| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 缩写表 | 第9-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-37页 |
| 1 长春花萜类吲哚生物碱(TIAs)合成途径及其关键酶 | 第15-18页 |
| ·长春花萜类吲哚生物碱(TIAs)合成途径 | 第17页 |
| ·长春花TIAs合成途径部分关键酶 | 第17-18页 |
| 2 长春花萜类吲哚生物碱(TIAs)合成途径的分子调控 | 第18-27页 |
| ·植物次级信号分子对TIAs的合成调控 | 第19-23页 |
| ·植物生长调节剂对TIAs的合成调控 | 第23页 |
| ·异戊烯基化蛋白对TIAs的合成调控 | 第23-24页 |
| ·转录因子对TIAs的合成调控 | 第24-25页 |
| ·TIAs合成途径关键酶的区室化和代谢中间物的运输调控 | 第25-27页 |
| 3 长春花萜类吲哚生物碱(TIAs)的代谢工程研究 | 第27-34页 |
| ·长春花培养体系 | 第28-29页 |
| ·外源诱导物对长春花TIAs合成的影响 | 第29-31页 |
| ·基因工程学在提高长春花TIAs含量的应用 | 第31-34页 |
| 4 本研究的目的意义及主要内容 | 第34-37页 |
| ·研究的目的和意义 | 第34-36页 |
| ·研究的主要内容 | 第36-37页 |
| 第二章 野生型发根农杆菌A4对长春花遗传转化体系的建立以及其毛状根的获得 | 第37-51页 |
| 1 材料与方法 | 第37-43页 |
| ·材料 | 第37-40页 |
| ·方法 | 第40-43页 |
| 2 结果与分析 | 第43-48页 |
| ·长春花无菌苗的获得和愈伤组织诱导 | 第43-44页 |
| ·长春花生根培养基的选择和继代培养 | 第44页 |
| ·野生型发根农杆菌A4的分子遗传分析 | 第44-45页 |
| ·长春花A4毛状根的抗性筛选和培养 | 第45-47页 |
| ·长春花A4毛状根系的遗传分析 | 第47-48页 |
| 3 讨论 | 第48-51页 |
| ·活性碳的作用 | 第48页 |
| ·Ri质粒介导的遗传转化 | 第48-51页 |
| 第三章 GmMYBZ2和野生型发根农杆菌A4对长春花TIAs途径的分子调控研究 | 第51-91页 |
| 1 材料与方法 | 第51-63页 |
| ·材料 | 第51-53页 |
| ·方法 | 第53-63页 |
| 2 结果与分析 | 第63-84页 |
| ·A4-pCAMBIA2301-GmMYBZ2菌的获得 | 第63-64页 |
| ·A4-MYBZ2毛状根系的获得 | 第64-73页 |
| ·A4-MYBZ2毛状根系的PCR-Southern Blotting | 第73-74页 |
| ·A4-MYBZ2毛状根系与A4毛状根系的形态比较 | 第74页 |
| ·A4-MYBZ2毛状根系、A4毛状根系以及天然根系中长春质碱含量的HPLC检测分析 | 第74-77页 |
| ·RNA提取及RT-PCR检测 | 第77页 |
| ·TIAs合成途径相关基因的Real-time PCR相对定量检测 | 第77-83页 |
| ·毛状根生长指数测定 | 第83-84页 |
| 3 讨论 | 第84-91页 |
| ·野生型A4发根农杆菌对长春花TIAs合成调控的分子机理 | 第84-85页 |
| ·GmMYBZ2基因对长春质碱合成调控的分子机理 | 第85-89页 |
| ·生长指数与细胞周期蛋白的关系 | 第89-90页 |
| ·深入解析发根农杆菌对长春花TIAs合成调控的策略 | 第90-91页 |
| 第四章 一氧化氮(NO)与茉莉酸甲酯(MeJA)对长春花A4毛状根系TIAs途径的分子机理研究 | 第91-124页 |
| 1 材料与方法 | 第91-97页 |
| ·材料 | 第91页 |
| ·方法 | 第91-97页 |
| 2 结果与分析 | 第97-120页 |
| ·CrORCA3基因的克隆 | 第97-98页 |
| ·pCAMBIA2301-CrORCA3植物表达载体的构建 | 第98-99页 |
| ·A4-ORCA3毛状根系的获得 | 第99-105页 |
| ·A4-ORCA3毛状根系的PCR-Southern Blotting | 第105页 |
| ·不同处理的长春花毛状根系中长春质碱含量的HPLC检测分析 | 第105-109页 |
| ·RNA提取及RT-PCR检测 | 第109-110页 |
| ·TIAs合成途径相关基因的Real-time PCR相对定量检测 | 第110-119页 |
| ·五种不同处理根系的丙二醛(MDA)含量测定 | 第119-120页 |
| 3 讨论 | 第120-124页 |
| ·NO对长春花TIAs合成调控的分子机理的初探 | 第120-121页 |
| ·NO与MeJA对长春花TIAs合成调控的互作机理初探 | 第121-122页 |
| ·深入解析NO与MeJA对长春花TIAs合成调控的机理的策略 | 第122-124页 |
| 小结 | 第124-125页 |
| 参考文献 | 第125-137页 |
| 致谢 | 第137-139页 |
| 攻读硕士学位期间所取的成果 | 第139页 |
