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乙酰肝素酶在原核细胞中的表达、纯化及其抗体在临床检测中的应用

缩略词表第1-6页
摘要第6-9页
Abstract第9-12页
前言第12-15页
第一章 重组人肝素酶在大肠杆菌中的表达、纯化第15-31页
 1 实验材料第15-17页
   ·质粒和菌株第15页
   ·主要试剂第15-16页
   ·主要培养基和溶液的配制第16-17页
   ·实验设备第17页
 2 实验方法第17-24页
   ·目的DNA 的扩增第17-19页
   ·pGEM-T Easy-HPA 的克隆和鉴定第19-21页
   ·pET-28a-HPA 表达质粒的构建第21页
   ·重组人肝素酶菌株的诱导表达及条件优化第21-22页
   ·大肠杆菌的超声破碎及表达产物的纯化第22页
   ·表达产物免疫印迹法鉴定第22-23页
   ·ELISA 法对重组HPA 的鉴定第23-24页
 3 结果第24-29页
   ·表达片段的扩增及鉴定第24页
   ·重组pGEM-T Easy-HPA 质粒的鉴定第24-25页
   ·pET-28a-HPA 表达质粒的鉴定第25页
   ·人基因重组肝素酶的诱导表达及表达条件的优化第25-27页
   ·表达产物的纯化第27-28页
   ·ELISA 法对HPA 的鉴定第28页
   ·Western 印迹鉴定第28-29页
 4 讨论第29-31页
第二章 人肝素酶单克隆抗体的制备第31-38页
 1 实验材料与仪器:第31页
   ·实验动物第31页
   ·实验材料第31页
   ·实验试剂第31页
   ·实验仪器第31页
 2 实验方法第31-34页
   ·小鼠的免疫第31-32页
   ·杂交瘤细胞的制备第32-33页
   ·细胞融合后的筛选及鉴定第33-34页
 3 实验结果第34-37页
   ·小鼠免疫后的结果第34-36页
   ·ELISA 法筛选结果第36页
   ·有限稀释克隆结果第36-37页
 4 讨论第37-38页
第三章 酶联免疫吸附试验定量检测血清肝素酶方法的建立及应用第38-47页
 1 材料第38-40页
   ·标本来源第38-39页
   ·主要试剂和耗材第39页
   ·溶液的配制第39-40页
   ·研究对象第40页
 2 ELISA 实验步骤第40-41页
   ·反应微孔板的准备第40页
   ·反应过程第40-41页
   ·数据统计第41页
 3 结果第41-45页
   ·方法稳定性分析第41页
   ·第1 部分实验结果第41-43页
   ·第2 部分实验结果第43-45页
 4 讨论第45-47页
结论第47-48页
参考文献第48-52页
致谢第52-53页
个人简历第53-54页
论文附录第54页

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