| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 英文缩写符号及其中英文对照表 | 第11-12页 |
| 1 引言 | 第12-24页 |
| ·甜瓜果实的特征香气成分 | 第12页 |
| ·酯类代谢途径及代谢相关酶 | 第12-16页 |
| ·直链酯类挥发性成分代谢途径 | 第12-13页 |
| ·支链酯类挥发性成分代谢途径 | 第13-14页 |
| ·以糖为前体的酯类挥发性物质代谢途径 | 第14-15页 |
| ·酯类挥发性成分合成相关酶 | 第15-16页 |
| ·醇酰基转移酶参与酯类挥发性成分合成的研究进展 | 第16-19页 |
| ·植物中的醇酰基转移酶基因 | 第17-18页 |
| ·植物中的醇酰基转移酶基因的调控机制 | 第18-19页 |
| ·植物挥发性成分的代谢基因工程 | 第19页 |
| ·反义技术的研究 | 第19-22页 |
| ·反义技术的概念及作用原理 | 第19-21页 |
| ·反义核酸技术在植物基因工程中的应用 | 第21-22页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第22-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-42页 |
| ·试验材料 | 第24-26页 |
| ·植物材料与处理 | 第24页 |
| ·菌株与质粒 | 第24页 |
| ·试剂盒、酶、生化试剂及试验仪器 | 第24页 |
| ·PCR 引物 | 第24-25页 |
| ·培养基 | 第25-26页 |
| ·试验方法 | 第26-42页 |
| ·甜瓜果实总 RNA 的提取 | 第26-28页 |
| ·甜瓜果实 AAT 基因的克隆 | 第28-29页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第29页 |
| ·目的片段的回收 | 第29-30页 |
| ·连接反应 | 第30页 |
| ·转化 | 第30-32页 |
| ·重组子的 PCR 及酶切鉴定 | 第32-34页 |
| ·测序及序列分析 | 第34页 |
| ·果实发育过程中 AAT 基因的表达分析 | 第34-35页 |
| ·正义表达载体的构建 | 第35页 |
| ·反义表达载体的构建 | 第35-36页 |
| ·目的基因片段的获得 | 第36页 |
| ·表达载体 PBI121 和 pROK3 的酶切反应及所得片段的回收 | 第36-37页 |
| ·连接反应 | 第37-38页 |
| ·热激法转化 E.coli DH5a | 第38页 |
| ·重组质粒的筛选及菌液的保存 | 第38-39页 |
| ·重组质粒的鉴定方法 | 第39-40页 |
| ·根癌农杆菌 LBA4404 感受态细胞的制备与转化 | 第40页 |
| ·根癌农杆菌菌落的 PCR 检测 | 第40页 |
| ·外植体的准备 | 第40-41页 |
| ·侵染农杆菌的制备 | 第41页 |
| ·番茄转化及植株再生 | 第41-42页 |
| 3 结果与分析 | 第42-48页 |
| ·甜瓜果实总 RNA 的提取 | 第42页 |
| ·甜瓜果实 AAT 基因的克隆 | 第42-43页 |
| ·甜瓜果实 AAT 基因中间片段的克隆 | 第42页 |
| ·甜瓜果实 AAT 基因3′端的克隆 | 第42-43页 |
| ·甜瓜果实 AAT 基因5′端的克隆 | 第43页 |
| ·甜瓜果实 AAT 基因氨基酸序列分析及同源性比较 | 第43-45页 |
| ·AAT基因的表达特性分析 | 第45页 |
| ·AAT 正义载体的 PCR 及酶切鉴定 | 第45-46页 |
| ·AAT 反义载体的 PCR 及酶切鉴定 | 第46页 |
| ·根癌农杆菌菌落的 PCR 检测 | 第46-47页 |
| ·转基因番茄植株的获得 | 第47-48页 |
| 4 讨论 | 第48-53页 |
| ·关于甜瓜总 RNA 的提取 | 第48页 |
| ·RT-PCR 反应条件的优化 | 第48-49页 |
| ·RACE 技术在基因克隆中的作用及引物设计原则 | 第49-50页 |
| ·AAT 基因的表达特性分析 | 第50页 |
| ·关于酶切和连接 | 第50-51页 |
| ·关于标记基因的切除 | 第51页 |
| ·关于反义技术在植物基因工程中的应用 | 第51-52页 |
| ·根癌农杆菌的转化 | 第52页 |
| ·外植体的侵染 | 第52页 |
| ·褐化对番茄外植体分化的影响 | 第52-53页 |
| 5 结论 | 第53页 |
| 继续研究设想 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 攻读硕士期间发表论文 | 第65页 |
