| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-38页 |
| 第一节 鱼类免疫相关基因的筛选 | 第18-24页 |
| ·目的基因筛选常用的技术 | 第18-19页 |
| ·鱼类免疫相关基因的研究进展 | 第19-24页 |
| 第二节 新基因的研究方法 | 第24-36页 |
| ·新基因的生物信息学分析 | 第25-28页 |
| ·新基因的时空表达谱分析 | 第28-29页 |
| ·基因功能的实验学验证 | 第29-35页 |
| ·基因编码产物相互作用蛋白的研究 | 第35-36页 |
| 第三节 本论文的研究目的、意义和方案 | 第36-38页 |
| 第二章 牙鲆FIBRINOGEN Β基因全长CDNA 的克隆及表达分析 | 第38-60页 |
| 第一节 牙鲆FIBRINOGEN Β基因全长CDNA 的克隆及序列分析 | 第39-54页 |
| ·材料与方法 | 第39-45页 |
| ·实验动物 | 第39页 |
| ·实验试剂及药品 | 第39-40页 |
| ·实验设备 | 第40-41页 |
| ·鳗弧菌注射及取材 | 第41页 |
| ·总RNA 的提取 | 第41页 |
| ·总RNA 中DNA 的消除 | 第41-42页 |
| ·牙鲆fibrinogen β基因全长cDNA 的RACE 扩增 | 第42-45页 |
| ·牙鲆fibrinogen β基因的序列分析 | 第45页 |
| ·结果与分析 | 第45-53页 |
| ·总RNA 的提取与检测 | 第45-46页 |
| ·牙鲆fibrinogen β基因全长cDNA 的克隆 | 第46-48页 |
| ·牙鲆fibrinogen β序列和结构分析 | 第48-53页 |
| ·讨论 | 第53-54页 |
| 第二节 牙鲆FIBRINOGEN Β基因的时空表达 | 第54-60页 |
| ·材料与方法 | 第54-56页 |
| ·实验材料、试剂及药品 | 第54-55页 |
| ·cDNA 的合成 | 第55页 |
| ·RT-PCR 引物序列及反应体系 | 第55-56页 |
| ·结果与分析 | 第56-57页 |
| ·讨论 | 第57-60页 |
| 第三章 牙鲆免疫相关基因1 的克隆及表达分析 | 第60-84页 |
| 第一节 POIR1 的克隆及序列分析 | 第60-70页 |
| ·材料与方法 | 第60-62页 |
| ·实验动物、试剂、药品、设备、鳗弧菌注射及取材、总RNA 的提取、RNA 中DNA 的消除、全长cDNA 的RACE 扩增 | 第60-61页 |
| ·PoIR1 基因组序列的获得 | 第61页 |
| ·PoIR1 基因的序列分析 | 第61-62页 |
| ·结果与分析 | 第62-69页 |
| ·PoIR1 基因的全长cDNA 序列及基因组序列的克隆 | 第62-65页 |
| ·PoIR1 基因序列和结构分析 | 第65-69页 |
| ·讨论 | 第69-70页 |
| 第二节 鳗弧菌感染后POIR1 基因的时空表达分析 | 第70-72页 |
| ·材料与方法 | 第71页 |
| ·结果与分析 | 第71-72页 |
| ·讨论 | 第72页 |
| 第三节 POIR1 基因在大肠杆菌中的表达 | 第72-84页 |
| ·材料与方法 | 第73-78页 |
| ·质粒和菌种 | 第73-74页 |
| ·主要试剂及配制 | 第74-75页 |
| ·目的片段的制备 | 第75页 |
| ·中间载体pMD18-T-PoIR1 的构建 | 第75页 |
| ·表达载体pET-32a-PoIR1 的构建 | 第75-76页 |
| ·重组表达质粒pET-32a-PoIR1 在大肠杆菌中的诱导表达 | 第76-77页 |
| ·SDS-PAGE | 第77页 |
| ·Western blot 检测 | 第77-78页 |
| ·结果与分析 | 第78-81页 |
| ·讨论 | 第81-84页 |
| ·大肠杆菌表达系统的选择 | 第81-82页 |
| ·载体和宿主菌株的选择 | 第82页 |
| ·重组蛋白的表达形式 | 第82-83页 |
| ·下一步研究计划 | 第83-84页 |
| 第四章 牙鲆免疫相关基因2 的克隆与功能分析 | 第84-100页 |
| 第一节 POIR2 的克隆及序列分析 | 第84-93页 |
| ·材料与方法 | 第84-85页 |
| ·实验动物、试剂、药品、设备、鳗弧菌注射及取材、总RNA 的提取、RNA 中DNA 的消除、全长cDNA 的RACE 扩增 | 第84-85页 |
| ·PoIR2 基因组序列的获得 | 第85页 |
| ·PoIR2 序列分析 | 第85页 |
| ·结果与分析 | 第85-93页 |
| ·PoIR2 基因的全长cDNA 序列及基因组序列的克隆 | 第85-87页 |
| ·PoIR2 序列和结构分析 | 第87-93页 |
| 第二节 鳗弧菌感染后POIR2 基因的时空表达分析 | 第93-94页 |
| ·材料与方法 | 第93页 |
| ·结果与分析 | 第93-94页 |
| 第三节 POIR2 在大肠杆菌中的表达 | 第94-100页 |
| ·材料与方法 | 第94-96页 |
| ·质粒、菌种、主要试剂及配制 | 第94-95页 |
| ·目的片段的制备 | 第95页 |
| ·中间载体pMD18-T-PoIR2 的构建 | 第95页 |
| ·表达载体pET-32a- PoIR2 的构建 | 第95-96页 |
| ·重组表达质粒pET-32a- PoIR2 在大肠杆菌中的诱导表达 | 第96页 |
| ·SDS-PAGE | 第96页 |
| ·Western blot 检测 | 第96页 |
| ·结果与分析 | 第96-99页 |
| ·讨论 | 第99-100页 |
| 第五章 鲽形目鱼类的系统发生关系的研究 | 第100-121页 |
| ·材料与方法 | 第101-105页 |
| ·实验材料 | 第101-102页 |
| ·实验方法 | 第102-105页 |
| ·基因组DNA 提取 | 第102-103页 |
| ·引物设计和PCR 扩增 | 第103-104页 |
| ·PCR 产物回收、纯化、克隆和测序 | 第104页 |
| ·数据分析 | 第104-105页 |
| ·实验结果 | 第105-118页 |
| ·fibint7、ND6 和COII 的扩增结果 | 第105-107页 |
| ·16 种鲽形目鱼类fibint7、ND6 和COII 序列特征 | 第107-115页 |
| ·fibint7 序列特征 | 第107-108页 |
| ·ND6 序列特征 | 第108-111页 |
| ·COII 序列分析 | 第111-115页 |
| ·15 种鲽形目鱼系统进化分析 | 第115-118页 |
| ·遗传距离 | 第115-117页 |
| ·系统分析 | 第117-118页 |
| ·讨论 | 第118-121页 |
| 参考文献 | 第121-134页 |
| 个人简历 | 第134页 |
| 学术成果 | 第134-135页 |
| 致谢 | 第135页 |
