型紫花苜蓿相同光周期phyA、phyB mRNA 相对含量的变化规律 | 第50-53页 |
| 5 讨论 | 第53-57页 |
| ·紫花苜蓿肌动蛋白基因片段的扩增 | 第53页 |
| ·不同温度对秋眠型紫花苜蓿 phyA 和 phyB mRNA 相对含量的影响 | 第53-54页 |
| ·不同光周期对不同秋眠型紫花苜蓿 phyA、phyB mRNA 相对含量的影响 | 第54-56页 |
| ·展望 | 第56-57页 |
| 6 参考文献 | 第57-63页 |
| 英文摘要 | 第63-65页 |
| 附件 | 第65-67页 |
