| 缩略词表 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 前言 | 第12-15页 |
| 第一章 重组人肝素酶在大肠杆菌中的表达、纯化 | 第15-31页 |
| 1 实验材料 | 第15-17页 |
| ·质粒和菌株 | 第15页 |
| ·主要试剂 | 第15-16页 |
| ·主要培养基和溶液的配制 | 第16-17页 |
| ·实验设备 | 第17页 |
| 2 实验方法 | 第17-24页 |
| ·目的DNA 的扩增 | 第17-19页 |
| ·pGEM-T Easy-HPA 的克隆和鉴定 | 第19-21页 |
| ·pET-28a-HPA 表达质粒的构建 | 第21页 |
| ·重组人肝素酶菌株的诱导表达及条件优化 | 第21-22页 |
| ·大肠杆菌的超声破碎及表达产物的纯化 | 第22页 |
| ·表达产物免疫印迹法鉴定 | 第22-23页 |
| ·ELISA 法对重组HPA 的鉴定 | 第23-24页 |
| 3 结果 | 第24-29页 |
| ·表达片段的扩增及鉴定 | 第24页 |
| ·重组pGEM-T Easy-HPA 质粒的鉴定 | 第24-25页 |
| ·pET-28a-HPA 表达质粒的鉴定 | 第25页 |
| ·人基因重组肝素酶的诱导表达及表达条件的优化 | 第25-27页 |
| ·表达产物的纯化 | 第27-28页 |
| ·ELISA 法对HPA 的鉴定 | 第28页 |
| ·Western 印迹鉴定 | 第28-29页 |
| 4 讨论 | 第29-31页 |
| 第二章 人肝素酶单克隆抗体的制备 | 第31-38页 |
| 1 实验材料与仪器： | 第31页 |
| ·实验动物 | 第31页 |
| ·实验材料 | 第31页 |
| ·实验试剂 | 第31页 |
| ·实验仪器 | 第31页 |
| 2 实验方法 | 第31-34页 |
| ·小鼠的免疫 | 第31-32页 |
| ·杂交瘤细胞的制备 | 第32-33页 |
| ·细胞融合后的筛选及鉴定 | 第33-34页 |
| 3 实验结果 | 第34-37页 |
| ·小鼠免疫后的结果 | 第34-36页 |
| ·ELISA 法筛选结果 | 第36页 |
| ·有限稀释克隆结果 | 第36-37页 |
| 4 讨论 | 第37-38页 |
| 第三章 酶联免疫吸附试验定量检测血清肝素酶方法的建立及应用 | 第38-47页 |
| 1 材料 | 第38-40页 |
| ·标本来源 | 第38-39页 |
| ·主要试剂和耗材 | 第39页 |
| ·溶液的配制 | 第39-40页 |
| ·研究对象 | 第40页 |
| 2 ELISA 实验步骤 | 第40-41页 |
| ·反应微孔板的准备 | 第40页 |
| ·反应过程 | 第40-41页 |
| ·数据统计 | 第41页 |
| 3 结果 | 第41-45页 |
| ·方法稳定性分析 | 第41页 |
| ·第1 部分实验结果 | 第41-43页 |
| ·第2 部分实验结果 | 第43-45页 |
| 4 讨论 | 第45-47页 |
| 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 个人简历 | 第53-54页 |
| 论文附录 | 第54页 |