| 摘要 | 第1-3页 |
| Abstract | 第3-5页 |
| 中文文摘 | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-9页 |
| 绪论 | 第9-21页 |
| 第一章 实验材料与方法 | 第21-33页 |
| 第一节 实验材料 | 第21-24页 |
| ·细胞和实验动物 | 第21页 |
| ·实验仪器与设备 | 第21页 |
| ·主要药品 | 第21-22页 |
| ·耗材 | 第22页 |
| ·试剂配制 | 第22-24页 |
| 第二节 实验方法 | 第24-33页 |
| ·复苏过程 | 第24页 |
| ·冻存过程 | 第24-25页 |
| ·细胞传代培养 | 第25页 |
| ·细胞计数 | 第25-26页 |
| ·杂交瘤细胞的克隆化筛选 | 第26页 |
| ·ELISA方法定量分析CEA mAb | 第26-27页 |
| ·腹水生产单抗 | 第27页 |
| ·抗体纯化(Protein-G柱) | 第27页 |
| ·蛋白质电泳检测(考马斯亮蓝染色) | 第27-28页 |
| ·纯化后抗体与同类国外产品的效价比对 | 第28页 |
| ·抗体的抗原决定簇的检测 | 第28-29页 |
| ·抗体保存方法效价检测与比较 | 第29页 |
| ·CEA单克隆抗体的HRP标记法及效价测定 | 第29页 |
| ·包被抗体与酶标抗体最佳稀释度的优化 | 第29-30页 |
| ·包被液的选择 | 第30页 |
| ·洗涤液的选择 | 第30页 |
| ·封闭液的选择 | 第30-31页 |
| ·封闭时间的选择 | 第31页 |
| ·酶标抗体作用时间的优化 | 第31页 |
| ·ABTS底物作用时间的优化选择 | 第31页 |
| ·双抗夹心ELISA标准曲线的建立 | 第31-33页 |
| 第二章 实验结果 | 第33-53页 |
| 第一节:单抗的生产与纯化,及酶标一抗的制备与效价检测 | 第33-45页 |
| ·细胞复苏与培养 | 第33-34页 |
| ·杂交瘤细胞的有限稀释,筛选出表达效率高的细胞株 | 第34-37页 |
| ·腹水生产及抗体效价的检测 | 第37-40页 |
| ·CEA单抗的纯化与纯化后抗体浓度检测 | 第40-41页 |
| ·蛋白质电泳检测(考马斯亮蓝染色) | 第41-42页 |
| ·纯化后抗体与同类国外产品的效价比对 | 第42-43页 |
| ·抗体的抗原决定簇的检测 | 第43页 |
| ·抗体保存方法效价检测与比较 | 第43-44页 |
| ·CEA单克隆抗体的HRP标记率及效价测定 | 第44-45页 |
| 第二节:双抗夹心ELISA方法检测癌胚抗原最适反应条件的建立 | 第45-53页 |
| ·包被抗体与酶标抗体最佳稀释度的优化 | 第45-46页 |
| ·包被液的选择 | 第46-47页 |
| ·洗涤液的选择 | 第47页 |
| ·封闭液的选择 | 第47-48页 |
| ·封闭时间的选择 | 第48-49页 |
| ·酶标抗体作用时间的优化 | 第49页 |
| ·ABTS底物作用时间的优化选择 | 第49-50页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第50-53页 |
| 第三章 分析与讨论 | 第53-59页 |
| 第一节:单抗的生产与纯化,及酶标一抗的制备与效价检测 | 第53-55页 |
| ·CEA单克隆抗体与杂交瘤细胞的克隆化筛选表达效率高的细胞株 | 第53页 |
| ·佐剂、饲养环境和小鼠种类对腹水生产单抗产量及其效价的影响 | 第53-54页 |
| ·亲和层析法进行抗体纯化 | 第54-55页 |
| ·CEA单克隆抗体的HRP标记 | 第55页 |
| 第二节:双抗夹心ELISA方法检测癌胚抗原最适反应条件的建立 | 第55-59页 |
| ·双抗夹心ELISA检测方法的影响因素 | 第55-56页 |
| ·包被条件和包被抗体浓度对夹心ELISA检测方法的影响 | 第56页 |
| ·封闭液对夹心ELISA检测方法的影响 | 第56页 |
| ·酶标抗体的稀释倍数和作用时间对ELISA检测方法的影响 | 第56-57页 |
| ·底物的选择对ELISA检测方法的影响 | 第57页 |
| ·双抗夹心ELISA法在癌胚抗原(CEA)检测中的优点与不足 | 第57-59页 |
| 第四章 结论 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-67页 |
| 攻读学位期间承担的科研任务与主要成果 | 第67-69页 |
| 致谢 | 第69-71页 |
| 个人简历 | 第71-72页 |
