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青枯菌诱导的花生SSH文库构建及分析

摘要第1-6页
Abstract第6-12页
第一章 综述第12-20页
   ·国内外花生产业发展现状第12页
   ·花生青枯病及防治第12-14页
     ·青枯菌的种类及对花生的危害第12-13页
     ·青枯菌在花生中的致病过程与分子机理第13页
     ·青枯菌在植株体内的分布及植株-病原互作反应第13-14页
     ·青枯病的防治第14页
   ·花生青枯病抗性遗传改良研究进展第14-16页
     ·抗病种质的发掘与创造第14-15页
     ·我国花生抗青枯病遗传改良研究进展及存在问题第15-16页
     ·花生青枯病抗性分子标记研究进展第16页
   ·植物抗病基因分离技术及研究进展第16-19页
     ·基于遗传作图的基因发掘与图位克隆第16-17页
     ·基于抗病基因同源序列发掘新基因第17-18页
     ·抑制差减杂交技术第18-19页
   ·本研究的必要性及意义第19-20页
     ·必要性第19页
     ·意义第19-20页
第二章 花生水培接种鉴定青枯病抗性方法的建立第20-24页
   ·材料及仪器第20页
   ·方法和步骤第20-21页
     ·材料准备和生长条件设置第20页
     ·青枯菌的培养第20-21页
     ·花生青枯菌接种处理第21页
   ·结果与分析第21-24页
第三章 花生抗青枯病材料SSH 文库的构建第24-39页
   ·材料、试剂及仪器第24页
   ·接种第24页
   ·SSH 文库构建步骤第24-30页
     ·取材第24页
     ·总RNA 提取第24-25页
     ·mRNA 纯化第25页
     ·cDNA 第一链的合成第25-26页
     ·cDNA 第二链的合成第26页
     ·cDNA 的酶切第26-27页
     ·接头连接第27页
     ·第一次差减杂交第27-28页
     ·第二次差减杂交第28页
     ·巢式PCR 扩增第28-29页
     ·与载体连接第29页
     ·连接产物转化第29页
     ·差减文库插入片段的检测第29-30页
     ·EST 测序及同源序列比对第30页
   ·结果与分析第30-39页
     ·总RNA 质量和纯化的mRNA 质量第30-32页
     ·cDNA 合成和酶切质量第32页
     ·差减效果第32-34页
     ·差减产物克隆第34页
     ·SSH 文库测序及生物信息学分析第34-39页
第四章 差异片段的RT-PCR 分析第39-44页
   ·材料及试剂第39页
   ·实验方法第39-41页
   ·结果与分析第41-44页
第五章 花生lectin 和arf 基因全长克隆及测序第44-48页
   ·材料、试剂及仪器第44页
   ·方法第44-45页
   ·结果与分析第45-48页
     ·克隆片段检测第45-46页
     ·测序及BLAST 比对分析第46-48页
第六章 讨论及结论第48-52页
   ·讨论第48-50页
     ·花生抗青枯病实验室接种鉴定方法的有效性和实用性第48页
     ·基于 SSH 方法发掘植物新基因的优越性第48-49页
     ·抗病相关基因在植物中的作用第49-50页
   ·结论第50-52页
参考文献第52-58页
致谢第58-59页
作者简历第59页

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