摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
1 引言 | 第11-20页 |
·犬细小病毒 | 第11-16页 |
·犬细小病毒的概述 | 第11页 |
·犬细小病毒的结构和形态特点 | 第11-12页 |
·CPV 分子生物学特性 | 第12-14页 |
·犬细小病毒的宿主范围及细胞和组织嗜性 | 第14-15页 |
·犬细小病毒的侵入和感染途径 | 第15页 |
·细小病毒的培养特性 | 第15-16页 |
·犬转铁蛋白受体TfR | 第16-18页 |
·转铁蛋白概述 | 第16页 |
·转铁蛋白受体概述 | 第16-17页 |
·转铁蛋白受体的介导作用 | 第17-18页 |
·犬转铁蛋白受体sTfR 蛋白表达的研究进展 | 第18页 |
·研究目的和意义 | 第18-20页 |
2 实验一 TfR 基因的密码子优化及在HEK293FT 细胞中的表达 | 第20-40页 |
·材料 | 第20-24页 |
·菌株、载体和细胞 | 第20页 |
·主要试剂 | 第20-21页 |
·试验所用溶液及其配制 | 第21-23页 |
·主要仪器 | 第23-24页 |
·方法 | 第24-33页 |
·犬肝脏总RNA 的提取[60] | 第24页 |
·野生型犬sTfR 基因的扩增 | 第24-26页 |
·野生型犬sTfR 基因真核表达载体的构建 | 第26-28页 |
·sTfR 密码子优化和人工合成 | 第28-29页 |
·sTfR 密码子优化基因真核表达载体构建 | 第29-30页 |
·重组sTfR 蛋白的表达与鉴定 | 第30-33页 |
·结果与分析 | 第33-37页 |
·野生型sTfR 基因的扩增和表达载体的构建 | 第33页 |
·sTfR 基因的密码子优化 | 第33-35页 |
·sTfR 基因真核分泌型表达载体的构建 | 第35页 |
·sTfR 基因在293FT 细胞中分泌表达 | 第35-37页 |
·sTfR 蛋白与犬VP2 蛋白的结合 | 第37页 |
·讨论 | 第37-40页 |
3. 实验二 sTfR 抑制犬细小病毒感染的研究 | 第40-48页 |
·材料 | 第40页 |
·菌株、载体、细胞和病毒 | 第40页 |
·主要试剂 | 第40页 |
·主要仪器 | 第40页 |
·主要试剂配方 | 第40页 |
·实验方法 | 第40-43页 |
·重组sTfR 的大量制备 | 第40页 |
·不同细胞对犬细小病毒感染的敏感性试验 | 第40-41页 |
·犬细小病毒CPV 的鉴定 | 第41-42页 |
·犬细小病毒CPV 滴度测定—TCID50[70] | 第42页 |
·重组TfR 与病毒的结合 | 第42页 |
·重组TfR 的抗病毒实验 | 第42-43页 |
·结果与分析 | 第43-46页 |
·不同细胞对犬细小病毒感染的敏感性试验 | 第43页 |
·犬细小病毒CPV 的PCR 鉴定 | 第43-44页 |
·犬细小病毒CPV-2a 的滴度测定 | 第44页 |
·重组sTfR 蛋白与犬细小病毒结合 | 第44-45页 |
·重组sTfR 蛋白抗病毒实验 | 第45-46页 |
·讨论 | 第46-48页 |
4 结论 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-53页 |
在读期间发表的学术论文 | 第53-54页 |
作者简历 | 第54-55页 |
致谢 | 第55-56页 |