黑腐病诱导的甘蓝SSH文库构建及ESTs分析
| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第12-24页 |
| ·甘蓝黑腐病的研究进展 | 第12-15页 |
| ·病原菌的生物学特性及发病症状 | 第12-13页 |
| ·黑腐病的致病机理 | 第13页 |
| ·抗病遗传特性 | 第13-14页 |
| ·抗病性鉴定 | 第14-15页 |
| ·抑制消减杂交技术(SSH)的研究进展 | 第15-18页 |
| ·抑制性差减杂交(SSH)技术的基本原理 | 第15-16页 |
| ·抑制性差减杂交(SSH)技术的基本步骤 | 第16-17页 |
| ·SSH 技术的优缺点 | 第17页 |
| ·SSH 技术要点 | 第17-18页 |
| ·SSH 技术在植物中的应用 | 第18页 |
| ·表达序列标签(ESTs)技术 | 第18-22页 |
| ·ESTs 技术概念 | 第18-19页 |
| ·EST 的技术步骤 | 第19页 |
| ·ESTs 研究现状 | 第19页 |
| ·ESTs 的应用 | 第19-21页 |
| ·EST 技术用于植物抗病机制研究的评价 | 第21-22页 |
| ·试验研究内容及技术路线 | 第22-24页 |
| ·研究内容 | 第22页 |
| ·技术路线 | 第22-24页 |
| 2 材料和方法 | 第24-36页 |
| ·试验材料 | 第24-25页 |
| ·甘蓝品种 | 第24页 |
| ·菌株 | 第24页 |
| ·病原菌分离培养 | 第24页 |
| ·化学试剂 | 第24-25页 |
| ·仪器设备 | 第25页 |
| ·试验方法 | 第25-36页 |
| ·幼苗培养与接菌 | 第25页 |
| ·抑制差减 cDNA 文库构建 | 第25-34页 |
| ·差异表达基因的反向 Northern 分析 | 第34-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-48页 |
| ·样品总 RNA 与 mRNA 质量检测结果 | 第36-37页 |
| ·抑制差减杂交检测结果 | 第37-40页 |
| ·cDNA 合成以及 cDNA 酶切效果分析 | 第37-38页 |
| ·SSH 文库消减效率检测 | 第38-39页 |
| ·蓝白斑筛选结果 | 第39页 |
| ·文库插入片段大小检测 | 第39-40页 |
| ·反向 Northern 杂交筛选结果 | 第40页 |
| ·测序结果分析 | 第40-48页 |
| ·信号传导相关基因 | 第42-43页 |
| ·代谢相关基因 | 第43页 |
| ·植物光合作用相关基因 | 第43-44页 |
| ·抗病和防御基因 | 第44-46页 |
| ·功能未知 EST | 第46页 |
| ·筛选的部分基因在甘蓝抗病反应中的作用 | 第46-48页 |
| 4 讨论 | 第48-51页 |
| ·RNA 质量与SSH 文库的构建 | 第48页 |
| ·抑制性差减杂交法(SSH)的优越性 | 第48-49页 |
| ·EST 的不足之处 | 第49页 |
| ·EST 技术用于植物抗病机制研究的评价 | 第49页 |
| ·今后的研究方向 | 第49-51页 |
| 5 结论 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第59页 |