| 致谢 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-10页 |
| Abstract | 第10-15页 |
| 目次 | 第15-18页 |
| 前言 | 第18-22页 |
| 第一部分 Sip1基因条件下敲除后的表型研究 | 第22-37页 |
| ·实验仪器与材料 | 第22-25页 |
| ·仪器 | 第22页 |
| ·药物与试剂 | 第22-25页 |
| ·细胞株和OPC原代培养 | 第25页 |
| ·实验动物 | 第25页 |
| ·实验方法 | 第25-27页 |
| ·Sip1条件性敲除小鼠和Olig1突变型小鼠模型构建 | 第25页 |
| ·质粒构建 | 第25-26页 |
| ·pCIG-HA-Smad7,pCIG-Flag-Smurf1,pCIG-mSIP1构建 | 第25页 |
| ·lenti-GFP-HA-Smad7,lenti-GFP-mSip1,lenti-GFP—Flag-Smurf1构建 | 第25-26页 |
| ·OPC的纯化和分化 | 第26页 |
| ·组织学和原位杂交 | 第26页 |
| ·组织和细胞免疫荧光和confocal显微镜 | 第26-27页 |
| ·病毒制备 | 第27页 |
| ·腺病毒制备 | 第27页 |
| ·慢病毒制备 | 第27页 |
| ·实验结果 | 第27-37页 |
| ·Sip1/Zfhx1b在Olig1突变小鼠中显著下降 | 第27-28页 |
| ·Sip1表达在脑组织和脊髓少突胶质细胞丰富的区域 | 第28-29页 |
| ·Sip1在脊髓腹侧的发育情况 | 第29-30页 |
| ·Sip1敲除引起动物的死亡 | 第30-31页 |
| ·Sip1敲除能抑制髓鞘基因生成和轴突髓鞘化 | 第31-33页 |
| ·OPC生成和增殖不受Sip1敲除的影响 | 第33-35页 |
| ·体外敲除Sip1抑制OPC的分化 | 第35-37页 |
| 第二部分Sip1调控少突胶质细胞分化和启动轴突髓鞘化的作用机制研究 | 第37-71页 |
| ·实验仪器与材料 | 第37-43页 |
| ·实验仪器 | 第37页 |
| ·药物与试剂 | 第37-43页 |
| ·细胞株和OPC原代培养 | 第43页 |
| ·实验动物 | 第43页 |
| ·实验方法 | 第43-48页 |
| ·Sip1条件性敲除小鼠模型构建 | 第43-44页 |
| ·质粒构建 | 第44页 |
| ·pCIG-HA-Smad7,pCIG-Flag-Smurf1,pCIG-mSIP1构建 | 第44页 |
| ·lenti-GFP-HA-Smad7,GFP-mSip1,GFP—Flag-Smurf1构建 | 第44页 |
| ·细胞培养 | 第44页 |
| ·OPC的纯化和分化 | 第44-45页 |
| ·组织学和原位杂交 | 第45页 |
| ·组织和细胞免疫荧光和confocal显微镜 | 第45-46页 |
| ·western blotting和免疫共沉淀 | 第46页 |
| ·western blotting | 第46页 |
| ·免疫共沉淀 | 第46页 |
| ·病毒制备 | 第46-47页 |
| ·腺病毒制备 | 第46页 |
| ·慢病毒制备 | 第46-47页 |
| ·荧光素酶报告基因法 | 第47页 |
| ·染色质免疫共沉淀 | 第47-48页 |
| ·实验结果 | 第48-71页 |
| ·Sip1拮抗Smad/BMP信号通路在少突胶质细胞分化过程中的抑制性作用 | 第48-54页 |
| ·Sip1拮抗磷酸化Smad1在少突胶质细胞分化过程中的抑制性作用 | 第48-50页 |
| ·Sip1拮抗Id2、4和Hes1的激活 | 第50-51页 |
| ·Sip1的敲除不改变pSmad1的表达 | 第51-53页 |
| ·OLs阶段pSmad1连接Sip1和p300形成复合物 | 第53-54页 |
| ·Sip1通过影响不同的少突胶质细胞分化的调节因子促进OPC的分化 | 第54-56页 |
| ·Sip1调控的髓鞘基因和BMP等相关通路 | 第56-58页 |
| ·Sip1调节少突胶质细胞分化相关因子的启动子区域 | 第58-61页 |
| ·Smad7是少突胶质细胞内Sip1的下游基因 | 第61-67页 |
| ·Smad7表达在野生型小鼠脊髓腹侧部的少突胶质细胞内 | 第61-63页 |
| ·Sip1和Smad7在OLs内表达明显增多 | 第63-64页 |
| ·Sip1直接调控Smad7的表达 | 第64-65页 |
| ·Smad7过表达拮抗Sip1基因缺失引起的OPC分化障碍 | 第65-67页 |
| ·Smad7协同Smurf1调控BMP和Wnt信号通路 | 第67-68页 |
| ·Smad7促进少突胶质细胞相关标记物的异位表达 | 第68-69页 |
| ·Smad7敲除能抑制髓鞘基因生成 | 第69-71页 |
| 3 讨论 | 第71-77页 |
| 参考文献 | 第77-85页 |
| 综述 | 第85-98页 |
| 参考文献 | 第94-98页 |
| 作者简介及在读期间所取得的科研成果 | 第98-100页 |
